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文档简介

实验四

指导教师：张玲玲食品微生物学实验

实验项目肉膏汤培养基的制备普通琼脂平板培养基的制备半固体斜面培养基的制备细菌培养基的制备

一、目的

掌握培养基的制备方法

二、原理培养基是人工合成的一种混合营养料，用以分离细菌。基础培养基中含有大多数常见菌生长繁殖所需要的营养物质，并可制成液体、半固体、固体三种不同的性状以供选用。

三、材料牛肉膏、蛋白胨氯化钠、蒸馏水琼脂，10%NaOHpH试纸、三角烧瓶量筒，天平酒精灯、等。

四、方法⑴调配成分⑵溶解⑶调节pH⑷分装⑸灭菌⑹质量检验⑺保存

培养基配制步骤各组所需要配制的培养基

1.肉膏汤培养基

（先分装7支）3.普通斜面培养基2.普通琼脂平板培养基第2组:100ml（先分装7支）第1组:各100ml第3.4.5.6组:各100ml

每组倒7枚平板供6小组下次用

四、方法1.肉膏汤培养基的配制:

⑴称样：牛肉膏0.5g蛋白胨1g氯化钠0.5g

(2)待冷至40～50℃时，矫正酸碱度为pH7.6

(3)分装于试管内（每管约2ml）置高压蒸汽灭菌器内灭菌(121.3-20min)。

加至100ml蒸馏水中，加热溶化

四、方法2.普通琼脂平板培养基配制：于100ml肉膏汤培养基中加入2.5g琼脂，高压蒸汽灭菌，待冷至50～60℃，倒制平板。3.普通斜面培养基

于100ml肉膏汤培养基中加入1g琼脂，分装于试管内（每管约3-4ml）置高压蒸汽灭菌器内灭菌(121.3-20min)

.

配制见瓶签说明

四、方法1.细菌的接种方法（分区划线法）

12345(试教)四、方法细菌的接种方法

2.肉膏汤培养基

3.普通斜面培养基(试教)

四、方法

4.手指皮肤细菌检测

未消毒手指划线接种消毒手指划线接种放37℃温箱培养24小时看结果

普通琼脂平板4人接种

四、方法

5.紫外线杀菌试验

1.无菌操作取细菌接种2.密集划线法3.紫外线下照射30min4.放37℃温箱培养24小时看结果。

2.口腔细菌检测-咳碟法（示教）四、方法

四、方法3.空气细菌总数检测

(自然沉降法)打开培养皿，在空气中暴露15min后，放37℃温箱培养24小时看结果。以每平皿上平均菌落数（cfu/皿）报告结果。

四、方法

4.水体中细菌检测

（倾注培养法）

1.污水1ml

2.加热普通琼脂3.污水1ml+加热普通琼脂4.放37℃温箱培养24小时看结果。细菌总数≦100/ml

五、结果

配制出以下培养基：1.肉膏汤培养基2.普通琼脂平板培养基3.普通斜面培养基

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