高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法-编制说明

团体标准《二〇二一年十月二十三日《高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法》一、标准制定的必要性小麦是世界上最主要的粮食作物之一，全世界半数以上人口以其产品和制品为主要食品。随着人们生活水平的提高，健康已成为全世界关注的焦点，对膳食结构中提供的营养也越来越重视。现代饮食结构中高糖、高脂肪的食品较多，给人们的健康带来了潜在的威胁，如“高血脂、高血压、高血糖”等富贵病。解决这一问题的关键之一是通过改良提高小麦品质，进而改善膳食结构。淀粉是食物中的主要成分，根据在小肠的可利用性，分为可消化淀粉和抗性淀粉。抗性淀粉是指在健康人小肠中不被消化吸收的淀粉及其降解物的总和，主要可分为4类：物理包埋抗性淀粉（RS1）、抗性淀粉颗粒（RS2）、回生淀粉（RS3）和化学修饰淀粉（RS4）。前人研究发现，抗性淀粉降低血糖的独特生理功能和显著的优点（热量低），一直是国内外研究人员对其进行研究的重要因素。1998年FAO（世界粮农组织）和WHO（世界卫生组织）联合出版的《“人类营养中的碳水化合物”专家论坛》一书中指出，“抗性淀粉的发现和研究进展，是近年来碳水化合物与健康关系的研究中一项最重要的成果”，高度评价了抗性淀粉对人类健康的重要意义。尽管抗性淀粉具有这么重要的生理功能，但是作为主食的普通小麦，其含量微乎其微，要从根本上解决这个问题，就要培育出高抗性淀粉小麦新品种，这也是目前小麦育种家重点研究的方向之一；而且对于小麦中抗性淀粉含量高、低指标的划分也没有明确的标准，也就是说小麦抗性淀粉含量为多少时，是高抗性淀粉小麦，低于多少时为低抗性淀粉；明确这一标准对小麦育种家来说是至关重要的。其次，通过广泛调研发现，由于小麦籽粒中营养成分比较复杂，到目前为止，国内外至今还没有现行可用的关于高抗性淀粉小麦品种的抗性淀粉含量指标定义和规范，也没有提取小麦粉中抗性淀粉的相关统一专用标准，因此，本标准的制定，将首次提出高抗性淀粉含量指标，制定高效、准确且统一的测定标准，对指导育种家培育更好的高抗性淀粉小麦新品种，满足人民群众对生活质量和健康水平的新需求，确保我国营养导向型农业的健康发展来说重大意义。综上所述，研发制定高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和检测方法对行业的发展是十分必要的，对培育高抗性淀粉小麦品种和开发健康的特色专用食品具有广阔的市场前景和良好的社会效益。二、标准编制原则及依据1.按照GB/T1.1－2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》要求进行编写。2.参照相关法律、法规和规定，在编制过程中着重考虑了科学性、适用性和可操作性。三、项目背景及工作情况（一）任务来源随着社会经济发展，全球农业发展研究热点也聚焦于探寻农业、营养、健康的关系，农作物品种也有了新需求。2017年国家《主要农作物品种审定标准》（国品审【2017】1号）首次在高产品种之后提出绿色优质品种和特殊用途品种的新类型，使我国的农作物育种导向发生了重大变化，功能性小麦品种迎来了前所未有的发展机遇。根据《中国国际科技促进会标准化工作委员会团体标准管理办法》的有关规定，经中国国际科技促进会标准化工作委员会及相关专家技术审核，批准《高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法》团体标准制定计划，计划编号为：CI2021080。本标准中国国际科技促进会标准化工作委员会提出，中国国际科技促进会归口。根据计划要求，本标准完成时限为5个月。（二）标准起草单位本标准的编制工作由山东华田农业科技有限公司，山东天泽泰田种业科技有限公司，山东国仓健生物科技有限公司，山东农业大学，山东莱州宏源面粉有限公司，泰安市谷香园食品有限公司共同完成。山东华田农业科技有限公司负责标准文档起草及相关文件的编制等工作。，山东天泽泰田种业科技有限公司，山东国仓健生物科技有限公司，山东农业大学，山东莱州宏源面粉有限公司，泰安市谷香园食品有限公司共6家单位作为参与单位共同完成，负责标准中重要技术点的研究和建议，并参与标准内容的讨论。牵头单位与参与单位为此专门成立《高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法》团体标准起草小组，负责本标准的各项工作。（三）编写人员与分工编写人员：田纪春，邓志英，胥倩、于海霞、彭莉、王群青、刘振、赵善仓、王西振、王延训、杨明、吕民全、谢秀伦、由佳辉。姓名工作单位职称/职务承担任务田纪春山东农业大学教授主持人，负责项目整体规划设计、标准起草和规范性审核邓志英山东农业大学教授副主持人，协助项目整体规划设计、确定标准内容和检测方法，起草标准胥倩山东国仓健生物科技有限公司教授分析国内外小麦籽粒中抗性淀粉含量水平于海霞山东农业大学高级实验师负责抗性淀粉含量检测方法优化彭莉山东天泽泰田种业科技有限公司负责抗性淀粉含量检测王群青山东农业大学教授分析我国居民麦黄酮摄入水平刘振山东国仓健生物科技有限公司技术总监负责标准起草、麦黄酮检测方法优化赵善仓山东省农业科学院研究员负责抗性淀粉含量检测王西振山东国仓健生物科技有限公司总经理负责标准规范性审核上报杨明山东华田农业科技有限公司工程师小麦及面粉中麦黄酮含量检测验证王延训山东华田农业科技有限公司农艺师小麦麦黄酮品种种植吕民全山东莱州宏源面粉有限公司高级制粉师高麦黄酮品种制粉技术和面粉产品研发谢秀伦泰安市谷香园食品有限公司总工程师高麦黄酮品种食品技术研制和产品研发由佳辉山东国仓健生物科技有限公司工程师小麦及面粉中麦黄酮含量检测验证（四）标准研制过程及相关工作计划1.标准起草组成立2021年8月16日召开第一次会议成立标准起草组。标准起草牵头单位山东华田农业科技有限公司，与参加单位山东天泽泰田种业科技有限公司,山东国仓健生物科技有限公司，莱州宏源面粉有限公司，泰安市谷香园食品有限公司经讨论研究，建议编制高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法团体标准。2021年9月1日在山东泰安召开第一次标准工作会议，标准起草小组正式成立。在本次会议上，部分标准起草人对国内外小麦籽粒中抗性淀粉含量指标研究现状、检测方法和规范，高抗性淀粉小麦种植、加工及消费情况进行了深入、全面分析，并对拟制定标准内容进行探讨，确定了编制原则，明确了各单位任务分工及标准制修订项目实施计划。2.收集查阅相关资料、实地调研标准编制人员按既定分工从不同方面收集数据和查阅相关文献、书籍等资料，主要包括国内外抗性淀粉及高抗性淀粉小麦的术语、定义、范围，抗性淀粉及高抗性淀粉小麦的研究现状、高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标，以及小麦籽粒及制品中抗性淀粉测定方法等。标准起草小组还先后对山东华田农业科技有限公司（育种和种植公司），山东天泽泰田种业科技有限公司（种植公司），山东国仓健生物科技有限公司（检测公司），山东农业大学（研发育种科研单位），莱州宏源面粉有限公司（收购、加工公司），泰安市谷香园食品有限公司（食品加工利用公司）等单位进行实地调研，详细的了解小麦籽粒中抗性淀粉含量测定的样品制备工艺、测试工艺、检测方法。3.编制标准讨论稿根据前期资料收集、整理和实地调研情况，按照本标准制定的编制原则，参照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求，2021年9月下旬完成标准讨论稿的编制。4.召开第二次标准工作会议2021年10月11日在山东泰安召开第二次标准工作会议。本次会议对意见稿中，从不同角度讨论高抗性淀粉小麦籽粒抗性淀粉含量下限的确定和探讨小麦籽粒中抗性淀粉的检测方法、判定规则等相关问题。会后根据讨论结果，修改标准稿件，并撰写标准编制说明。5.召开第三次标准工作会议2021年11月28日在山东泰安召开第三次标准工作会议。本次会议对标准文本和编制说明进行最后确定讨论。会后根据讨论结果，修改稿件及编制说明，形成公开征求意见稿。6.公开征求意见2021年11月30日，标准起草组将《高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标和测定方法》“公开征求意见稿”以电子邮件的方式分别发送给***大学、***大学、***大学、***研究所、***检测中心等单位同行业专家；同时由中国国际科技促进会审查后提交全国标准信息平台公示；为减少疫情期间不必要的人员聚集，专家组采用线上交流，通讯评议的方式提出修改意见及建议，计划2021年12月底召开专家评审会。四、标准编制原则和确定标准主要内容（一）编制原则本标准严格按照GB/T1.1-2020的要求和规定编写编制。协调性原则。本文件旨在规范高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标及测定方法。在内容上力求与相关现有标准相协调，充分参考GB1351、AACCI32-40.01、NY/T2638-2014等相关内容，科学制定高抗性淀粉小麦籽粒中抗性淀粉含量指标及测定方法。必要性原则。标准编写过程中坚持必要性原则，仅对高抗性淀粉小麦进行了术语规范和定义。适用性原则。标准编写过程中坚持适用性原则，从服务育种、种植和加工应用利益出发，充分考虑行业发展需求，保证标准内容方便被其他标准或文件引用且可操作性强。科学性原则。在标准制定过程中充分调研与高抗性淀粉小麦相关的研究、检测和生产企业，归纳总结共性指标和因素，综合全面考虑，并广泛吸收专家意见，逐一对标准各部分内容进行科学规范。（二）主要内容本标准主要内容如下：1.范围本标准规定了高抗性淀粉小麦的术语定义和感官、质量、抗性淀粉含量等技术要求，以及检验方法、检验规则。本标准适用于在生产、储运、加工、检测、认证、销售过程中对高抗性淀粉小麦进行判定、评价。2.规范性引用文件本标准引用文件均为国家标准，共计5项，其中有2项强制性标准、3项为推荐性国家标准。GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T603-2002化学试剂_试验方法中所用制剂及制品的制备GB1351-2008小麦GB1355-1986小麦粉3.术语和定义本标准对抗性淀粉、高抗性淀粉小麦进行定义。抗性淀粉(Resistantstarch)又称抗酶解淀粉，在小肠中不能被酶解为葡萄糖，利于降低血糖指数（GI）；在肠胃道和结肠中利于菌群发酵，产生短链脂肪酸，促进肠蠕动，防止便秘和结肠癌病变的一类淀粉。高抗性淀粉小麦在生长发育过程中，自然产生和积累的抗性淀粉含量>5%的一类小麦品种（系）。4.测定方法4.1原理首先用胃蛋白液消化样品，去除蛋白质，然后用α-淀粉酶和淀粉葡萄糖苷酶（AMG）将样品中的非抗性淀粉水解成D-葡萄糖，然后加入乙醇终止反应，接着离心上述溶液，底部残留絮状团即为抗性淀粉。然后将絮状团置于冰水浴中，加入氢氧化钾溶液将之溶解，用AMG将抗性淀粉定量水解成D-葡萄糖，与葡萄糖氧化酶/过氧化物酶（GOPOD）试剂会产生显色反应，形成复合物，在510nm下测定其吸光度值，根据吸光度值与抗性淀粉含量成正比，计算出抗性淀粉含量。4.2试剂和材料4.2.1试剂除非另有规定，仅使用分析纯试剂。水为GB/T6682规定的三级水4.2.1.1氯化钾（KCl）。4.2.1.2氢氧化钠（NaOH）。4.2.1.3氢氧化钾（KOH）。4.2.1.4二水合氯化钙（CaCl2·2H20）。4.2.1.5叠氮化钠（NaN3）。警告——叠氮化钠为剧毒物品，操作不当可引起爆炸。4.2.1.6磷酸二氢钾（KH2PO4）。4.2.1.7盐酸（HCl）。4.2.1.8马来酸（C1H1O1）。4.2.1.9苯甲酸（C7H6O2）。4.2.1.104-氨基安替比林（C11H13N3O）。4.2.1.11对羟基苯甲酸（C7H6O3）。4.2.1.12乙醇（CH3CH2OH）。4.2.1.13冰乙酸（CH3COOH）。4.2.1.14α-淀粉酶（Biotopped最适温度50℃-70℃，最适pH5.5-7.5，活性大于6000U/mg）。4.2.1.15葡萄糖氧化酶。4.2.1.16过氧化物酶。4.2.1.17胃蛋白酶（Biotopped1：3000）。4.2.1.18D-葡萄糖标准品（C6H12O6。纯度：99.5%）。4.2.1.19淀粉葡萄糖苷酶原液AMG（3300U/mL）：直接购买使用。该溶液在4℃可保存5年。4.2.2溶液配制4.2.2.1氢氧化钠溶液[c（NaOH）=4.0mol/L]：称取160.0g氢氧化钠加适量水溶解定容至1000mL。4.2.2.2氢氧化钠溶液[c（NaOH）=2.0mol/L]：称取80.0g氢氧化钠加适量水溶解后定容至1000mL。4.2.2.3氢氧化钾溶液[c（KOH）=2.0mol/L]：称取112.2g氢氧化钾加适量水溶解后定容至1000mL。该溶液在室温下可保存12个月。4.2.2.4盐酸溶液[c（HCl）=0.1mol/L]：量取8.4mL浓盐酸，加适量水并稀释至1000mL。4.2.2.5盐酸溶液[c（HCl）=2.0mol/L]：量取180.0mL浓盐酸，加适量水并稀释至1000mL。4.2.2.6氯化钾溶液[c（KCl）=0.1mol/L]：称取7.35g氯化钾，溶于适量水中并定容至1000mL。4.2.2.7氯化钾盐酸缓液（KCl–HCl0.1mol/L，pH1.5）：向氯化钾溶液中加入盐酸溶液调节pH为1.5。4.2.2.8苯甲酸溶液[c（C6H3COOH）=0.2%]：称取0.2g苯甲酸溶于水定容至100mL。4.2.2.9马来酸钠缓冲液[c（C3H3O3COONa）=100mmol/L，pH6.0]：称取23.2g马来酸溶于1600mL水中，用氢氧化钠溶液（4.2.2.1）调至pH为6.0，然后加入0.6g二水合氯化钙和0.4g叠氮化钠，最后定容至2000mL。该溶液在4℃可保存12个月。4.2.2.10乙酸钠缓冲液[c（CH3COONa）=1.2mol/L，pH3.8]：量取70mL冰乙酸至800mL水中，用氢氧化钠溶液（4.2.2.1）调至pH为3.8，最后定容至1000mL。该溶液在室温下可保存12个月。4.2.2.11乙酸钠缓冲液[c（CH3COONa）=100mmol/L，pH4.5]：量取5.8mL冰乙酸至900mL水中，用氢氧化钠溶液（4.2.2.1）调至pH为4.5，最后定容至1000mL。该溶液可在4℃保存2个月。4.2.2.12乙醇溶液[c（CH3CH2OH）=50%，体积分数]：500mL无水乙醇加水定容至1000mL。该溶液在室温下可保存12个月。4.2.2.13胃蛋白酶液（10%W/V）：称取10.0g胃蛋白酶溶于盐酸溶液（4.2.2.4）中并定容至100mL。4.2.2.14淀粉葡萄糖苷酶使用液（300U/mL）：吸取2.0mLAMG（4.2.1.19）用马来酸钠缓冲液（4.2.2.9）稀释至22mL，分装于聚丙烯塑料管，放于-20℃保存。4.2.2.15α-淀粉酶悬浮液[10mg（30U/mL）+AMG（3U/mL）]：称取1.0gα-淀粉酶溶于100mL马来酸钠缓冲液（4.2.2.9）中，搅拌5min。加入1.0mL淀粉葡萄糖苷酶使用液（4.2.2.14），混匀后，>1500g离心10min，取上清液。该溶液现配现用。4.2.2.16GOPOD—氨基安替比林储备液：称取136.0g磷酸二氢钾，42.0g氢氧化钠和30.0g对羟基苯甲酸至900mL水中溶解，用盐酸溶液（4.2.2.5）或氢氧化钠溶液（4.2.2.2）调节该溶液的pH至7.4，定容1000mL，加入1.0g叠氮化钠，溶解混匀。该溶液于4℃可保存3年。4.2.2.17GOPOD—氨基安替比林缓冲液：吸取50.00mLGOPOD—氨基安替比林储备液（4.2.2.16）定容至1000mL。4.2.2.18GOPOD—氨基安替比林混合液[葡萄糖氧化酶（>12000U/L）+过氧化物酶（>650U/L）+4-氨基安替比林0.4mmol/L]：称取300mg葡萄糖氧化酶、4mg过氧化物酶和80mg4-氨基安替比林混合，溶于1000mLGOPOD—氨基安替比林缓冲液（4.2.2.17）中。此溶液需避光保存，-20℃可保存1年。4.2.2.19D-葡萄糖标准储备液（1.0g/L）：称取1.00gD-葡萄糖（99.5%，无结晶水，分析纯）至900mL苯甲酸溶液（4.2.2.8），定容至1000mL。室温下密封保存时间可保5年。4.3材料小麦籽粒4.4仪器和设备4.4.1分析天平（±0.0001g）。4.4.2离心机（3000g）。4.4.3pH计。4.4.4旋风实验磨。4.4.5水浴锅。4.4.6涡旋混匀器。4.4.7磁力搅拌器。4.4.8磁力搅拌棒（5mm×15mm）。4.4.9计时器。4.4.10具有螺旋盖塑料离心试管（15mL）。4.4.11容量瓶（100mL，200mL，500mL，1L，2L）。4.4.12温度计[（37±0.1）；（50+0.1）℃]。4.4.13具螺旋盖塑料离心试管（16mm×125mm）。4.4.14玻璃试管（16mm×100mm）。4.4.15塑料盒。4.4.16移液器（200μL，1000μL）。4.4.17分光光度计（能够设定510nm，10mm路径长度）。4.5试样制备小麦籽粒约50g，用旋风磨磨碎，小麦粉过1.0mm筛子，混匀后保存于广口瓶中，密封备用。4.6分析步骤4.6.1试液制备做2份平行试液。准确称取干样100mg(±5mg)样品于带螺旋帽试管中，轻轻拍打试管使样品集中在底部。加入200μL蒸馏水于各试管中，在电热恒温水槽100℃条件下煮20min，然后保温10min。加入氯化钾盐酸缓冲液(4.2.2.7)2mL，模仿咀嚼用玻璃棒将之捣碎。加入胃蛋白酶液(4.2.2.13)100μL，37℃条件下消化1h，除去蛋白质。加入马来酸钠缓冲液(4.2.2.9)4.0mL，α-淀粉酶悬浮液（4.2.2.15）4.0mL，再用氢氧化钠溶液（4.2.2.1）约100μL将pH调至6.9。旋紧试管盖，置于涡旋振荡器混匀，卧式放入水浴摇床(与运动方向平行)，于65℃准确振荡5h。取出试管，擦去外表水分。开启试管盖，加入4.0mL无水乙醇，涡旋，1500g离心10min(不加盖)。倾出上清液，加入2.0mL乙醇溶液，重悬浮。涡旋振荡，再加入6.0mL乙醇溶液，混合后，1500g离心10min。弃去上清液重复上述重悬浮和离心步骤。弃去上清液，翻转试管，用滤纸吸除多余的液体。将试管置于冰水中，在各试管中放入磁力搅拌棒并加入2.0mL氢氧化钾溶液(4.2.2.3)，在冰水状态搅拌20min后，边搅拌边向各试管中顺序加入8.0mL的乙酸钠缓冲液(4.2.2.10)和0.1mLAMG(4.2.1.19)，混匀。取出试管，于50℃水浴30min，期间2次取出试管涡旋振荡，水浴完成后直接离心(抗性淀粉含量<10%的样品)。[对于抗性淀粉含量≥10%的样品，用水全部转移试管里的样品至100mL容量瓶(当用洗瓶洗涤试管中的溶液时用外磁铁保持试管中的磁力棒)定容备用。]4.6.2D-葡萄糖标准比色溶液将0.1mLD-葡萄糖标准储备液(4.2.2.19)和3.0mL的GOPOD—氨基安替比林混合液(4.2.2.18)混合。4.6.3空白溶液制备玻璃试管中加入0.1mL的乙酸钠缓冲液(4.2.2.11)和3.0mL的GOPOD—氨基安替比林混合液(4.2.2.18)混合。4.6.4试液的测定将上述待测液（4.6.1）1500g离心10min，吸取上清液0.10mL置于玻璃试管，加入3.0mLGOPOD—氨基安替比林混合液(4.2.2.18)，50℃水浴20min后取出，以空白溶液（4.6.3）调零点，在510nm处测定试液（4.6.1）和D-葡萄糖标准比色液（4.6.2）的吸光度值。4.7结果计算4.7.1试样中抗性淀粉含量以质量分数ω（g/100g，以干重计），计算按式（1）、式（2）进行计算。抗性淀粉（g/100g样品）（含量≥10%）（1）抗性淀粉（g/100g样品）（含量<10%）（2）式中：∆A——相对于空白试剂的吸光度值；F——从吸光度值到微克的转换[在GOPOD反应中100μgD-葡萄糖的吸光度值是确定的，F=100（D葡萄糖的微克数）/100gD-葡萄糖在GOPOD反应中的吸光度].单位为微克（μg）；M——试样的质量，单位为毫克（mg）；10.3——含量<10%样品的最终体积，单位为毫升（mL）；162/180——从测定获得的游离D-葡萄糖转换到淀粉中存在的无结品水-D-葡萄糖的因子计算结果保留三位有效数字。4.7.2精密度当样品含量<2g/100g时，在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于这两个测定值算术平均值的10%。当样品含量=2g/100g时，在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值算术平均值的5%。五、主要试验（或验证）的分析、综合报告，技术经济论证，预期的经济效果（一）中国小麦抗性淀粉含量情况分析前人对普通小麦抗性淀粉含量进行了研究，发现普通小麦品种中抗性淀粉含量较低，一般在0.3%-2.5%。刘素君等[1]测定了30个河南主推小麦品种的抗性淀粉含量，其变异范围为1.47%-2.28%，平均为1.88%；庞欢等[2]测定了6个春小麦品种，抗性淀粉含量最高为2.67%，最低为0.59%；王琳等[3]通过对200份春小麦的筛选，鉴定出抗性淀粉含量差异最大的两个材料M344和武春3号，含量分别为3.07%和0.54%；张志转[4]从苏麦6号突变体中筛选到抗性淀粉含量为3.8%的突变体；薛芳等[5]利用不同浓度EMS(0.3%、0.5%和0.7%)处理新春11，发现M2代籽粒平均抗性淀粉含量分别为2.76%、3.22%和4.31%，最高可达5.41%；夏兰琴等[6]利用基因编辑技术敲除郑麦7698和Bobwhite的TaSBEIIa基因，获得抗性淀粉含量分别高达6.6%和8.7%的突变体。由此可知，普通小麦材料间抗性淀粉含量是有差异的，但含量都较低。抗性淀粉含量可通过生物技术手段和诱变技术进行改良。本团队已有近20年的抗性淀粉方面的研究，使用改良的抗性淀粉提取方法对创制的16份小麦材料进行了精确定量检测，结果表明小麦籽粒中抗性淀粉含量最高8.68%，亲本对照最低为0.19%，并筛选出抗性淀粉含量高于5%的突变体材料10份。参考文献：[1]刘素君，姚永伟，高宏欢，杜晨阳，王晨阳，方保停，李向东，谢迎新，马冬云.不同小麦品种抗性淀粉含量及其与其他淀粉品质性状的关系[J].麦类作物学报,2020,40(4):455-463.[2]庞欢，李卫华，张宏斌，等．小麦籽粒抗性淀粉含量的分析［J］．遗传，2010,32（2）：172.[3]王琳,李卫华,庞欢,银永安,苑会功,刘磊.小麦高抗性淀粉含量相关分子标记的筛选与验证.类作物学报2009,29(3):390-395.[4]张志转.高抗性淀粉小麦淀粉特性及其与营养成分相关性.安徽农业大学，硕士论文，2008.[5]薛芳,褚洪雷,胡志伟,王雪梅,李卫华.EMS对新春11小麦抗性淀粉和农艺性状的诱变效果.类作物学报2010,30(3):431-434.[6]JingyingLi,GuiaiJiao,YongweiSun1,JunChen,YingxinZhong,LeiYan,DongJiang,YouzhiMa,LanqinXia.Modificationofstarchcomposition,structureandpropertiesthrougheditingofTaSBEIIainbothwinterandspringwheatvarietiesbyCRISPR/Cas9.PlantBiotechnologyJournal,2021,19:937–951.（二）抗性淀粉含量测定方法小麦是禾谷类作物中最为复杂的，其营养成分也丰富，其中直、支链淀粉是小麦营养物质中研究最多的成分。前人曾将直链淀粉的含量作为小麦抗性淀粉的含量，尽管二者呈现一定的正相关关系，但不尽相同，这就涉及到如何精确测定小麦粉中抗性淀粉的含量。然而目前小麦中还没有相应的测定小麦抗性淀粉含量的标准方法。通过国内外相关标准查询和比对，发现有2个相关的标准，一个是农业行业标准，是稻米及制品中抗性淀粉的测定-分光光度法[1]，另一个是美国谷物化学协会AACCI32-40.01Resistantstarchinstarchsamplesandplantmaterials[2].前一个标准是关于稻米及其制品的，后一个标准是关于淀粉类样品和植物材料的。基于AACC法标准，Megazyme公司开发了抗性淀粉试剂盒法。这些检测方法耗时太长，测定一批样品当天完不成，需要2天才能完成，效率太低。且上述检测方法，必须是样品中抗性淀粉含量大于2%，检测结果才更准确。但是没有查询到小麦粉及制品中抗性淀粉含量的测定