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文档简介
RNA的生物合成
細胞中的RNA,按其在蛋白質合成中的作用主要有哪幾種類型,有什麼作用?mRNA:信使RNA,蛋白質合成中起決定氨基酸順序的範本作用tRNA:轉運RNA,蛋白質合成中起攜帶活化氨基酸的作用rRNA:核糖體RNA,與蛋白質結合形成核糖體,是合成蛋白質的細胞器。本章的要求1、掌握轉錄的概念和特點2、掌握原核生物轉錄的過程3、掌握轉錄和複製的區別
1.轉
錄
概述
以DNA為範本,指導合成RNA的過程,這種遺傳資訊的轉移稱為轉錄。
1.1轉錄的條件(1)範本:以DNA一條鏈為範本,合成
RNA鏈。(2)酶:主要為RNA聚合酶。(3)高能的底物:ATP、GTP、CTP、
UTP(4)轉錄方向:5´´3´
,不需引物。在轉錄過程中,雙鏈DNA中只有一條鏈可作為範本,稱為範本鏈或反義鏈,也可表示為負(-)鏈。與之相互補的另一條鏈則稱為編碼鏈或有義鏈,表示為正(+)鏈。範本鏈與編碼鏈上的遺傳資訊是否相同?1.2轉錄特點
轉錄是不對稱的有兩方面的含義:
一是DNA分子上一股可轉錄,另一股不轉錄;二是範本鏈並非永遠在同一單鏈上。不對稱轉錄1.3原核生物的RNA聚合酶RNA聚合酶:全酶α2ββ
σ
核心酶:α2ββ
´
起始因數:
σ;
σ作用:有啟動子識別作用;(使RNA聚合酶結合到DNA的啟動子上,參與基因轉錄起始有關)原核生物的RAN聚合酶亞基分子量功能α36512不明(酶的裝配…..)β150618催化磷酸二酯鍵的形成β
´
155613結合DNA範本σ70263識別啟動子,促進轉錄起始(1)範本識別(2)轉錄的起始(3)RNA鏈的延長(4)轉錄的終止2.轉錄過程(1)範本識別
•識別轉錄啟動子啟動子(promoter):RNA聚合酶識別,結合並確定轉錄起始位點的一段DNA序列。它一般位於轉錄起點的上游,約包括40個堿基對範本與酶的辨認結合RNA聚合酶保護區1根據對100多個基因堿基序列的分析,大腸桿菌的啟動子至少兩處共同順序,-35順序,約12bp的RNA聚合酶全酶識別部位-10順序,又稱為Pribnowbox約含7bp的RNA聚合酶全酶緊密結合部位.-10序列處的堿基富含AT,有助於DNA雙螺旋的局部解鏈。(2)轉錄的起始
•局部解開雙鏈DNA
•轉錄起點:第1個核苷酸摻入的位置,
第2個核苷酸摻人形成第1個磷酸二酯鍵,才表明轉錄的起始才結束,σ
才離開RNA聚合酶,剩下核心酶.不需引物(3)RNA鏈的延長
•核心酶在範本鏈上滑行
轉錄鼓泡:新生RNA鏈與範本鏈DNA形成一雜交雙螺旋鏈,約有12bp,含有核心酶、DNA範本和新生RNA的區域稱為轉錄鼓泡(4)轉錄的終止提供轉錄終止信號的DNA序列稱為終止子依賴ρ因數的轉錄終止子
非依賴ρ因數的轉錄終止子不依賴ρ因數的終止子
特點:在轉錄終止子前有一段富含A-T的序列,它的前面總有一段富含G-C的回文序列。問:回文序列能形成何種結構?原理:當終止子順序被轉錄時,與回文順序對應的RNA轉錄產物可借助鏈內堿基配對形成髮夾結構,使聚合酶減慢移動或暫停RNA的合成。
髮夾結構之後有一段多聚尿苷酸,
能提供使聚合酶脫離範本的信號。依賴ρ因數的終止子也含有回文順序,它編碼的RNA片段也形成髮夾結構,但需要ρ因數的幫助才能終止RNA的合成。
ρ蛋白具有DNA-RNA解螺旋酶和ATPase活性,可附著在新合成的RNA上,借助ATP水解提供的能量向RNA聚合酶移動,通過與聚合酶的相互作用終止轉錄,並使RNA-DNA解鏈,把產物和聚合酶釋放出來。3.複製和轉錄的異同點複制轉錄模板兩股鏈均複製範本鏈複製原料dNTPNTP酶DNA-polRNA-pol特點半保留複製不對稱轉錄產物子代雙鏈DNAmRNA,tRNA,rRNA配對A-T,C-GA-U,C-G,引物需要不需要合成鏈方向5’3’5’3’DNA資訊表達的最終產物是蛋白質?RNA聚合酶缺乏核酸外切酶活性,不具備核對功能,因此RNA轉錄的準確性比DNA複製(誤差率約在10-9-10-10)要求低得多,其誤差率約在10-4-10-5範圍內。問:RNA轉錄的準確性與DNA複製相比哪個更高?(1)回
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