RNA的生物合成课件

RNA的生物合成(轉錄)RNABiosynthesis(Transcription)**

在生物界，RNA生物合成有兩種方式：

①DNA指導的RNA合成，也稱為轉錄(transcription)。是生物體內RNA的主要合成方式，也是本章介紹的主要內容。

②RNA指導的RNA合成(RNA-dependentRNAsynthesis)，也稱RNA複製(RNAreplication)，是逆轉錄病毒以外的RNA病毒,在宿主細胞以病毒單鏈RNA為範本合成RNA的方式。下午9時2分*轉錄RNADNA

是指生物體以DNA為範本合成RNA的過程。意指將DNA堿基序列轉抄為RNA堿基序列。轉錄的概念參與的物質底物：NTP(ATP、UTP、GTP、CTP)範本：DNA（結構基因範本鏈）酶：依賴DNA的RNA聚合酶,簡稱RNA聚合酶(RNApolymerase,RNA-pol；不需引物)其他：蛋白質因數、Mg2+、Mn2+**轉錄複製範本DNA雙鏈DNA中只有一股鏈作為範本(不對稱轉錄)；結構基因(2~2.5萬個基因)雙鏈DNA的兩股鏈均作為範本(半保留複製)；全基因(3X109

bp)底物NTPsdNTPs堿基配對A-U、T-A、G-CA-T、G-C聚合酶RNA聚合酶(不需引物)，缺乏校讀功能DNA聚合酶(需RNA引物)，有較讀功能產物鏈延長方向5´→3´5´→3´產物單鏈RNA子代雙鏈DNA表13-1轉錄與DNA複製的異同點**第一節RNA合成中的範本和酶TemplateandEnzymesinRNABiosynthesis**學習要求：

掌握複製與轉錄的主要區別；轉錄、不對稱轉錄、範本鏈、編碼鏈的概念；原核生物RNA聚合酶全酶、核心酶的組成和作用；真核生物RNA聚合酶的主要類型和產物，轉錄因數的概念。一、轉錄範本1.結構基因(structuralgene):

編碼鏈(codingstrand)能轉錄出RNA(mRNA、rRNA和tRNA)的DNA區段。人類基因組編碼蛋白質的基因約為2～2.5萬個，但通常只有2%～15%的基因處於轉錄活性狀態。

範本鏈(templatestrand)是指在轉錄過程中，能夠按堿基配對規律指導RNA合成的那股DNA單鏈，也稱為反義鏈或Watson鏈。

是指與範本鏈對應的不被轉錄的那股DNA單鏈，也稱作有意義鏈或Crick鏈。**5’…GCAGTACATGTC…3’3’…cgtcatgtacag…5’5’…GCAGUACAUGUC…3’mRNAN…AlaValHisVal…C多肽鏈轉錄翻譯編碼鏈/有意義鏈/Crick鏈範本鏈/反義鏈/Watson鏈圖13-2基因的遺傳資訊傳遞DNA雙鏈**2.不對稱轉錄(asymmetrictranscription):

在不同的DNA轉錄區段中，範本鏈並非總在同一股DNA鏈上。

在一個DNA轉錄區段中，只有範本鏈被轉錄，而編碼鏈不轉錄；圖13-1RNA的不對稱轉錄**(DNAdependentRNApolymerase,RNApol)二、RNA聚合酶即依賴DNA的RNA聚合酶(DDRP),也稱轉錄酶(transcriptase)。

以結構基因反義鏈作為範本；不需要引物就能直接啟動RNA鏈的延長。**σ亞基+σ

原核生物(E.Coli)RNApol

由α2ββ′ωσ共5種(6個)亞基組成。核心酶(coreenzyme)

ω（一）原核生物的RNA聚合酶全酶(holoenzyme)

ω

**亞基相對分子品質功能α36,512與核心酶亞基的正確聚合有關，控制轉錄的速率。能與啟動子結合。β150,618聚合功能(催化)，被利福平結合抑制β′155,613結合DNA

範本，兼有解鏈功能ω11,000功能尚不清楚σ70,263辨認起始位點，促進酶與啟動子結合表13-2大腸桿菌(E．Coli)RNA聚合酶各亞基的功能**PS1S2S3啟動子O(Promoter)調控序列結構基因

操縱子

結合RNA聚合酶表達功能蛋白?CAP結合位點

（二）原核生物RNA聚合酶與範本的辨認結合操縱子(operon)：原核生物轉錄的基本單位。**RNA聚合酶保護法先把一段基因分離出來後，與提純的RNA聚合酶混合;加入核酸外切酶作用一定時間;總有一段40～60bp的DNA片段由於RNA聚合酶的結合而免於被降解。對這段受保護的DNA序列進行分析。**RNA聚合酶保護區結構基因終止點-10轉錄開始+1-35

圖13-4RNA聚合酶保護法分析啟動子序列TTGACAAACTGTTATAATATATTA(Pribnowbox)RNApol辨認結合區轉錄起始區共有序列**Pribnow盒(Pribnowbox)轉錄起點的上游約-10處找到6bp的保守序列TATAAT，稱為-10序列或Pribnow盒(box)；與真核細胞和古生菌中的TATABox功能相似。

TATAAT80%95%45%60%50%96%該序列AT豐富，易於解鏈。其功能是:RNApol(RNA聚合酶)緊密結合；

形成開放啟動複合體；

使RNApol定向轉錄

-10序列的突變不影響RNApol與啟動子的結合速度，可是會降低雙鏈解開的速度。**σ因數具有辨認轉錄起始位點的作用。已發現大腸桿菌有多種σ因數，如σ70、σ60、σ32、σ54、σ28和σ24等。σ70(相對分子品質70,000)識別、結合典型啟動子位點；σ32(相對分子品質32,000)識別、結合熱激蛋白（heatshockprotein，Hsp）基因轉錄啟動子。σ60(相對分子品質60,000)在氮饑餓時開啟某些可利用其他氮源的基因。**P70S1S2S3?P32H1H2H3?P60N1N2N3?表13-3真核生物RNA聚合酶的種類與性質145SrRNA是5.8S、18S和28SrRNA的前體。2

hnRNA是mRNA的前體。種類胞內定位轉錄產物對鵝膏蕈堿的敏感性RNA-polⅠ核仁45SrRNA1耐受RNA-polⅡ核質hnRNA2、lncRNA3、piRNA4、miRNA5極敏感RNA-polⅢ核質tRNA、5SrRNA、snRNA6中度RNA-polⅣ核質siRNA7不詳RNA-polmt線粒體線粒體RNAs敏感3~7

具有重要的基因表達調節作用的非編碼RNA。

鬼筆鵝膏蕈

（三）真核生物的RNA聚合酶真核生物的RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亞基的功能~50kD中亞基1α亞基小亞基Ⅰ(10)/Ⅱ(7)/Ⅲ(11)

σ亞基(識別起始點)

類型數目/每個酶對應於原核功能＞128kD大亞基2β和β′亞基(催化)3種pol的大亞基C末端aa序列均為(YSPTSPS)n;n=20-60,與種屬有關,稱羧基末端結構域(CTD);含帶羥基的Y(酪)\S(絲)\T(蘇),可被磷酸化;

polⅡ的磷酸化在從轉錄起始過渡到延長中起重要作用。**第二節TheProcessofTranscriptioninProkaryote原核生物RNA合成過程**學習要求：熟悉原核生物RNA聚合酶與範本辨認結合；原核轉錄起始、延長和兩類轉錄終止過程的特點。瞭解-35區、-10區、上游、下游等概念。起始(initiation)：需RNA聚合酶全酶

原核生物RNA聚合酶可直接與範本DNA結合啟動轉錄。延長(elongation)：僅需核心酶催化終止(termination)：

依賴ρ因數的轉錄終止機制；非依賴ρ因數的轉錄終止機制。**轉錄過程可分為三個階段：一、轉錄起始圖13-5原核生物轉錄的起始RNA聚合酶(α２ββ′ωσ)結合到DNA的啟動子上而啟動轉錄。**轉錄起始的基本過程啟動子複合物promotercomplex)閉合啟動子複合物(closedpromotercomplex)開放啟動子複合物(openpromotercomplex)轉錄起始複合物(RNA聚合酶-DNA-pppG-pN-OH)向下移動到-10區TATA盒跨入轉錄起始點啟動子的-10區局部解鏈RNA鏈5´端頭兩個核苷酸產生3´,5´-磷酸二酯鍵σ因數脫落。σ因數辨認啟動子-35序列RNA聚合酶結合到啟動子上**二、轉錄延長σ因數從轉錄起始複合物上的脫落，導致RNA聚合酶構象隨之發生改變，使核心酶沿著範本鏈的3´→5´方向滑行。

核心酶向下遊滑動時，雙鏈DNA邊解旋邊解鏈；同時，核心酶按照堿基配對規律，不斷使NTPs在5´-pppGpN-OH的3´端羥基上逐個聚合。**

核心酶在DNA上覆蓋區段為40～60bp，產物RNA鏈與範本鏈形成長約8～9bp的RNA/DNA雜交雙鏈；由核心酶-DNA-RNA形成的轉錄複合物稱為轉錄空泡(transcriptionbubble)

。

堿基配對的穩定性是G≡C＞A＝T＞A＝U；RNA/DNA雜交結構不及DNA／DNA雙鏈穩定。**轉錄延長與蛋白質合成同時進行。同一DNA範本上有多個轉錄同時在進行；多聚核糖體(polysome)

原核生物轉錄的特點：**圖13-7電子顯微鏡下原核生物的羽毛狀轉錄現象**三、轉錄終止ρ因數1.識別結合富含C的RNA區功能3.ATPase活性2.解螺旋酶活性1969年Roberts在T4噬菌體感染E．coli的研究中首次發現了能控制轉錄終止的蛋白質，命名為Rho(ρ)因數。六聚體蛋白**ρ因數5′3′RNA-pol富含C（一）依賴ρ因數的轉錄終止5′3′RNA-pol+ATPρ因數①ρ因數識別結合RNA富含C區使RNApol變構停頓；③ATPase活性水解ATP釋能使產物RNA釋放。②解螺旋酶活性使RNA/DNA雜交雙鏈解離；**DNA範本轉錄終止區有富含GC的反向重複序列，以及其後出現的6~8個連續的A；（二）非依賴ρ因數的轉錄終止**轉錄的RNA區段會形成特殊的莖環結構和隨後的多個連續的U使轉錄終止。

位於核心酶覆蓋區域內形成的RNA莖-環結構可導致核心酶構象變化，阻止轉錄向下遊推進。RNA莖-環結構之後多個連續U所形成的A＝U配對最不穩定，促使RNA/DNA解鏈脫落。圖13-9原核生物非依賴ρ因數轉錄終止模式**TranscriptionisDNAdirectedRNAsynthesis,catalyzedbyenzymeRNApolymerase.TheDNAdoublehelixmustonlinetoexposeitstemplatestrand,soRNApolymerasecanaddtherightribonucleotidetriphosphatemonomertothegrowingRNAtranscript.RNApolymerasereadthetemplatestrandfrom3primeto5primeend,andtheRNAtranscriptgrowsfromitsown5primeto3primeend.TheDNAdoublehelixextendsrewind.WhentheRNApolymerasereachestheendofthetemplateregion,theenzymeandnewtranscriptarereleased.原核生物的轉錄過程**真核生物的轉錄過程第三節TheProcessofTranscriptioninEukaryote**學習要求：熟悉真核轉錄因數，轉錄前起始複合物和真核轉錄的三個階段。一、mRNA的合成順式作用元件(cis-actingelement)（一）轉錄起始1.轉錄起始點的上游區段

指存在真核生物基因轉錄起始點上游，與轉錄有關的各種序列；即在同一DNA分子上具有可影響或調控轉錄的各種片段。圖13-10真核生物RNA聚合酶Ⅱ識別的啟動子區序列*Y表示嘌呤去氧核苷酸**

由其他基因編碼，能直接或間接識別和結合啟動子及其上游調節序列等順式作用元件或RNA聚合酶的蛋白質。反式作用因數(trans-actingfactor)：2.轉錄因數(transcriptionalfactor,TF)轉錄因數(transcriptionalfactor，TF):

一般指能直接或間接識別和結合RNA聚合酶，介導RNA聚合酶與啟動子相互作用的反式作用因數。**

轉錄因數有很多種類，相對應於RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的TF，分別稱為TFⅠ、TFⅡ和TFⅢ。

TFⅡ又可分為TFⅡA、TFⅡB、TFⅡＤ等。

大多含有鋅指、螺旋-轉角-螺旋等模體；可與RNA-pol和DNA組成RNA-pol-蛋白質-DNA複合物啟動轉錄。

某些TF或其亞基(TFⅡF小亞基)與原核生物σ因數在序列上有不同程度的一致性。

轉錄因數的種類：

轉錄因數的結構：轉錄因數的種類和結構特點：**真核生物RNA聚合酶的種類及其相應的啟動子和轉錄因數種類細胞內定位轉錄產物啟動子轉錄因數RNA-polⅠ核仁45SrRNA1第一類TFⅠRNA-polⅡ核質hnRNA2、lncRNA3、piRNA4、miRNA5第二類TFⅡRNA-polⅢ核質tRNA、5SrRNA、snRNA6第三類TFⅢRNA-polⅣ核質siRNA7第四類TFⅣRNA-polmt線粒體線粒體RNAs？TFmt?145SrRNA是5.8S、18S和28SrRNA的前體。2

hnRNA是mRNA的前體。3~7

具有重要的基因表達調節作用的非編碼RNA。

轉錄因數亞基組成和(或)相對分子品質功能TFⅡDTBP138000結合TATA盒TAF2輔助TBP與DNA結合TFⅡA12000，19000，35000穩定TBP與DNA結合TFⅡB33000穩定TFⅡD-DNA複合物，結合RNA-polⅡTFⅡE57000(α)，34000(β)解螺旋酶TFⅡF30000，74000促進RNA-polⅡ結合,介導其他因數的結合TFⅡH62000，89000蛋白激酶活性，使CTD3磷酸化TFⅡJ120000促進TFⅡD的結合1TBP：TATAbindingprotein(TATA結合蛋白)；2TAF：TBPassociatedfactor(TBP相關因數)；3CTD：CarboxylTerminalDomain(RNA聚合酶Ⅱ大亞基羧基末端結構域)。表13-3真核生物轉錄因數Ⅱ（TFⅡ）的種類及其功能通用轉錄因數(generaltranscriptionfactor)：指能直接與RNA聚合酶相互作用，介導RNA聚合酶與啟動子結合的轉錄因數，如TFⅡD。TFⅡD人類細胞中至少有12種不同的TAF。不同TAF與TBP的組合對不同啟動子的親和力不同；可選擇性活化不同基因啟動子。TBP可結合10bpDNA區段，剛好覆蓋TATA盒(TFⅡD可覆蓋35bp或更長的區域)。TBP8～10個TAF**3.轉錄前起始複合物與原核生物RNA聚合酶靠σ因數辨認結合啟動子而啟動轉錄不同，真核生物RNA聚合酶需要依靠眾多轉錄因數的幫助才能與DNA結合。(pre-initiationcomplex,PIC)在起始階段，RNA聚合酶Ⅱ在一系列TFⅡ的參與下形成轉錄前起始複合物。**TFⅡFTFⅡFTFⅡATFⅡBTFⅡHTFⅡE1.TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA複合物的形成；TATACTD-P2.PIC組裝完成，生成第一個磷酸二酯鍵；TBPTAFRNAPOL-ⅡTAFTAFPOL-ⅡTFⅡFTFⅡF圖13-11RNA-polⅡ催化轉錄的前起始複合物的形成3.TFⅡH使CTD磷酸化，聚合酶向下遊移動。4.拼板理論(piecingtheory)一個真核生物基因的轉錄需要3至5個轉錄因數。轉錄因數之間相互作用、結合，形成專一性的活性複合物，再與RNA-pol搭配而特異性地結合並轉錄相應的基因。上游因數、可誘導因數及它們相應的反式作用因數也有相類似的作用規律。**（二）轉錄延長RNA-polⅡ大亞基CTD被TFⅡH磷酸化才能離開起動子區域並進入延長階段。與原核生物不同的是，沒有轉錄與翻譯同步的現象；但轉錄延長過程中隨RNApol前移，可以觀察到核小體移位或解聚現象。

真核生物的轉錄延長過程與原核生物相似，RNA聚合酶沿DNA範本鏈3´→5´方向移動，並按範本DNA鏈堿基序列催化RNA鏈的延長。**圖13-12真核生物轉錄延長中的核小體移位RNA-pol前移遇到核小體原來繞在組蛋白上的DNA解聚及彎曲一個區段轉錄完畢，核小體發生了移位**5------AAUAAA-5

------AAUAAA--核酸酶、解旋酶-GUGUGUGRNA-polAATAAAGTGTGTG轉錄終止的修飾點5

5

3

33加尾AAAAAAA······3mRNA（三）轉錄終止--真核生物mRNA轉錄終止及加尾修飾。**剪切信號序列真核生物RNA前體的加工第四節Post-transcriptionalModificationofEukaryoticRNA學習要求：

掌握真核基因的斷裂基因、內含子、外顯子和剪接體概念，mRNA的首、尾修飾，tRNA和rRNA轉錄後加工修飾特點；熟悉內含子剪接機制，核酶錘頭結構的作用特點和研究意義。瞭解內含子的分類和mRNA編輯，tRNA和rRNA轉錄後加工過程，基因概念的定義與延伸；siRNA、microRNA和長鏈非編碼RNA（lncRNA）的定義及應用。**

真核生物中幾乎所有的初級轉錄產物(primarytranscript)，都需經一定程度的加工(processing)才具有生物學功能。

原核生物轉錄的mRNA不需加工即能作為翻譯的範本，但rRNA和tRNA初級轉錄產物也需加工成熟。**核苷酸的部分水解、剪接，鏈末端的“加帽”和“加尾”，核苷酸的修飾等。一、mRNA前體的加工

真核生物成熟mRNA的前體hnRNA，需在細胞核內進行加工修飾，才成為具有生物學功能的成熟mRNA。mRNA前體的加工修飾包括：

切除內含子和連接外顯子的剪接；5´端加帽和3´端加尾的首尾修飾；

核苷酸的甲基化等。**（一）hnRNA

斷裂基因(splitgene)*：真核生物結構基因由若干個編碼區和非編碼區相間鑲嵌連接而成。

真核基因中的編碼序列稱為外顯子(exon)，非編碼序列稱為內含子(intron)；在內含子和外顯子的交界處/分支點有兩個相當短的保守序列，5´端為GT/GU，3´端為AG，此稱為GT/GU-AG規則。*Roberts和Sharp20世紀70年代提出，獲1993諾貝爾生理/醫學獎。**是指核內未被剪接、含有內含子的mRNA前體，稱為不均一核RNA(heterogeneousnuclearRNA)或雜化核RNA(hetero-nuclearRNA)。核酸分子雜交研究雞卵清蛋白斷裂基因及其初級轉錄產物的加工卵清蛋白基因hnRNA首、尾修飾剪接過程中套索RNA的形成mRNA形成脊椎動物編碼蛋白質的基因只有為數不多的基因

沒有內含子，如組蛋白基因。某些低等真核生物編碼蛋白質的基因也缺乏內含

子，如釀酒酵母的許多基因。有些原核生物的基因也有內含子，如一些真細菌(eubacteria)和古細菌(archaebacteria)的基因。１.真核生物基因中存在內含子的普遍性抗肌萎縮蛋白(distrophin)基因是人類最龐大的

基因，全長數百萬(106)bp，含50多個外顯子和50多個內含子；成熟的mRNA僅有約1萬bp。**Ⅰ：主要存在於線粒體、葉綠體及某些低等真核

生物的rRNA、mRNA和tRNA基因中；２.據基因類型和剪接方式,內含子分為4類：Ⅱ：存在於線粒體、葉綠體的mRNA基因中；Ⅲ：常見於大多數mRNA基因，常形成套索結構後剪接；Ⅳ：存在於tRNA基因,剪接過程需酶及ATP。已發現Ⅰ類和Ⅱ類內含子中有相當一部分具有自身剪接（selfsplicing）作用；**３.一些內含子也具有多種生物學功能：具有可移動和轉座功能，很可能參與RNA介導的

細胞調節功能；可調節mRNA的選擇性剪接，還可產生有功能活性

的RNA；可形成髮夾狀miRNA，利用RNAi機制調節其他基因

的表達；某些遺傳性疾病的基因變異發生在內含子。**種類長度(nt)來源主要功能持家非編碼RNAtRNAtRNA前體氨基酸轉運rRNArRNA前體核糖體構成snRNAsnRNA前體mRNA剪接snoRNA基因組印記區中最大的非編碼RNA家族基因rRNA、snRNA、mRNA等的修飾,基因組印記調節非編碼RNAmiRNA21~25含髮卡結構的pri-miRNARNA干擾，基因沉默siRNA21~25外源基因導入；轉座子轉錄的dsRNARNA干擾，基因沉默piRNA24~31piRNA基因簇轉錄產生的長單鏈RBA前體生殖細胞內轉座子的沉默lncRNA>200多種途徑轉錄、轉錄後和翻譯調控，表觀遺傳調控，基因印跡及端粒系統調控非編碼RNA：不被翻譯成蛋白質的功能性RNA的統稱。**基因(gene)概念的延伸：是指在染色體上佔有一定位置的遺傳基本單位，含有一種多肽或RNA的編碼資訊。是分佈在染色體上的遺傳基本單位，是負載著特定遺傳資訊的DNA片段，由多肽或RNA編碼序列、內含子序列和調節序列組成，可編碼一個或多個具有生物學功能的多肽或RNA。是分佈在染色體上的遺傳基本單位，是負載有特定遺傳資訊的DNA片段，由多肽編碼序列、內含子序列和調節序列組成。（二）mRNA剪接

是指去除初級轉錄產物hnRNA的內含子，把外顯子連接為成熟mRNA的過程。剪接體(splicesome)*小核RNA(smallnuclearRNA，snRNA)富含U，簡稱U，有U1、U2、U4、U5和U6等類別。核內蛋白質小核RNA*(snRNA)小核核蛋白體(snRNP)hnRNA真核生物hnRNA剪接的場所真核生物mRNA剪接的基本過程：1．小核核蛋白體(snRNP)中的U1和U2snRNA與內含子

邊界序列(5´端為GU，3´端為AG)結合；2．U4、U6和U5snRNA加入，形成完整但無活性剪接體，內含子形成套索；3．調整結構，構建活性中心，形成活性剪接體；4．催化二次轉酯反應，完成切除內含子和連接外顯

子的剪接過程。**圖13-17剪接體的裝配和剪接過程1．snRNA與內含子邊界序列結合；2．形成完整但無活性剪接體，內含子形成套索；3．形成活性剪接體；4．完成剪接過程**圖13-18剪接過程的兩次轉酯反應機制**（三）mRNA編輯指在mRNA水準上，通過核苷酸的缺失，插入或替換而改變遺傳資訊的過程。通過mRNA編輯，可使一個基因產生多種氨基酸序列不同、功能不同的蛋白質，結果不僅擴大了遺傳資訊，而且使生物能更好地適應生存環境。**

如人類基因組上只有一個載脂蛋白B（apoB）基因，轉錄後加工成熟的mRNA含14,500個核苷酸。

在肝臟細胞內該mRNA表達513kD的apoB100；

在小腸黏膜細胞內則表達250kD的apoB48。圖13-19載脂蛋白BmRNA的編輯加工**（四）mRNA首、尾的修飾

絕大部分真核細胞成熟mRNA的5´端都有一個7-甲基鳥嘌呤-三磷酸核苷(m7G-5´ppp5´-N-3´)起始的“帽子”結構，3´端有一段長約80～250個核苷酸的多聚腺苷酸(polyA)尾。

hnRNA的“加帽”是在轉錄生成的hnRNA長度為25～30個核苷酸時形成的。

hnRNApolyA尾的添加是在轉錄終止時進行的；先由核酸內切酶在AAUAAA信號下游10～30個核苷酸處切斷，再由多聚腺苷酸聚合酶(polyApolymerase)催化逐個加入腺苷酸。**mRNA的“帽子”結構有3種類型：0型帽：5´-m7GpppN-Ⅰ型帽：5´-m7GpppmN-；M7和第一位核苷酸的2´-OH也甲基化。Ⅱ型帽：5´-m7GpppNmNm-；M7和第一、第二位核苷酸的2´-OH均甲基化。mRNA的“帽子”的結構和分類**圖13-20mRNA5´端“0型帽”結構的形成（右）及其5´，5´-三磷酸雙鳥苷結構（左）HH**5´端“帽子”與帽結合蛋白(CBP)結合，可增加mRNA的穩定性，並對mRNA從細胞核向細胞質的轉

運有重要作用。polyA是維持mRNA穩定性和翻譯範本活性的重要

因素。polyA與polyA結合蛋白(PABP)相結合的形式存

在，可與5´端“帽子”協調mRNA從核內向胞質的

轉位、維繫mRNA的穩定、調控翻譯的起始。5´端“帽子”為核糖體對mRNA識別的信號，協助

核糖體和翻譯起始因數與mRNA結合。5´端“帽子”結構和3´端polyA尾的功能**二、tRNA前體的加工酵母tRNAtyr前體的加工①RNaseP切除5´端16個核苷酸的前導序列；②RNaseD切除3´端的兩個UU，由tRNA核苷酸轉移酶催化添加CCA-OH；④稀有堿基的形成嘌呤甲基化：A→mA，G→m

G；DHU環上的U被還原為DHU；Tψ環上的U轉變為ψ；反密碼上的A脫氨轉變I。**③通過剪接反應切除中部14個核苷酸的插入序列；tRNA的初級產物成熟tRNA剪接反應轉移酶**RNasePRnaseD堿基修飾（2）還原反應如：U

DHU

（3）核苷內的轉位反應如：U

ψ（4）脫氨反應如：A

I（1）（3）（2）（4）

A

mn6A、2mn6A

（1）甲基化G

m7GU

m5U(T)

C

m5C、hm5