CN114384250B 呼吸器感染症相关信息的取得方法、装置及程序、生物标志物的测定值的监测方法、试剂盒 （希森美康株式会社）

WO2020090683A1,2020.0US2017016896A1,2017.0本发明旨在提供用于使用能判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍及肺的纤维化的风险的生物标志物取得呼吸器感染症相关信息的患呼吸器感染症的受试者或疑似呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的至少1个生物标志物18的至少1个，生物标志物的测定结果成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化21.能与从罹患SARS-CoV-2导致的呼吸器感染症的受试者或疑似所述呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的至少1个生物标志物特异性结合的物质在制造SARS-CoV-2导致的基于所述生物标志物的测定值而判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍的风2.权利要求1所述的用途，其中所述生物标志物含CXCL其中在所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对其中在CXCL9的测定值是与CXCL9相对应的指定的阈值以上其中在CXCL9的测定值比与CXCL9相对应的指定的阈值低时，在CCL3的测定值是与CCL3相对应的指定的阈值以上时，判在CCL3的测定值比与CCL3相对应的指定的阈值低时，判定为发在IL-18的测定值是与IL-18相对应的指定的阈值以上时，判定在IL-18的测定值比与IL-18相对应的指定的阈值低时，判在至少1个所述生物标志物的测定值是与所述生物标志物相对应的指定的阈值以上在全部所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对应9.SARS-CoV-2导致的呼吸器感染症相关信息的在所述存储器中记录有用于使所述计算机执行下述的步骤3取得从罹患SARS-CoV-2导致的呼吸器感染症的受试者或疑似所述呼吸器感染症的受基于所述生物标志物的测定值，判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍的风物标志物的测定值而判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障其中在所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对其中在CXCL9的测定值是与CXCL9相对应的指定的阈值以上其中在CXCL9的测定值比与CXCL9相对应的指定的阈值低时，在CCL3的测定值是与CCL3相对应的指定的阈值以上时，判在CCL3的测定值比与CCL3相对应的指定的阈值低时，判定为发在IL-18的测定值是与IL-18相对应的指定的阈值以上时，判定在IL-18的测定值比与IL-18相对应的指定的阈值低时，判在至少1个所述生物标志物的测定值是与所述生物标志物相对应的指定的阈值以上在全部所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对应17.记录有用于取得SARS-CoV-2导致的呼吸器感染症相关信息的计算机程序的计算机所述计算机程序是用于使所述计算机执行下述的步骤的计算取得从罹患SARS-CoV-2导致的呼吸器感染症的受试者或疑似所述呼吸器感染症的受4基于所述生物标志物的测定值，判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍的风18.权利要求17所述的介质，其中所述生物标志物含CXCL9和选自CCL3及IL-18中的至19.权利要求17或18所述的介质，其使所述计算机还执行基于所述生物标志物的测定值而判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍的其中在所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对其中在CXCL9的测定值是与CXCL9相对应的指定的阈值以上其中在CXCL9的测定值比与CXCL9相对应的指定的阈值低时，在CCL3的测定值是与CCL3相对应的指定的阈值以上时，判在CCL3的测定值比与CCL3相对应的指定的阈值低时，判定为发在IL-18的测定值是与IL-18相对应的指定的阈值以上时，判定在IL-18的测定值比与IL-18相对应的指定的阈值低时，判在至少1个所述生物标志物的测定值是与所述生物标志物相对应的指定的阈值以上在全部所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相对应5revealsIL-6andIL-10arediseaseseveritypredictors,EmergMicrobesInfect.,COVID-19(Coronavirusdisease2019)的患者之中，重症患者组的血清中的IL(Interleukin)-6及IL-10的测定值与轻症患者组相比显著更高看，IL-6及IL-10可成为[0009]本发明旨在提供用于使用能判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍及肺的纤3)及IL-18可作为用于判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍及肺的纤维化的风险的生包括对从罹患呼吸器感染症的受试者或疑似呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的至的测定结果成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤6测定值成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺受试者或疑似呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的至少1个生物标志物进行测定的工[0014]本发明提供用于在上述的方法中使用的试剂盒，含选自含能与CXCL9特异性地结受试者或疑似呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的生物标志物的测定值的步骤和输少1个，生物标志物的测定值成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风试者或疑似呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的生物标志物的测定值的步骤和输出[0029]【图5】是显示将COVID-19患者由群集解析，基于CCL17、VEGF(Vascular7巴细胞(Lym)、嗜中性粒细胞(Neut)、P-SEP(Presepsin)、NT-pro-BNP(brainsodium[0033]【图8A】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血清中[0034]【图8B】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血清中[0035]【图8C】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血清中[0036]【图8D】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血清中[0037]【图8E】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血液中[0038]【图8F】是显示发生急性肾障碍的受试者及未发生急性肾障碍的受试者的血液中[0039]【图9A】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血清中[0040]【图9B】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血清中[0041]【图9C】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血清中[0042]【图9D】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血清中[0043]【图9E】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血液中[0044]【图9F】是显示发生肺的纤维化的受试者及未发生肺的纤维化的受试者的血液中8[0048]疑似呼吸器感染症的者是指尚确认不到感染，有罹患呼吸器感染症的可能性的限定。这样的缓冲液可举出例如HEPES、MES、PIPES等的Good缓冲液、磷酸缓冲生理盐水“生物标志物的量或浓度的值”可基于反映生物标志物的量或浓度的值和校准物的测定结果而确定。校准物是对照试样的一种，是指以已知浓度含与受试物质或其相对应的标准物9实施方式中，优选含使用能与生物标志物特异性地结合的物质捕获该生物标志物的方法。合的抗体本身是公知的，可一般得到。例如，也可由KohlerG.及MilsteinC.,Nature,vol.256,pp.495-497,1975中记载的方法制作产生与生物标志物特异性地结合的抗体的杂[0062]由夹心ELISA法的生物标志物的测定包括抗体和生物标志物的复合体的形成工序过使用预先经生物素类(或者具有DNP基团的化合物)修饰的捕获用抗体和预先结合亲和素未形成复合体的未反应的游离成分的B/F(Bound/Free)分离。未反应的游离成分是指不构含未反应的游离成分的液进行B/F分离，在自动化的观点优选。除去未反应的游离成分之体的夹心ELISA法测定受试体中所含的生物标志物。测定也可使用HISCL(注册商标)系列碍或肺的纤维化的风险是指在从受试者采集受试体的日起经过指定的期间(例如1天～1个月)后，该受试者患由呼吸器感染症导致的急性肾障碍及肺的纤维化之任一方或两方的可[0076]在本实施方式中，可以生物标志物的测定结果作为呼吸器感染症相关信息取的肺泡的间质结缔组织增加而肺的一部分或全部固化的状态。肺的纤维化可由例如胸部X[0085]在进一步的的实施方式中，也可对从受试者采集的受试体中的至少2个生物标志物标志物的测定结果可成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险的志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提示发生呼吸器IL-18的2个，在它们2个生物标志物的测定值的两方比与各生物标志物相对应的指定的阈[0087]在进一步的的实施方式中，也可对从受试者采集的受试体中的至少3个生物标志取得的生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提示发生呼吸器感染症导[0089]在别的实施方式中，取得方法含对从受试者采集的受试体中的至少2个生物标志定值，将发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险分类为3阶段。具体而[0090]·在取得的生物标志物的测定值的全部是与各生物标志物相对应的指定的阈值[0092]·在取得的生物标志物的测定值的全部比与各生物标志物相对应的指定的阈值的2个，在它们2个生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提示发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险是中度。另外，生物标志物是CXCL9、及IL-18的至少1个测定结果也可成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提示发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化集起经过指定的期间(例如2周)后，确认发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维[0098]在一实施方式中，与CXCL9相对应的指定的阈值从例如100pg/mL以上365pg/mL以IL-1β抗体等的抗体医药的特异性的免疫疗法或，由静脉注自发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的多个患者(发生组)及未发生的多个患者(非发生组)采集的受试体中的生物标志物的测定值的数据制成判别发生组和非发生组的多重逻辑模型来设定回归系数及常数。多重逻辑模型可使用SPSS[0105]本实施方式的取得方法也可包括基于生物标志物的测定值而判定发生呼吸器感[0110]在进一步的的实施方式中，也可对从受试者采集的受试体中的至少2个生物标志它们的生物标志物的测定值而判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，可判定为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险高。另外，生物标志物是选自CXCL9、CCL3及IL-18的2个，在它们2个生物标志物的测定值的两方比与各生物标志物相对应的指[0112]在进一步的的实施方式中，也可对从受试者采集的受试体中的至少3个生物标志取得的生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，可定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，可判定为发生呼吸器感染它们3个生物标志物的测定值的全部比与各生物标志物相对应的指定的阈值低时，可判定为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的[0114]在别的实施方式中，取得方法含对从受试者采集的受试体中的至少2个生物标志的测定值以3阶段判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险。具体而[0115]·在取得的生物标志物的测定值的全部是与各生物标志物相对应的指定的阈值[0117]·在取得的生物标志物的测定值的全部比与各生物标志物相对应的指定的阈值的阈值以上时，可判定为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险是中个生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，可判定选自IL-6及CRP的至少1个测定值而判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，可判定为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风症的受试者采集的受试体中的至少1个生物标志物进行测定的工序，基于上述生物标志物从受试者采集的第1受试体和在与该第1时间点不同的第2时间点从该受试者采集的第2受物标志物的测定值成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险的指标。生物标志物的测定值作为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险的指[0127]在一实施方式中，生物标志物含CXCL9，在多个时间点之18的测定值是与IL-18相对应的指定的阈值以上时，提示发生呼吸器感染症导致的急性肾取得的生物标志物的测定值的至少1个是与该生物标志物相对应的指定的阈值以上时，提的阈值相同时，提示或判定发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险高，含能与CCL3特异性地结合的物质的试剂、及含能与IL-18特异性地结合的物质的试剂的至盒中，也可代替含能与CXCL9特异性地结合的物质的试剂而含有含能与CCL3特异性地结合与CCL3特异性地结合的物质的试剂或含能与IL-18特异性地结合的物质的试剂而记载试剂含有含能与CCL3特异性地结合的物质的试剂或含能与IL-18特异性地结合的物质的试剂。结合的物质的试剂或含能与IL-18特异性地结合的物质的试剂而记载试剂组成、使用方法含能与CXCL9特异性地结合的物质的试剂，含能与CCL3特异性地结合的物质的试剂和含能收容含CXCL9的捕获用抗体的试剂的第1容器，23表示收容含CXCL9的检测用标记抗体的试获用抗体及检测用标记抗体的各自的试剂而含有含CCL3的捕获用抗体及检测用标记抗体含CXCL9的捕获用抗体及检测用标记抗体的各自的试剂之外，也可还含有含CCL3的捕获用[0140]在上述之任一者的试剂盒中，也优选含校准物。作为校准物，可举出例如用于的缓冲液(阴性对照)和以已知浓度含IL-收容含CXCL9的捕获用抗体的试剂的第1容器，33表示收容含CXCL9的检测用标记抗体的试剂的第2容器，34表示收容不含CXCL9的缓冲液的第3容器，35表示收容以指定的浓度含有的浓度含有CXCL9的缓冲液可作为CXCL9用校准物使用。此例的试剂盒也可代替含CXCL9的捕获用抗体及检测用标记抗体的各自的试剂及CXCL9用校准物而含有含CCL3的捕获用抗体及检测用标记抗体的各自的试剂及CCL3用校准物或含IL-18的捕获用抗体及检测用标记抗抗体的各自的试剂及CXCL9用校准物之外，也可还含有含CCL3的捕获用抗体及检测用标记[0142]本发明的一实施方式是含能与生物标志物特异性地结合的物质的试剂用于制造[0143]进一步的的实施方式涉及试剂用于制造用于监测生物标志物的测定值的试剂盒所示的形态。图2中所示的取得装置10含免疫测定装置20和与免疫测定装置20连接的计算将生物标志物由ELISA法测定时，免疫测定装置只要是能进行基于使用的标记物质的信号抗体的磁性粒子及酶标记的检测用抗体的夹心ELISA法发生的化学发光信号的市售的自动[0149]参照图3，计算机本体300具备CPU(CentralProcessingUnit)310、ROM(Read算机系统的制造时预先存储在ROM311或SSD313，也可通过由输入部301输入而存储在[0156]通信接口316是根据Ethernet(注册商标)接口等的规格的无线接口等。计算机本获用抗体的磁性粒子及酶标记的检测用抗体的夹心ELISA法发生的化学发光信号取得生物标志物的测定值成为发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险的指[0160]在进一步的的实施方式中，取得2个生物标志物的测定值而输出。例如，在取得[0161]在进一步的的实施方式中，取得CXCL9、CCL3及IL-18的测定值而输出。此时，CPU310从免疫测定装置20取得光学信息(化学发光信号)，从取得的光学信息算出CXCL9、CPU310将CXCL9、CCL3及IL-18的测定值显示在显示部302，用打印机打印或发送到移动装[0162]参照图4B，对于基于1个生物标志物的测定值而判定发生呼吸器感染症导致的急[0164]参照图4C，对于基于2个生物标志物的测定值而判定发生呼吸器感染症导致的急20取得光学信息(化学发光信号)。在步骤S302中，CPU310从取得的光学信息算出CXCL9及CCL3的测定值，作为测定结果，取得CXCL9及CCL3的测定值。CPU310将所述测定值存储在[0166]在别的实施方式中，取得装置也可在2个生物标志物的测定值的两方是与各生物测定值比第2阈值低时，CPU310将发生急性肾障碍或肺的纤维化的风险低的判定结果存储装置20取得光学信息(化学发光信号)。在步骤S402中，CPU310从取得的光学信息算出CPU310将发生急性肾障碍或肺的纤维化的风险低的判定结果存储在SS学发光信号)，从取得的光学信息算出CXCL9、CCL3及IL-18的测定值而存储在SSD313。或肺的纤维化的风险高的判定结果存储在SSD313。在CXCL9的测定值比第1阈值低时，在肾障碍或肺的纤维化的风险低的判定结果存储在SSD313。CPU310输出判定结果。例如，[0170]接下来，将本发明由实施例详细地说明，但本发明不限于这些实施例。以下，[0173]使用从呼吸器感染症患者采集的受试体鉴定能辨别发生呼吸器感染症导致的急[0175]受试者是由PCR检查确认SARS-CoV-2的感染，在神户市立医疗中心中央市民医院维化的受试者的人数的各自中，含确认到急性肾障碍和肺的纤维化的两方的受试者的人结合的捕获用抗体及检测用抗体和作为固相的磁性粒子的夹心ELISA法的测定。例如，CXCL9使用下述的R1～R5试剂测定。其余的标志物，除了代替捕获用抗体及检测用抗体之[0180]将抗MIG单克隆抗体(RANDOX公司)由惯用的方法用胃蛋白酶等消化而得到Fab片向10mMHEPES(pH7.5)添加清洗后的STA结合磁性粒子至链霉亲和素浓度成为18～22μg/[0184]将抗MIG单克隆抗体(RANDOX公司)由惯用的方法用胃蛋白酶等消化而得到Fab片段。将Fab片段由惯用的方法用ALP标记而溶解于含有1％BSA及0.5％酪蛋白的缓冲液而得试剂，使用含作为ALP的化学发光底物的CR4试剂(50μL)及R5试剂(100μL)，对化学发光强度进行测定。作为校准物，使用含重组型[0189]从各受试者最初采集的血液中的CRP、LD及血细胞数(淋巴细胞及嗜中性粒细胞)[0191]由无教师阶层的群集解析56名受试者，基于与炎症关联的8个标志物(CCL17、[0193]将发生急性肾障碍的受试者及未发生的受试者分类为群集IV和群集IV以外(群集372678[0206]从表1～3中所示的结果，属于群集IV的受试者与属于群集提示发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍的风险及残留有肺的纤维化的风险高。从而提示，能辨别群集IV和群集IV以外(特别是群集III)的生物标志物对于发生呼吸器感染症导致的急性肾障碍及肺的纤维化的风险的判定有用。器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险的[0211]由在住院期间中的多个时间点自各受试者采集的血液调制血清，对6种生物标志住院后发生急性肾障碍的受试者(PreAKI)及在住院的日已经发生急性肾障碍的受试者到SARS-CoV-2感染的阴性之后未残留有肺的纤维化的受试者(非纤维化)及残留有肺的纤~F所示，IL-6、CRP及LD的测定值在残留有肺的纤维化的受试者疑似所述呼吸器感染症的受试者采集的受试体中的至少1个生物标志物[0241]所述生物标志物的测定结果成为发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺[0242]2.实施方式1所述的方法，其中在所述[0243]3.实施方式1所述的方法，其中在所[0264]在至少1个所述生物标志物的测定值是与所述生物标志物相对应的指定的阈值以[0267]在全部所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相提示发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维[0268]12.生物标志物的测定值的监测方法[0270]所述生物标志物的测定值成为发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的指定的阈值以上时，提示发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险指定的阈值以上时，提示发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的纤维化的风险[0291]21.实施方式12～20之任一项所述的[0295]对从罹患呼吸器感染症的受试者或疑似所述呼吸器感染症的受试者采集的受试[0296]基于所述生物标志物的测定值而判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍[0298]23.实施方式22所述的方法，其中在[0299]24.实施方式22所述的方法，其中在[0320]在至少1个所述生物标志物的测定值是与所述生物标志物相对应的指定的阈值以[0323]在全部所述生物标志物的测定值比与所述生物标志物相[0328]37.呼吸器感染症相关信息的取得[0330]取得从罹患呼吸器感染症的受试者或疑似所述呼吸器感染症的受试者采集的受[0333]所述生物标志物的测定值成为发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或肺的[0334]38.实施方式37所述的装置，其中生物标志物的测定值而判定发生所述呼吸器感染症导致的急性肾障碍或