2023年6月基因工程模拟习题及答案（附解析）

2023年6月基因工程模拟习题及答案（附解析）一、单选题（共60题，每题1分，共60分）1.DNA的结构对转化的影响很大，一般说来，转化效率最高的是：A、完整的线性双链DNAB、单链线性DNAC、完整的环状双链DNAD、开口的双链环状DNA正确答案：A2.聚合酶链反应体系不包括：A、模板DNAB、TaqDNA聚合酶C、特异引物D、ddNTPE、含Mg2+缓冲液正确答案：D答案解析：聚合酶链反应体系包括模板DNA、TaqDNA聚合酶、特异引物、含Mg2+缓冲液等，ddNTP是用于DNA测序的，不是聚合酶链反应体系的成分。3.限制性核酸内切酶：A、可将单链DNA任意切断B、可将双链DNA序列特异切开C、可将两个DNA分子连接起来D、不受DNA甲基化影响正确答案：B答案解析：限制性核酸内切酶能够识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列，并在特定的位点将其切开，具有序列特异性，所以可将双链DNA序列特异切开。它不能将单链DNA任意切断，A错误；将两个DNA分子连接起来的是DNA连接酶，C错误；限制性核酸内切酶受DNA甲基化影响，D错误。4.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?A、质粒B、黏粒C、酵母人工染色体(YAC)D、λ噬菌体正确答案：C答案解析：酵母人工染色体（YAC）是一种能够克隆长达几百kb的外源DNA片段的克隆载体，其对外源DNA的容载量在这些选项中是最大的。质粒一般容载量较小；黏粒的容载量比YAC小；λ噬菌体的容载量也相对有限。5.反义核酸作用主要是：A、封闭DNAB、封闭RNAC、降解DNAD、降解DNAE、封闭核糖体的功能正确答案：B答案解析：反义核酸是一类能与特定核酸序列互补结合，从而封闭RNA的核酸分子。它可以通过与靶RNA结合，阻止其发挥正常功能，如阻断mRNA的翻译、影响RNA的剪接等，达到调控基因表达的目的。而不是封闭DNA、降解DNA或封闭核糖体功能等其他选项所描述的作用。6.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是：A、在细胞分裂时恒定地传给DNAB、携带有某些抗生素抗性基因C、小型环状双链DNAD、具有自我复制功能E、获得目的基因正确答案：D答案解析：质粒DNA作为克隆载体必须具有自我复制功能，这样才能在宿主细胞中稳定存在并大量扩增，以携带目的基因进行后续操作。选项A，能在细胞分裂时恒定传给子代细胞不是质粒作为克隆载体最关键特性；选项B，携带有某些抗生素抗性基因可用于筛选，但不是最核心特性；选项C，小型环状双链DNA是质粒的结构特点，不是作为克隆载体的关键特性；选项E，获得目的基因不是质粒作为克隆载体本身的特性，而是克隆载体的用途。7.PCR实验的特异性主要取决于：A、DNA聚合酶的种类B、反应体系中模板DNA的量C、引物序列的结构和长度D、四种dNTP的浓度E、循环周期的次数正确答案：C答案解析：引物是PCR特异性的关键因素，引物序列的结构和长度决定了引物与模板DNA结合的特异性，进而影响PCR反应的特异性。DNA聚合酶种类主要影响反应效率等；模板DNA量影响扩增产物量；四种dNTP浓度影响反应进行；循环周期次数影响产物数量，但都不如引物序列对特异性影响大。8.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是：A、营养互补筛选B、抗药性筛选C、免疫化学筛选D、PCR筛选E、分子杂交筛选正确答案：B答案解析：最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是抗药性筛选。一般构建重组质粒时会带有某种抗生素抗性基因，将重组质粒导入细菌后，在含有该抗生素的培养基上培养，能生长的细菌就可能含有重组质粒，以此来筛选出含重组质粒的细菌。营养互补筛选一般用于特定营养缺陷型菌株等情况；免疫化学筛选常用于检测蛋白质表达等；PCR筛选和分子杂交筛选也可用于检测，但不是最常用的筛选含重组质粒细菌的方法。9.探针的种类包括：A、基因组DNA探针B、cDNA探针C、寡核苷酸探针D、RNA探针E、以上均是正确答案：E答案解析：探针的种类包括基因组DNA探针、cDNA探针、寡核苷酸探针、RNA探针等，所以以上选项均正确，答案为E。10.不经电泳分离直接将样品点在硝酸纤维素膜上的技术是：A、Eastern杂交B、Northern杂交C、Western杂交D、斑点杂交正确答案：D答案解析：斑点杂交是将样品直接点在硝酸纤维素膜上，而不是先进行电泳分离，然后再进行杂交检测等后续操作，符合不经电泳分离直接点样的特点。Eastern杂交主要用于检测蛋白质与蛋白质相互作用等；Northern杂交是用于检测RNA；Western杂交是用于检测蛋白质，这几种杂交技术通常都需要先进行电泳分离等操作。11.在质粒提取的步骤里，异戊醇的作用是：A、使蛋白质脱水B、使DNA脱水C、减少气泡，有助于相的稳定D、帮助DNA进入水相正确答案：C答案解析：异戊醇的作用主要是减少气泡，有助于相的稳定。在质粒提取过程中，加入异戊醇可以降低表面张力，使离心过程中产生的气泡减少，从而使有机相和水相之间的界面更加清晰、稳定，有利于后续的分层等操作，便于更好地分离出质粒DNA等物质。12.在分子生物学上“重组DNA技术”又称为：A、酶工程B、蛋白质工程C、细胞工程D、发酵工程E、分子克隆技术正确答案：E答案解析：重组DNA技术是指将一种生物体（供体）的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体（受体）内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。酶工程主要是利用酶的催化作用进行物质转化等；蛋白质工程是对蛋白质进行改造；细胞工程是细胞水平的操作；发酵工程主要是利用微生物发酵生产产品等，均与重组DNA技术不同。13.用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，是因为：A、染色体DNA断成了碎片B、染色体DNA分子量大，而不能释放C、染色体变性后来不及复性D、染色体未同蛋白质分开而沉淀正确答案：C答案解析：在碱法分离质粒DNA时，染色体DNA会变性，但由于其分子量大，复性速度慢，在溶液恢复中性时，质粒DNA已快速复性并保持可溶状态，而染色体DNA来不及复性，会与蛋白质等一起形成沉淀，从而被除去。选项A中染色体DNA不是断成碎片；选项B不是因为分子量大不能释放；选项D染色体是与蛋白质分开后沉淀的，且不是不能释放而是来不及复性沉淀。14.Maxam-Gilbert法与Sanger法测序的共同点是均需：A、引物B、电泳后放射自显影读图C、Klenow酶D、dNTPE、化学裂解试剂正确答案：B15.促红细胞生长素（EPO）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：A、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用B、人的促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定C、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化D、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感正确答案：C答案解析：促红细胞生长素是一种糖蛋白，而大肠杆菌属于原核生物，细胞中没有内质网和高尔基体等细胞器，不能对蛋白质进行糖基化修饰，所以不能用大肠杆菌的基因工程菌生产人的促红细胞生长素。选项A中促红细胞生长素对大肠杆菌无毒性作用；选项B中基因在大肠杆菌中可以稳定存在；选项D与不能生产促红细胞生长素的原因无关。16.包涵体是一种：A、受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒B、大肠杆菌的亚细胞结构C、噬菌体或病毒DNA的体外包装颗粒D、外源基因表达产物的混合物正确答案：A答案解析：包涵体是外源基因在原核细胞中表达时，常形成的一种由蛋白质组成的、具有一定空间构象的不溶性聚合体，难溶于水，所以答案选A。17.多克隆位点：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性正确答案：B答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的含有多种限制酶识别序列的一段DNA序列，它使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性。选项A中含有许多拷贝的克隆化基因不符合多克隆位点的定义；选项C中含有许多拷贝的同一种限制酶位点错误，多克隆位点是多种限制酶位点；选项D中使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性也不正确，多克隆位点主要是关于限制酶选择的灵活性。18.PCR退火温度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正确答案：E答案解析：PCR退火温度一般在55℃-65℃之间，所以大于55℃符合要求，其他选项温度过高不符合退火温度范围。19.Sanger法测序的基本步骤不包括：A、标记模板B、模板-引物杂交C、引物的延长与合成阻断D、电泳E、放射自显影直读图正确答案：A答案解析：Sanger法测序基本步骤包括模板-引物杂交、引物的延长与合成阻断、电泳、放射自显影直读图等，不包括标记模板。20.cDNA是指：A、在体外经反转录合成的与RNA互补的DNAB、在体外经反转录合成的与DNA互补的DNAC、在体外经转录合成的与DNA互补的RNAD、在体外经反转录合成的与RNA互补的RNAE、在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA正确答案：A答案解析：反转录是以RNA为模板合成DNA的过程，cDNA就是在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA。B选项与DNA互补合成的DNA错误；C选项转录合成的是RNA且与DNA互补错误；D选项合成的是DNA不是RNA错误；E选项与DNA互补错误。21.同一种质粒DNA，以三种不同形式存在，电泳时它们的迁移率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正确答案：B22.第一个作为重组DNA载体的质粒是：A、pBR322B、pSC101C、pUC19D、pET-28a正确答案：B答案解析：1973年，Cohen等人将编码四环素抗性和链霉素抗性的两个质粒通过DNA连接酶连接在一起，构建成了第一个重组DNA分子。1977年，Boyer等人构建了pSC101质粒，它是第一个作为重组DNA载体的质粒。pBR322是较常用的质粒载体；pUC19是在pBR322基础上改造的；pET-28a是用于原核表达的载体。23.对照密码表，当用UUGUGUGGU一段共聚核苷酸为模板时，所合成的多肽链是：A、Phe-Leu-ValB、Val-Cys-GlyC、Leu-Val-CysD、Leu-Cys-Gly正确答案：D24.同一种质粒DNA，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正确答案：B答案解析：超螺旋DNA（SCDNA）由于其紧密的结构，在电场中移动速度最快；线性DNA（LDNA）次之；开环DNA（OCDNA）结构较为松散，迁移速率最慢。25.Klenow酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了下面哪种酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、转移酶正确答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶切割后产生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但丧失了5′→3′外切酶活性。26.多克隆位点：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用限制酶的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性正确答案：B答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的含有多种限制酶识别序列的DNA片段，它可以插入外源DNA片段，使得对克隆所用限制酶的选择具有灵活性。选项A中说含有许多拷贝的克隆化基因错误；选项C中含有许多拷贝的同一种限制酶位点不准确；选项D中说对克隆所用生物种类的选择具有灵活性也不正确。27.Sanger法测序需要：A、S1核酸酶B、末端核苷酸转移酶C、Klenow大片段D、反转录酶E、Klenow小片段正确答案：C答案解析：Sanger法测序需要利用DNA聚合酶来延伸引物并合成新的DNA链，Klenow大片段是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶裂解后产生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，在Sanger法测序中发挥重要作用。28.双脱氧链末端终止法测序不需要：A、Klenow小片段B、引物C、dNTPD、标记dNTPE、ddNTP正确答案：A答案解析：双脱氧链末端终止法测序需要引物、dNTP、标记dNTP、ddNTP，不需要Klenow小片段，Klenow小片段是DNA聚合酶I经枯草杆菌蛋白酶裂解后产生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，而双脱氧链末端终止法测序一般用的是测序酶等，不是Klenow小片段。29.不是所有松弛型质粒都需要进行扩增，如pUC载体系统就不必进行氯霉素扩增，这是因为该质粒的拷贝数很高，可以达到：A、30～50B、100～200C、300～400D、500～700正确答案：D30.同一种质粒DNA，以三种不同形式存在，电泳时它们的迁移率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正确答案：B答案解析：超螺旋DNA（SCDNA）由于其紧密的结构，在电场中移动速度最快；线性DNA（LDNA）次之；开环DNA（OCDNA）结构较为松散，迁移速度最慢。31.如果没有得到PCR产物，下面哪个不是导致扩增失败的原因?A、可能没有加入酶B、DNA解链不充分C、人工合成的引物错误D、减少循环周期次数正确答案：D答案解析：如果没有得到PCR产物，扩增失败的原因可能有多种。选项A中没有加入酶会导致无法进行扩增反应；选项B中DNA解链不充分会影响引物与模板的结合，进而影响扩增；选项C中人工合成的引物错误也无法正确引导扩增。而选项D减少循环周期次数一般不会直接导致扩增失败，只是可能会使扩增产物量减少，不是导致完全没有PCR产物的原因。32.DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列那一项原因不太可能？A、酶失活B、蛋白质（如BSA）同DNA结合C、酶切条件不合适D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：A33.下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?A、甘油含量过高B、反应体系中含有有机溶剂C、含有非Mg2＋的二价阳离子D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：D答案解析：星号活性是指在非理想的反应条件下，限制酶切割产生的非特异性条带。甘油含量过高、反应体系中含有有机溶剂、含有非Mg2＋的二价阳离子等都可能导致星号活性，而酶切反应时酶浓度过低主要影响酶切效率，一般不会直接导致星号活性。34.关于多克隆位点描述正确的是：A、含有许多拷贝的克隆化基因B、使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性C、含有许多拷贝的同一种限制酶位点D、使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性正确答案：D答案解析：多克隆位点是指载体上人工合成的一段DNA序列，其中含有多个不同限制酶的识别序列，这使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性。A选项含有许多拷贝的克隆化基因不是多克隆位点的特点；B选项多克隆位点主要是方便限制酶切割，与生物种类选择灵活性无关；C选项不是含有许多拷贝的同一种限制酶位点，而是多种不同限制酶位点。35.tRNA的反密码子GCC对应的密码子是：A、5’-GGC-3’B、5’-TGC-3’C、5’-GCA-3’D、5’-CGT-3’正确答案：A36.S1核酸酶的功能是：A、切割双链的DNAB、切割单链的RNAC、切割发夹环D、以上均正确正确答案：D答案解析：S1核酸酶是一种从米曲霉中分离出来的核酸酶，它可以特异性地降解单链DNA或RNA，对双链DNA或RNA不起作用。它能切割双链DNA中的单链区、发夹环等单链结构。所以它能切割双链的DNA、单链的RNA、发夹环等，以上均正确。37.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为：A、平行末端B、3’-突出末端C、5’-突出末端D、粘性末端E、缺口末端正确答案：D答案解析：多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为粘性末端，即双链DNA被酶切后，产生的两个末端的碱基序列互补，能够通过碱基配对重新结合，形成类似粘性的结构。38.以多聚C作模板加入无细胞合成体系时，新合成的多肽链是：A、多聚PheB、多聚TyrC、多聚ProD、多聚Ser正确答案：C39.用免疫化学法筛选重组体的原理是：A、根据外源基因表达B、根据载体基因表达C、根据mRNA同DNA杂交D、根据DNA同DNA杂交正确答案：A答案解析：免疫化学法筛选重组体是基于外源基因表达来进行的。当外源基因插入到载体中并在宿主细胞中表达时，会产生相应的蛋白质。通过检测这些蛋白质，可以筛选出含有重组体的细胞。而不是基于载体基因表达、mRNA同DNA杂交或DNA同DNA杂交。40.DNA被某种酶切割后，电泳时电泳带有些扩散，下列原因那一项不太可能？A、酶失活B、蛋白质（如BSA）同DNA结合C、酶切条件不合适D、酶切反应时酶浓度过低正确答案：A41.在基因工程中，DNA重组体是指：A、不同来源的两段DNA单链的复性B、目的基因与载体的连接物C、不同来源的DNA分子的连接物D、两个不同的结构基因形成的连接物正确答案：B答案解析：DNA重组体是指目的基因与载体的连接物。基因工程中，将目的基因与载体连接，构建成重组DNA分子，这个重组的DNA分子就是DNA重组体。不同来源的两段DNA单链复性不一定形成有功能的重组体；不同来源的DNA分子简单连接不一定是符合基因工程要求的重组体；两个不同结构基因随意连接也不一定是有意义的DNA重组体，只有目的基因与载体正确连接形成的才是用于基因工程操作的DNA重组体。42.用于转染哺乳类细胞的常用载体是：A、质粒B、噬菌体C、逆转录病毒RNAD、结构基因E、乳糖操纵子正确答案：C答案解析：逆转录病毒RNA作为载体可高效地将外源基因导入哺乳类细胞，是用于转染哺乳类细胞的常用载体之一。质粒也可用于转染，但不是最常用的；噬菌体主要用于细菌等微生物的基因操作；结构基因是编码蛋白质或RNA的基因，不是载体；乳糖操纵子是原核生物基因表达调控的一种机制，并非转染载体。43.在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是：A、化学合成法B、基因组文库法C、cDNA文库法D、PCRE、差异显示法正确答案：D答案解析：PCR技术可以在已知序列信息的情况下，特异性地扩增出目的基因，是获取目的基因较为方便快捷的方法。化学合成法适合合成已知序列且较短的基因；基因组文库法和cDNA文库法需要构建文库并筛选，相对繁琐；差异显示法主要用于分析基因表达差异，不是获取目的基因的直接方法。44.与mRNAACG相对应的tRNA的反密码子是：A、UGCB、TGCC、GCAD、CGU正确答案：D45.PCR的特点不包括：A、时间短，只需数小时B、扩增产物量大C、只需微量模板D、用途非常广泛E、底物必须标记正确答案：E答案解析：PCR技术具有时间短（只需数小时）、扩增产物量大、只需微量模板、用途非常广泛等特点。而底物标记并不是PCR技术的特点。46.cDNA文库包括该种生物的：A、某些蛋白质的结构基因B、所有蛋白质的结构基因C、所有结构基因D、内含子和调控区正确答案：A答案解析：cDNA文库是由mRNA反转录形成的DNA片段构建的，它只包含该种生物的某些蛋白质的结构基因，因为mRNA是由结构基因转录而来且经过了加工，不包含内含子等，所以不是所有结构基因及所有蛋白质的结构基因，也不包含内含子和调控区。47.质粒DNA和外源DNA各用两种限制性内切酶切开，经连接转化后获得重组子，下列各组重组子中有可能含有两种相反基因极性的是：A、ApaI/ClaIB、BamHI/BglIIC、BclI/SmaID、HindIII/KpnI正确答案：B48.蛋白质的合成方向为：A、从C端→N端B、N端→C端C、定点双向进行D、以上都不对正确答案：B答案解析：蛋白质合成是从N端向C端进行的。在翻译过程中，核糖体沿着mRNA移动，按照密码子的顺序依次将氨基酸连接成多肽链，新加入的氨基酸会连接到正在延伸的多肽链的C末端，从而使得蛋白质合成方向为N端→C端。49.原位杂交具有以下特点：A、不需要从组织和细胞中提取核酸B、反映出组织细胞的相互关系及功能状态C、可完整保护组织与细胞形态D、对靶序列有很高的灵敏度E、以上均是正确答案：E答案解析：原位杂交不需要从组织和细胞中提取核酸，能直接在组织和细胞中进行核酸检测；可完整保护组织与细胞形态；对靶序列有很高的灵敏度，还能反映出组织细胞的相互关系及功能状态。所以以上特点均正确，答案选E。50.经电泳分离后将蛋白质转移到尼龙膜上的技术是：A、斑点杂交B、Eastern杂交C、菌落原位杂交D、Northern杂交正确答案：B51.关于PCR的描述下列哪项不正确？A、是一种酶促反应B、引物决定了扩增的特异性C、扩增产物量大D、扩增的对象是DNA序列E、扩增的对象是RNA序列正确答案：E答案解析：PCR是一种酶促反应，以DNA为模板，在引物引导下由DNA聚合酶催化进行扩增反应，引物决定了扩增的特异性，可使特定的DNA片段得到大量扩增，其扩增对象是DNA序列，而非RNA序列。52.下列哪一个不是Southern印迹法的步骤?A、用限制酶消化DNAB、DNA与载体的连接C、用凝胶电泳分离DNA片段D、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上正确答案：B答案解析：Southern印迹法的主要步骤包括：用限制酶消化DNA，然后通过凝胶电泳分离DNA片段，接着将DNA片段转移至硝酸纤维素膜上，后续还有杂交等步骤。而DNA与载体的连接是基因克隆中构建重组DNA分子的步骤，不是Southern印迹法的步骤。53.转化常指：A、噬菌体感染B、基因转位C、摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变D、产生点突变E、产生移码突变正确答案：C答案解析：转化是指受体菌直接摄取供体菌游离的DNA片段并整合到自己的基因组中，从而获得供体菌部分遗传性状的过程，可引起细胞生物学类型的改变，符合选项C的描述。选项A噬菌体感染不是转化；选项B基因转位与转化概念不同；选项D产生点突变和选项E产生移码突变与转化的定义不符。54.在基因工程中通常所用的质粒存在于：A、细菌染色体B、酵母染色体C、细菌染色体外D、酵母染色体外E、病毒DNA外正确答案：C答案解析：质粒是细菌染色体外能够自主复制的小型环状双链DNA分子，存在于细菌染色体外。A选项细菌染色体错误；B选项酵母染色体外一般是酵母人工染色体等，不是质粒；D选项同理酵母染色体外不是质粒；E选项病毒DNA外也不正确，质粒存在于细菌中而非病毒相关。55.下列哪个不是Northern印迹的步骤：A、从细胞和组织中提取RNAB、用凝胶电泳分离RNAC、将RNA转移到支持物上D、用探针进行杂交E、将RNA反转录合成DNA，正确答案：E答案解析：Northern印迹主要包括从细胞和组织中提取RNA、用凝胶电泳分离RNA、将RNA转移到支持物上、用探针进行杂交等步骤。而将RNA反转录合成DNA是反转录PCR等技术的步骤，不是Northern印迹的步骤。56.在cDNA技术中，所形成的发夹环可用：A、限制性内切核酸酶切除B、用3′→5′外切核酸酶切除C、用S1核酸酶切除D、用5′→3′外切核酸酶切除正确答案：C答案解析：发夹环是由mRNA反转录形成cDNA的过程中，两条互补的DNA链在末端形成的。S1核酸酶具有特异性降解单链DNA的能力，所以可以用S1核酸酶切除发夹环。而限制性内切核酸酶是识别特定序列并切割双链DNA；3′→5′外切核酸酶主要是从核酸链的3′端开始逐个切除核苷酸；5′→3′外切核酸酶是从5′端开始切除，它们都不适合用于切除发夹环。57.PCR变性温度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正确答案：A答案解析：PCR变性温度一般要大于95℃，这样才能使双链DNA充分解链为单链，以便后续引物与模板结合进行扩增反应。58.下列关于建立cDNA文库的叙述中，哪一项是错误的?A、从组织或细胞中提取DNA或RNAB、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC、以新合成单链DNA为模板合成双链DNAD、新合成的双链DNA可以甲基化正确答案：A答案解析：提取DNA或RNA是构建基因组文库的步骤，构建cDNA文库应先提取mRNA，而不是DNA或RNA，所以该选项错误。构建cDNA文库的正确步骤是：先从组织或细胞中提取mRNA，然后用反转录酶合成mRNA的对应单链DNA，接着以新合成单链DNA为模板合成双链DNA，新合成的双链DNA可以甲基化等后续操作。59.在重组体中切出插入片段最常用的方法：A、以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出B、用其它限制性酶将其切出C、用S1核酸酶将其切出D、用DNA酶将其切出E、用多种限制性核酸内切酶将其切出正确答案：A答案解析：以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出，因为该酶在重组时用于构建重组体，此时用它可特异性地识别并切割连接部位，从而切出插入片段，是最常用的方法。B选项用其它限制性酶不一定能准确切出插入片段；C选项S1核酸酶主要用于去除单链核酸等特定用途，不是切插入片段常用方法；D选项DNA酶会随机切割DNA，不能准确切出插入片段；E选项用多种限制性核酸内切酶增加了操作复杂性且不一定能精准切出，所以最常用的是A选项。60.第一个用于构建重组体的限制性核酸内切酶是：A、EcoRIB、EcoBC、EcoRIID、EcoRV正确答案：A答案解析：限制性核酸内切酶EcoRI是第一个被发现并用于构建重组体的，它能够识别特定的DNA序列并进行切割，为基因工程的发展奠定了基础。二、判断题（共20题，每题1分，共20分）1.反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物引发下合成一条互补的DNA链。以RNA