Gentier 96E全自动医用PCR分析系统标准操作规程

Gentier96E全自动医用PCR分析系统标准操作规程1仪器简介及工作原理Gentier96E全自动医用PCR分析系统是天隆科技的大通量实时荧光定量PCR仪，该仪器支持6个荧光通道和96个样本通量，适配0.2ml96孔板、8联管等耗材，内置10.4英寸触摸屏并支持PC或局域网远程控制。工作原理基于实时荧光定量PCR（qPCR）技术。核心系统包括：①精准温控——采用Peltier半导体技术控温，最大升温速率≥6.1℃/s，温度均匀性≤±0.1℃，确保各孔扩增效率一致；②高效光电——采用顶部扫描、6通道同时逐孔检测的方式，仅需7秒即可完成96孔位全部荧光信号采集，LED光源免维护。内置软件支持绝对/相对定量、熔解曲线、SNP分析等功能，广泛用于临床诊断和公共卫生领域。2仪器运行环境2.1温湿度要求：环境温度需保持在10℃～30℃，相对湿度在20%～85%之间。2.2空间与摆放：仪器应放置在平稳的实验台上，远离热源（如阳光直射、加热器）和水源。仪器四周需预留足够的散热空间，单台运行时与相邻物体的距离不应小于30cm，多台同时运行时间距不应小于80cm。2.3环境要求：实验室应通风良好、无腐蚀性气体，且无电磁干扰、振动和高频电气设备。2.4电源要求：供电电源为AC220V，电源频率为50Hz，输入功率为900VA。3授权操作人具有PCR上岗证并经本岗位培训合格人员。4工作前检查4.1确保仪器运行环境正常。4.2操作区内不允许存放不必要的物品5操作规程（实验前：使用外置紫外灯照射40分钟，实验后照射30分钟）5.1开机：打开连接仪器的电脑，启动Window系统，打开Gentier96E全自动医用PCR分析系统电源，仪器正常开机自检，自检结束后PCR仪进入待机界面，通过仪器屏幕界面样本仓开关按钮打开或者关闭样本仓。5.2打开软件及默认仪器绑定：双击电脑桌面Gentier96E全自动医用PCR分析系统软件图标“Gentier”，首次使用，打开软件，在默认打开的界面（“快速导航”界面）点击“仪器管理”，在“仪器管理”界面进行默认仪器设置（根据仪器具体型号进行设置），设置完成后关闭快速导航界面；5.3新建试验：5.3.1方式一：在“快速导航”界面选择“新建试验”，输入试验名称后点“新建”，则新建一个空试验；或在“快速导航”界面选择“从现有试验文件创建新实验”，后选择之前做过的试验，输入试验名称后点“新建”，则以之前做过的试验程序模板（温度程序+样本排布）新建一个试验文件；5.3.2方式二：关闭“快速导航”界面，在软件主界面左上角的菜单栏的“新建试验”、“从现有试验文件创建新实验”操作按钮也可以进行程序新建；5.3.3运行设置及样本设置：新建空试验后需对试验的温度程序及样本排布进行设置；5.3.3.1温度程序设置：温度程序包括“阶段”和阶段下对应的“步骤”。在软件主界面点击“运行设置”，进入运行设置界面，点击界面中部虚线边框中的“+”号，或点击界面下部阶段编辑框中的“+”，在弹出的窗口中进行温度程序类型选择，选择完后点击“添加”，完成后点“关闭”，完成温度程序阶段设置，后在对该温度程序中“阶段”的循环数及对应“阶段”下具体“步骤”的目标温度、恒温时间及是否采集荧光进行设置，设置完成后对界面右侧的试管类型、反应体系、热盖等进行设置，后完成运行设置；5.3.3.2样本设置：点击“样本设置”进入样本孔位设置界面，根据仪器样本仓中样本管放置的位置选择对应的孔位，后在界面右侧“样本类型”后的下拉式菜单中选择对应的样本类型，如：待测、标准、阳性对照、阴性对照等；根据具体孔位所放置的样本类型选择，后在下面“荧光”复选框中选择所需荧光探针，如：FAM、HEX等，所需荧光在对应荧光探针请的复选框中直接打钩即可选中，若当前显示荧光探针无所需探针，则可在每种荧光探针后下拉菜单中选择自己所需荧光探针；对应荧光探针后的编辑框可输入对应探针检测的“目标基因”；定量试验需带标准品的样本可在样本类型选择成“标准”后进行“标准品设置”，可对所选孔的标准浓度、浓度单位及所需设置的荧光进行选择，若同时对3个及以上的孔进行标准品设置则可通过“自动设置”进行设置，点击“自动设置”后在弹出的窗口中对其实浓度、倍数进行及荧光等进行设置，后点“确定”保存；在“样本设置”界面同时可以对“样本编号”、“唯一性编号”、“重复组”及参比荧光进行设置，也可对试验QC进行设置，在“QC失败条件设置”界面选择所需条件即可完成实验设置；5.4运行试验及监控：点击“运行监测”，该界面默认有四个小界面，左上角的“实时荧光”界面、右上方“热血循环”界面、左下角的“按荧光显示”的样本排布界面及右下角的“运行信息”界面，在“运行信息”界面点击选择所需连接的仪器，后点击下方“运行试验”则试验开始运行，在四个界面可以看到对应的信息，这四个界面可相互切换位置；在“实时荧光”为显示实时荧光曲线界面，默认显示全部样本孔位的曲线，该界面右上角的“仅显示选中”按钮选择后则显示样本排布界面所选中样本孔位的曲线图；5.5试验分析：试验结束后默认弹入到“分析”界面，该款仪器可进行绝对定量、相对定量、熔解曲线、HRM、基因分型的试验，可根据本次试验类型选择具体试验类型，试验结束后默认为绝对定量试验，若做其他试验可在选择“分析”界面后，在软件主界面菜单栏中选择“新建分析”按钮，在弹出的窗口中选择对应的试验，则在“分析”界面下新生成所选试验类型的分析界面；在软件主界面上方、“新建分析”按钮后有“分析设置”按钮，通过“分析设置”可进行阈值及基线设置，一般试验默认基线及阈值即可，若需调整则进入“分析设置”界面进行调整；5.6导出LIS：实验分析结束后点击主机面右上角“LIS”按钮,选择所需导出格式，导出实验数据，出报告或结果。5.7标准曲线的保存及载入功能：5.7.1该功能主要用于绝对定量实验中，当本次实验中标准曲线出现问题，需要参考之前实验中的标准曲线进行定量时使用；5.7.2当本次实验中带有标准品，且标准品样本类型及浓度也正常设置时，在“分析”中的“标准曲线”小界面可看到本次实验的标准曲线的信息，在该界面点击“保存标准曲线”，输入标准曲线名称，点击“确定”即可保存标准曲线；5.7.3在该界面，点击“载入标准曲线”，弹出对话框中选择需要载入的标准曲线，点击“确定”，即可使用载入的标准曲线对该次实验进行定量分析；点击“清除载入曲线”，可将当前载入的标准曲线清除掉。6维护与保养6.1清洁仪器外壳关闭仪器，清洁仪器外壳，用70％酒精擦拭，然后用沾有蒸馏水的纱布擦干。避免灰尘等颗粒操作中落入反应孔，不要将清洁剂、酒精等直接喷在仪器上，避免引起电子设备故障。经常用纱布沾上酒精将紫外线杀菌灯表面揩擦干净，保持表面清洁，以免影响紫外灯消毒效果。6.2清洁仪器触摸屏关闭仪器，使用干抹布轻轻擦拭触摸屏，以清除屏幕上的灰尘、油或指纹，如果屏幕仍不干净，用70％酒精擦拭，然后用沾有蒸馏水的纱布擦干；不要使用研磨性清洁剂或粗糙的材料来清洁触摸屏，防止刮花触摸屏。6.3清洁样本仓和样本模块关闭仪器，弹出样本舱，使用潮湿软布（不能有滴水现象）清洁样本舱，必要时使用温和的清洁剂（70%酒精）清洁样本舱，定期清理样本模块反应孔，确保PCR管与反应孔充分接触，导热良好，清洁时请使用干棉签清洁反应孔，若反应孔有异物，干棉签不能清理干净应使用酒精棉签进行清洁，确保孔中干净无异物，请等待样本模块温度将至待机温度后再进行清洁，禁止实验刚结束就进行清洁；清洁完成后，等待样本舱和样本模块完全干燥后再退回反应舱；不要将清洁剂、酒精等直接喷在仪器上，避免引起电子设备故障。7仪器的校准7.1每年由厂家或第三方对仪器进行检测，必要时更换高效过滤网