种猪场猪繁殖与呼吸综合征净化技术规范

种猪场猪繁殖与呼吸综合征净化技术规范本文件规定了种猪场猪繁殖与呼吸综合征净化的分级标准、净化途径、净化场维持和净化场评估等技术要求。本文件适用于上海市种猪场的猪繁殖与呼吸综合征净化。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T17823集约化猪场防疫基本要求GB/T17824.3规模猪场环境参数与环境管理GB/T18090猪繁殖与呼吸综合征诊断方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27517鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合RT-PCR方法GB/T35912猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光RT-PCR检测方法GB/T36195畜禽粪便无害化处理技术规范NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T1569畜禽养殖场质量管理体系建设通则NY/T1952动物免疫接种技术规范NY/T2968种猪场建设标准3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1疫情发生场porcinereproductiveandrespiratorysyndromeoutbreakfarm猪繁殖与呼吸综合征病毒的野毒株在猪群内发生水平传播或垂直传播，导致猪群出现急性暴发或存在猪只持续被感染。经由病原学和血清学检测，可明确判定猪繁殖与呼吸综合征病原和抗体均呈阳性的3.2阳性不稳定场positiveunstablefarm猪繁殖与呼吸综合征病毒的野毒株在猪群内持续通过水平传播或垂直传播，导致猪群中持续出现新的感染个体，疫情处于动态发展状态。经由病原学和血清学检测，可明确判定猪繁殖与呼吸综合征病原和抗体均呈阳性，且猪群的阳性率及感染状态存在波动变化的种猪场。3.3阳性稳定场positivestablefarm猪群中虽存在猪繁殖与呼吸综合征野毒感染的带毒猪，但未发现病毒传播的明确证据，即带毒猪不向外排毒。通过实验室检测，猪群抗体检测持续呈阳性，然而对抗凝血、血清、家族口腔液、舌尖渗出液、处理液等样品进行病原学检测时，长期无法检出病毒核酸；或仅在极少数情况下偶尔检测到病原，但猪群内未出现新的感染病例，未形成病毒传播链，猪群整体阳性率保持稳定，无上升趋势的种猪场。3.4暂时阴性场provisionalnegativefarm引入的阴性后备母60天以上未发生抗体转阳，且除母猪群外其余猪群抗体检测均呈阴性，同时，场内所有猪群病原检测结果均呈阴性的种猪场。3.5阴性场negativefarm成为暂时阴性场后1年内仍保持病原和抗体双阴性的种猪场，或者是完全新建的病原和抗体双阴性的种猪场或者是清群后重新建群的病原和抗体双阴性的种猪场。4缩略语下列缩略语适用于本文件。5分级标准5.1本底调查5.1.1根据种猪场养殖量，按照50%预期流行率、95%置信区间，应分别从种公猪、生产母猪、后备种猪、保育猪和育肥猪等不同生产阶段猪群中随机采集病原学和血清学样品，同步检测PRRSV抗体和核酸，以全面掌握各生产阶段猪群PRRS感染状况。不同存栏数量的抽样参见附录A中表A.1。5.1.2各生产阶段猪群监测样品种类参见附录A中表A.2。样品采集、保存和运输应符合NY/T5415.1.3病原学检测方法，应按照GB/T18090或GB/T35912或GB/T27517，采用RT-PCR或实时荧光RT-PCR检测PRRSV核酸。5.1.4血清学检测方法，应按照GB/T18090，采用ELISA方法检测PRRSV抗体。5.1.5实验室检测中涉及的生物安全，应符合GB19489的规定。5.2类别划分根据本文件5.1本底调查中的病原学与血清学检测结果，结合生产性能、健康状况、引入种猪监测结果及各生产阶段猪只持续性监测结果等辅助指标，对种猪场猪只的PRRSV感染状态进行分类。依据种猪场猪只PRRSV感染状态分级标准（见表1），可将其分为阴性场、暂时阴性场、阳性稳定场、阳性不稳定场和疫情发生场五类。表1种猪场猪只PRRSV感染状态分级标准6净化途径6.1疫情发生场6.1.1疫情发生场应通过采取2次强化免疫，每次间隔20天，待达到阳性稳定场后，方可进行净化。6.1.2种猪场为阳性稳定场时，应采取封群净化法、检测淘汰法等不同的净化措施，逐步建立病原阴性种猪群。6.1.3净化可采取以下方法进行：a)封群净化法：由引入PRRS阴性后备种猪、封群、同群感染三个部分组成，即一次性引入未来5个月所需的PRRS阴性后备种猪；随即实施为期200天以上的封闭管理，期间不应引入任何后备种猪和断奶猪群；通过全群免疫2次疫苗，间隔30天或者驯化的方式实现同群统一感染；同时严格落实生物安全措施，有效阻断外部PRRSV传入及内部循环传播，并持续开展病原学监测，直到猪群PRRSV逐步转为阴性；在此基础上，挑选病原学检测呈阴性的后备种猪，建立净化基础群，该群所产后代仔猪在断奶后，应与原种猪群隔离饲养，独立培育成阴性猪群，用于净化基础群扩群；b)检测淘汰法：全群同步强化免疫疫苗后，停止免疫且不应引入后备种猪；待实施封群管理200天后，对猪群进行病原学检测，及时淘汰病原学阳性种猪，持续该流程，直至猪群中无病原学阳性种猪，方可引入PRRS阴性后备种猪。6.1.4建立病原阴性种猪群后，不应使用疫苗免疫。应采取封群净化法、检测淘汰法等不同的净化措施，逐步建立暂时阴性场。6.1.5采用封群净化法时，自封群后90天开始，应对未免疫PRRS疫苗的临床断奶仔猪开展病原学检测，每次应随机采集不少于30头仔猪的抗凝血样品，且样品应覆盖所有窝次，检测间隔为14天。若连续4次病原学检测结果均呈阴性，该场可判定为暂时阴性场。6.1.6采用检测淘汰法时，应着重对新引入的阴性后备种猪群体开展抽样检测。当阴性后备种猪与场内种猪群混群饲养60天后，应对全群采集血清样品进行血清学检测。若检测结果均为阴性，可认定该群体中无病毒循环。场内种猪群因前期免疫可能出现抗体阳性，但病原学检测结果应呈阴性。若场内存在保育、育肥等生长猪群，其血清学检测结果也应为阴性，满足上述条件方可判定该场为暂时阴性场。6.1.7在成为暂时阴性场后，应连续监测猪群抗体，逐步降低猪群抗体阳性比例，待抗体阳性率降至10%以下时，应全群采集血清逐头检测，及时淘汰抗体阳性种猪，最终使猪群达到病原抗体双阴性的猪群。6.1.8一旦发现病原阳性，立即淘汰病原阳性猪只，如果阳性范围扩大，发生PRRS疫情，该场应重新开始净化。6.2阳性不稳定场6.2.16.2.2阳性不稳定场应通过采取2次强化免疫，每次间隔20天，待达到阳性稳定场后，方可进行净达到阳性稳定场后，应按照本文件6.1.2～6.1.8规定的净化途径净化。6.3阳性稳定场应按照本文件6.1.2～6.1.8规定的净化途径净化。6.4暂时阴性场应按照本文件6.1.6～6.1.8规定的净化途径净化。6.5阴性场6.5.1阴性场可直接进入净化场维持。6.5.2一旦发现病原阳性，应立即淘汰病原阳性猪只，如果阳性范围扩大，发生PRRS疫情，该场应重新开始净化。7净化场维持7.1种猪场为阴性场时，应采取净化维持措施。7.2每季度应开展风险评估，按照附录B执行。根据种猪场所处风险等级，应针对关键风险因素采取措施持续完善生物安全体系建设。7.3应持续开展监测和动态分析评估。监测采用定期监测和异常监测相结合方式，应按照附录C执行。应根据定期监测和异常监测结果，结合生产管理、发病诊疗情况等，分析场内疫病流行状况，评估猪群状态。7.4猪舍温湿度、饲养密度、粪污无害化处理、防疫管理、疫苗免疫和质量管理体系应分别符合相应标准，按照附录D中D.1执行。引种应按照附录D中D.2执行。8净化场评估种猪场应符合下列所有条件，即达到PRRS的净化标准：a)净化场维持在12个月以上且无临床病例；b)抽检种公猪、生产母猪和后备种猪，PRRS病原学和血清学（仅检测N蛋白抗体）检测结果均为阴性。净化场评估不同存栏数量的抽样参见附录E中表E.1。（资料性）本底调查阶段抽样和监测样品种类A.1本底调查阶段抽样本底调查阶段，对种公猪、生产母猪、后备种猪、保育猪和育肥猪等不同生产阶段猪群分别抽样，进行PRRS病原学和血清学检测，以全面掌握各生产阶段猪群PRRS感染状况。按照50%预期流行率、95%置信区间，各生产阶段不同存栏数量所需的抽样数量见表A.1。表A.1本底调查阶段抽样参考表存栏数量（头）抽样数量（头）存栏数量（头）抽样数量（头）33120015009173350078817500750∞A.2监测样品种类各生产阶段猪群监测样品种类见表A.2。表A.2各生产阶段猪群监测样品种类监测样品类型血清EDTA抗凝血淋巴结等）处理液家族口腔液舌尖渗出液（TTF）精液对象个体监测个体监测个体监测群体监测群体监测群体监测个体监测检测方法血清学和病原学病原学病原学病原学病原学病原学病原学适用各生产阶段猪群各生产阶段猪群各生产阶段猪群18日龄～断奶仔和后备种猪群去势-断奶期间的新生仔猪种公猪（规范性）净化场维持的风险评估B.1风险评估方法B.1.1输入性风险评估根据输入性风险评估原则和步骤，建立PRRS输入的风险评估模型，见表B.1。对照输入性风险评估模型，查找种猪场是否存在模型所列的3种类型、14种病原输入主风险及其对应的19个风险事件，将结果带入输入性风险评估模型，确定每条风险因素导致的输入风险等级和不确定度（见表B.2）。以实际存在的最高风险等级作为PRRS的输入性风险级别。表B.1输入性风险评估模型类型病原输入主要风险风险事件暴露概率不确定度风险水平种猪场位置周边猪场密度种猪场周边3km内存在其它猪场临近猪场情况临近猪场3km）PRRSV有流行极高极高屠宰场距离种猪场与屠宰场距离＜3km地势环境种猪场周边无天然屏障引进带毒猪只（近2年内）猪只混群前隔离检疫发生漏检或检测假阴性极高极高猪只混群前隔离但不检疫、不检测猪只不隔离直接混群购入带毒精液或胚出场前检测发生漏检或检测假阴性极高极高出场前不检测直接使用管理进入带毒犬、猫进入带毒鼠无有效防范，自由进入进入带毒鸟无有效防范，自由进入飘入气溶胶周边≤0.5km存在带毒气溶胶，空气未过滤或灭活病毒不彻底极高极高周边0.5km～1km存在带毒气溶胶，空气未过滤或灭活病毒不彻底周边1km～3km存在带毒气溶胶，空气未过滤或灭活病毒不彻底食用污染的饲料、水未灭活病毒或灭活病毒不彻底极高极高带猪肉制品进场未灭活病毒或灭活病毒不彻底使用污染的运输工具或器具未消毒或消毒不彻底进入带病原人员未消毒或消毒不彻底表B.2不确定度的级别级别描述数据确凿、完整；报道相互验证；证据充分、有力数据不够完整；报道不多；证据不够有力数据极度缺乏；几乎无相关报道；仅基于观察而得B.1.2内部风险评估采用逻辑回归方法，确定种猪场内部风险因素，并建立PRRS内部风险评估模型，见表B.3。对照内部风险评估模型，查找种猪场是否存在模型所列的6种类型、17种内部主风险及其对应的21个内部风险因素，将结果带入内部风险评估模型，确定每条风险因素导致的内部风险等级和不确定度。以实际存在的最高风险等级作为PRRS的内部风险级别。表B.3内部风险评估模型类型内部主要风险风险因素暴露概率不确定度风险水平感染状况疫病暴发情况种猪场3年内有PRRS疫情*极高临床病例3年以来存在PRRS临床病例*极高免疫状况疫苗使用使用PRRSV弱毒疫苗管理病死猪收集点设置病死猪收集点设在场区内流产物处理未及时收集且未消毒*极高患病猪处理方式患病猪隔离治疗但未采用隔离饲养内部人员串棚情况内部生产技术人员在不同功能分区和栋舍存在频繁串棚物品、器具等使用不同猪舍物品、器具频繁交叉使用免疫、治疗时更换针头情况免疫、治疗时未做到一猪一针*场区消毒频率消毒频率少于3次/周布局净、污道设置净道、污道未分开净道、污道有交叉，且无有效防止交叉的措施栏舍设置栏舍间无实体间隔隔离猪舍设置无隔离猪舍*极高设备投入未使用空气高效过滤装置饲养模式养殖密度养殖密度超过设计饲养密度饲养方式未采用“全进全出”饲养方式采用单点式饲养场群健康协同病原猪肺炎支原体感染猪圆环病毒感染猪流感病毒感染B.2组合风险将种猪场输入性风险级别与内部风险级别带入风险组合矩阵，输入性风险评估模型见表B.1，内部风险评估模型见表B.3，确定组合风险等级见表B.4。表B.4风险组合矩阵内部风险水平输入性风险水平极高极高极高极高极高B.3风险评估分级B.3.1高风险场满足以下条件之一的种猪场，判定为PRRS高风险场：a)PRRS输入性风险和内部风险的组合风险分级为高或极高的种猪场；b)近2年内，适龄猪只全群PRRS病原学监测有阳性的，或有PRRS临床病例的种猪场。B.3.2中风险场满足以下条件之一的种猪场，判定为PRRS中风险场：a)PRRS输入性风险和内部风险的组合风险分级为中等的种猪场；b)近2年内，适龄猪只全群PRRS病原学监测均为阴性，且无PRRS病临床病例，但近3年内有PRRS病原学监测阳性或临床病例的种猪场。B.3.3低风险场同时满足以下两个条件的种猪场，判定为PRRS低风险场：a)PRRS输入性风险和内部风险的组合风险分级为可忽略或低的种猪场；b)近3年内，所有适龄猪只全群PRRS病原学监测均为阴性，且无PRRS临床病例的种猪场。（规范性）净化场维持的监测和动态评估C.1定期监测C.1.1每季度应采集血清样品开展血清学检测。种公猪，应100%采集；生产母猪应按照妊娠30d~60d，妊娠60d～90d，产后3周，各群体随机采集不少于30头/次；保育、育肥等生长猪群，应按照8周龄、12周龄～14周龄、20周龄～22周龄，各群体随机采集不少于30头/次；后备种猪、引进种猪混群前应全群采集。C.1.2每季度应采集病原学样品开展病原学检测。应按照证明无疫公式，95%置信区间、5%预期流行率计算抗凝血抽样量，见表C.1；5份～10份种公猪精液；5窝～10窝仔猪家族口腔液；5窝～10窝仔猪处理液；5窝～10窝仔猪舌尖渗出液。表C.1定期监测抽样参考表存栏数量（头）抽样数量（头）存栏数量（头）抽样数量（头）35120045150051543500555675007505757∞59C.2异常监测对异常猪只应采集样品进行病原学检测。异常猪只包括出现流产、早产、死胎或木乃伊胎等症状的生产母猪；出现体温升高、采食量下降、有呼吸道症状等临床症状的发病猪只以及出现异常死亡的病死猪。收集样品种类包括病死猪的肺脏、扁桃体、淋巴结等组织、血液、口鼻拭子、仔猪舌尖渗出液及母猪所产的弱仔、死胎、流产胎儿等。C.3动态评估对定期监测、异常监测结果进行汇总分析，结合生产