实验小鼠饲养管理操作试题及答案

实验小鼠饲养管理操作试题及答案一、单项选择题（每题2分，共30分）1.依据《实验动物环境及设施》（GB14925-2010）国标要求，屏障环境饲养SPF级小鼠的适宜温度范围是（）A.16~20℃B.20~26℃C.26~30℃D.18~24℃2.SPF级小鼠饲养环境的适宜相对湿度范围是（）A.30%~50%B.40%~70%C.50%~80%D.20%~40%3.屏障环境饲养小鼠的换气次数要求为每小时不少于（）次A.5B.10C.15D.204.常规饲养的成年SPF级小鼠，垫料更换的最低频次为（）A.每周1次B.每周2次C.每两周1次D.每3天1次5.SPF级小鼠的饮水必须满足的要求是（）A.市售矿泉水B.纯化水C.灭菌纯化水D.蒸馏水6.底面积为600cm²的标准饲养笼，饲养体重20~30g的成年雄性小鼠，最大饲养密度为每笼（）只A.5B.8C.10D.157.近交系小鼠种雌鼠的适宜合笼周龄为（）A.4~6周龄B.6~8周龄C.10~12周龄D.12周龄以上8.近交系小鼠的平均妊娠期为（）A.14~16天B.19~21天C.23~25天D.28~30天9.SPF级小鼠群的健康病原体监测最低频次为（）A.每月1次B.每3个月1次C.每半年1次D.每年1次10.下列废弃物处置方式符合规范的是（）A.废弃垫料直接作为生活垃圾丢弃B.实验小鼠尸体高压灭菌后冷冻存放，交由有资质单位处置C.使用过的注射器直接扔入可回收垃圾桶D.病死小鼠尸体无需灭菌直接移交11.成年小鼠抓取的规范操作是（）A.直接抓取小鼠颈部皮肤B.捏住小鼠尾尖提起C.捏住小鼠尾根部提起，固定于实验台或手心D.捏住小鼠四肢提起12.小鼠耳标编号常规规则中，面向小鼠时左耳打标代表十位、右耳代表个位，左耳打1个标、右耳打3个标，对应的编号是（）A.13B.31C.4D.10313.麻醉术后小鼠复苏的最佳环境温度为（）A.25℃B.30℃C.37℃D.42℃14.下列垫料中不适用于饲养免疫缺陷小鼠的是（）A.灭菌玉米芯垫料B.灭菌纸垫料C.未灭菌松木屑垫料D.灭菌刨花垫料15.实验动物福利的3R原则不包括下列哪项（）A.替代（Replacement）B.减少（Reduction）C.优化（Refinement）D.重复（Repetition）二、多项选择题（每题3分，共30分，多选、少选、错选均不得分）1.屏障环境饲养小鼠的环境参数符合要求的有（）A.温度22℃B.相对湿度55%C.噪音55dB(A)D.光照周期12L:12DE.换气次数8次/h2.SPF级小鼠要求必须排除的病原微生物包括（）A.小鼠肝炎病毒B.仙台病毒C.沙门氏菌D.支原体E.流行性出血热病毒3.实验小鼠饲料的管理要求正确的有（）A.粗蛋白含量不低于18%B.进入屏障环境前必须经过高压灭菌或辐照灭菌C.常温储存时间不超过3个月D.可根据需求添加适量营养补充剂E.霉变饲料剔除后剩余部分可继续使用4.小鼠繁育操作符合规范的有（）A.种鼠合笼雌雄比例为1:2B.查到阴栓后将雌鼠单笼饲养C.孕鼠产前1周更换柔软灭菌垫料D.仔鼠出生后第7天即可离乳E.离乳仔鼠雌雄分笼饲养5.下列属于小鼠健康异常表现的有（）A.被毛蓬松杂乱、无光泽B.粪便呈颗粒状、质地坚硬C.行动迟缓、蜷缩不动D.口鼻有白色或脓性分泌物E.进食量较同笼其他小鼠下降30%以上6.饲养人员进入屏障环境的规范流程包括（）A.一更区脱去个人衣物、佩戴一次性口罩帽子B.二更区穿戴灭菌防护服、鞋套、手套C.风淋室风淋30s以上，拍打衣物表面去除浮尘D.携带记录笔、手机等个人物品进入饲养区E.离开屏障环境时按反向流程脱卸防护装备7.下列小鼠给药操作符合规范的有（）A.灌胃使用12号以下弯口灌胃针B.尾静脉注射使用4~5号头皮针C.腹腔注射进针部位为下腹部左/右侧腹白线旁0.5cm处D.皮下注射进针部位为颈背部松弛皮肤E.肌肉注射进针部位为大腿外侧肌肉8.免疫缺陷小鼠的特殊饲养管理要求包括（）A.所有进入饲养区的物资必须经过严格灭菌处理B.饲养人员操作时佩戴双层手套、护目镜C.免疫缺陷小鼠可与普通SPF小鼠同区饲养D.饲养环境等级不低于SPF级E.每周增加1次垫料更换频次9.实验小鼠饲养过程中生物安全管理要求正确的有（）A.建立生物安全管理台账，所有操作记录可追溯B.所有接触过小鼠的废弃物必须高压灭菌后处置C.发生动物疫情时立即封锁饲养区，上报管理部门D.新引入小鼠无需隔离检疫可直接进入饲养区E.定期开展饲养人员生物安全培训10.实验小鼠人道处死的常用方法包括（）A.颈椎脱臼法B.二氧化碳窒息法C.过量麻醉法D.溺亡法E.击打头部法三、判断题（每题1分，共10分，对打√，错打×）1.小鼠饲养环境的光照周期可根据实验需求随时调整，不会影响小鼠的繁育与生理状态。（）2.辐照灭菌后的小鼠饲料常温下可存放6个月，无需控制储存条件。（）3.发现小鼠异常死亡后，应立即将死鼠丢弃，对同笼其他小鼠继续观察即可。（）4.抓取小鼠时应捏住尾根部提起，禁止提拉尾尖，避免尾部皮肤撕脱或尾骨断裂。（）5.普通级小鼠的饮水可使用未灭菌的自来水，无需额外处理。（）6.离乳后的雌雄仔鼠可同笼饲养至10周龄，不会发生早配现象。（）7.屏障环境的静压差需保持从清洁区到污染区梯度降低，避免外部污染物倒灌。（）8.小鼠的平均哺乳期为21~28天，可根据仔鼠生长状况适当调整离乳时间。（）9.所有动物实验操作必须提前提交动物伦理委员会审批，通过后方可实施。（）10.饲养记录可每周汇总补记一次，无需每日填报。（）四、简答题（每题7分，共28分）1.简述SPF级实验小鼠屏障环境饲养的核心管理要点。2.简述近交系小鼠繁育的全流程规范操作要求。3.简述小鼠群出现健康异常时的排查与处置流程。4.简述实验小鼠饲养管理中的生物安全与动物福利要求。五、实操案例分析题（每题11分，共22分）1.案例背景：某高校动物中心屏障饲养区，近1周内陆续出现21只C57BL/6J成年小鼠死亡，死鼠普遍表现为被毛逆立、腹部膨大、眼球凹陷，剖检可见肝脏表面散在黄白色坏死灶，脾脏肿大，同笼存活小鼠出现进食量下降、精神萎靡、稀便等症状。经调取记录，该饲养区上周新引入1批外地来源的SPF级小鼠，未进行隔离检疫直接放入饲养区。问题：（1）分析本次小鼠异常死亡的可能原因？（2）应采取哪些规范化处置措施？2.案例背景：某实验室饲养员为减少工作量，将16只8周龄雄性C57BL/6J小鼠放入同一个底面积650cm²的标准笼盒中饲养，合笼后未进行后续巡查。3天后发现有4只小鼠背部、尾部存在不同程度咬伤，其中2只伤口出现化脓感染，1只小鼠因伤势过重死亡。问题：（1）该饲养员的操作存在哪些不符合规范的问题？（2）针对当前问题应如何处置？后续如何优化管理？一、单项选择题答案1.B2.B3.B4.A5.C6.C7.B8.B9.B10.B11.C12.A13.C14.C15.D二、多项选择题答案1.ABCD2.ABCDE3.ABCD4.ABCE5.ACDE6.ABCE7.ABCDE8.ABDE9.ABCE10.ABC三、判断题答案1.×2.×3.×4.√5.×6.×7.√8.√9.√10.×四、简答题参考答案1.SPF级实验小鼠屏障环境饲养的核心管理要点：（1）环境管控：严格执行GB14925-2010参数要求，每日早、晚各记录1次温湿度、压差、换气次数，每月检测1次环境沉降菌、落下菌，每季度检测1次送风质量，确保环境参数稳定达标；（2）物资管控：所有进入屏障的饲料、垫料、笼具、饮水必须经过121℃高压灭菌20min或辐照灭菌，经传递窗进入时需开启紫外消毒30min以上，灭菌后物资存放时间不超过7天；（3）人员管控：所有进入人员需经过专业培训考核合格，严格执行“一更脱私服→二更穿无菌防护装备→风淋30s→进入饲养区”流程，患有呼吸道感染、皮肤破损等疾病的人员禁止进入，操作时避免跨区流动，减少人员出入频次；（4）动物管控：新引入小鼠必须提供合格的SPF级质量证明，在隔离检疫区饲养7~14天，连续2次病原体检测阴性后方可进入核心饲养区，每3个月开展1次全群健康监测，发现异常立即隔离；（5）废弃物管控：所有废弃垫料、实验耗材、动物尸体必须密封后经高压灭菌处理，再交由有资质的危废处理单位处置，严禁未灭菌物资流出屏障环境。2.近交系小鼠繁育的全流程规范操作要求：（1）种鼠筛选：选择遗传背景清晰、8~10周龄健康雄鼠、6~8周龄健康雌鼠作为种鼠，排除有发育异常、打斗伤痕、病原体感染的个体，种鼠繁殖代数控制在要求范围内，避免遗传漂变；（2）合笼管理：合笼雌雄比例为1:1或1:2，避免雄鼠比例过高引发打斗，合笼后每日早间检查雌鼠阴栓，查到阴栓记为妊娠0.5天，立即将孕鼠转移至单笼饲养，标注孕鼠信息、预产期；（3）待产管理：孕鼠产前1周更换柔软灭菌纸垫料，避免频繁搬动、打扰孕鼠，可补充灭菌瓜子、鸡蛋等高蛋白饲料，提升仔鼠存活率；（4）仔鼠管理：仔鼠出生后3天内禁止触摸，必要操作时需使用灭菌镊子、佩戴灭菌手套，避免母鼠弃仔，21~28天仔鼠体重达到10g以上时开展离乳操作，离乳时通过耳标、剪趾法进行个体编号，雌雄分笼饲养，标注品系、出生日期、亲本信息；（5）种鼠淘汰：种鼠使用周期不超过8个月，连续2窝产仔数低于5只、出现母性差、食仔等情况的种鼠立即淘汰，淘汰种鼠人道处死后按规范处置。3.小鼠群出现健康异常时的排查与处置流程：（1）初步排查：饲养人员每日巡查时发现异常个体后，立即将异常个体、同笼所有小鼠转移至隔离饲养区，标注异常信息，第一时间上报动物管理负责人，禁止私自处置；（2）诊断确认：采集病死鼠的血清、肝脏、脾脏、粪便等样本，开展病原体检测、病理剖检，明确致病原因，排查是否为人兽共患病；（3）溯源调查：调取异常出现前14天内的人员进入记录、物资灭菌记录、环境参数记录、新动物引入记录，排查污染来源，评估污染范围；（4）消杀处置：对原饲养笼位、饲养架、饲养间地面墙面采用0.2%过氧乙酸擦拭消毒，必要时开展过氧化氢熏蒸消毒，所有接触过异常小鼠的笼具、垫料、剩余饲料全部高压灭菌后无害化处理；（5）全群监测：对全饲养区的小鼠开展健康排查，每周开展1次病原体抽检，连续3次抽检无异常后方可解除隔离，若检测到人兽共患病病原体，立即上报生物安全管理部门，密接人员开展健康监测；（6）记录归档：所有排查、处置过程的记录全部整理归档，形成异常处置报告，上报伦理委员会、生物安全委员会备案。4.实验小鼠饲养管理中的生物安全与动物福利要求：（1）生物安全要求：建立分级生物安全管理体系，针对不同等级的小鼠、不同风险的实验制定差异化管控方案；定期开展人员生物安全培训，考核合格后方可上岗；制定动物疫情应急预案，每年开展1次应急演练；所有实验操作符合病原微生物安全管理要求，涉及高致病性病原的实验需在相应等级的生物安全实验室开展，严禁在普通饲养区开展高风险实验。（2）动物福利要求：严格遵循3R原则，实验设计阶段优先采用替代方法，尽可能减少动物使用量，优化实验操作减少动物痛苦；饲养密度符合国标要求，保证每只小鼠有充足的活动空间，提供充足的灭菌饲料和饮水，每周更换垫料保持饲养环境干燥清洁；所有实验操作需经过动物伦理委员会审批，操作时采用适宜的麻醉、镇痛方法，处死时采用颈椎脱臼、二氧化碳窒息、过量麻醉等人道方法，避免动物不必要的痛苦。五、实操案例分析题参考答案案例1参考答案（1）可能原因：①病原体感染：本次死亡小鼠剖检表现符合小鼠肝炎病毒、沙门氏菌感染的典型症状，新引入的外地小鼠未经过隔离检疫，大概率携带病原进入饲养区，造成全群传播；②管理漏洞：动物中心未执行新引入动物隔离检疫制度，屏障环境人员、物资管控可能存在疏漏，导致病原扩散；③环境应激：新引入小鼠运输过程中产生应激，抵抗力下降，病原大量增殖，引发发病死亡。（2）处置措施：①立即封锁发病饲养区，禁止人员、物资跨区流动，所有进出人员严格做好防护；②对病死鼠开展病原检测，确认致病源，若为人兽共患病立即上报当地疾控部门和生物安全管理部门；③将所有发病小鼠、同笼小鼠人道处死后高压灭菌，统一移交有资质单位处置，发病饲养区所有笼具、垫料、饲料全部高压灭菌后废弃，饲养区采用过氧化氢熏蒸消毒24h，通风后擦拭所有设施表面；④对全饲养区所有小鼠开展连续3周的健康监测，每周抽检1次病原体，无异常后解除封锁；⑤完善新引入动物管理制度，所有外来小鼠必须在隔离区检疫14天，2次病原检测合格后方可进入核心饲养区，对相关管理人员开展培训考核，避免同类问题再次发生。案例2参考答案（1）不符合规范的问题：①饲养密度严重超标：8周龄雄性C57BL/6J小鼠体重约25g，每只最小饲养面积为45cm²，650cm²的笼盒最大饲养量为14只，且雄性小鼠好斗，常规饲养密度不超过10只/笼，16只的饲养量远超标准，是引发打斗的核心原因；②未执行合笼后巡查制度：雄性小鼠合笼后需在1h、12h、24h分别开展巡查，及时发现打斗情况并分笼，饲养员合笼后未巡查，导致咬伤未及时处置，出现小鼠死亡。（2）当前处置方案：①将2只化脓感染的小鼠转移至单笼饲养，伤口用碘伏消毒，涂抹红霉