法医DNA测试试题及答案

法医DNA测试试题及答案考试时间：______分钟总分：______分姓名：______选择题（10题，每题2分，共20分）1.下列哪种方法不适合用于微量降解DNA的提取？（）A.硅膜吸附法B.有机酚-氯仿法C.磁珠法D.Chelex-100法2.STR分型中，stutter峰的主要成因是？（）A.PCR扩增错误B.等位基因丢失C.DNA链内重复序列的滑动D.电泳分离不完全3.法医DNA测试中，PCR抑制剂通常来源于？（）A.样本中的血红蛋白B.引物设计不合理C.电泳缓冲液pH值异常D.DNA聚合酶活性过高4.毛细管电泳分离DNA片段时，影响迁移率的关键因素是？（）A.电压大小B.样本浓度C.电泳温度D.染料类型5.在亲权鉴定中，似然比（LR）的计算公式是？（）A.LR=PI/(1-PI)B.LR=P(证据|假设)/P(证据|对立假设)C.LR=等位基因频率之和D.LR=峰高比/峰面积比6.法医DNA实验室设置三个独立区域的目的是？（）A.提高实验效率B.防止交叉污染C.降低实验成本D.便于样本存储7.STR基因座命名规则中，D8S1179表示？（）A.位于第8号染色体B.重复序列长度为1179bpC.发现于第8号基因座D.等位基因数量为1179个8.降解DNA样本的STR分型常见问题是？（）A.峰高比异常升高B.等位基因丢失C.stutter峰增加D.峰面积扩大9.法医DNA数据库CODIS的核心组件是？（）A.线粒体DNA序列B.STR基因座数据C.SNP分型结果D.Y染色体标记10.PCR扩增中，Mg²⁺浓度过高可能导致？（）A.扩增效率降低B.非特异性产物增加C.引物二聚体形成减少D.扩增时间缩短填空题（15空，每空1分，共15分）1.法医DNA测试中，最常用的STR基因座是________，其核心序列为________。2.为防止PCR污染，实验室应设置________、________和________三个独立区域。3.亲权鉴定中，PI值表示________，其计算公式为________。4.DNA提取的质量控制指标包括________、________和________。5.混合样本STR分型中，峰高比通常用于判断________。6.stutter峰的高度一般为主峰的________。7.法医DNA样本保存的常用温度是________。8.PCR反应体系中的关键组分包括________、________、________和________。9.STR分型图谱中，等位基因的命名依据是________。10.DNA纯度检测中，A260/A280比值正常范围为________。名词解释（5题，每题4分，共20分）1.等位基因2.峰高比3.亲权指数（PI）4.stutter峰5.混合样本简答题（3题，共25分）1.简述法医DNA提取的质量控制措施。（8分）2.混合样本STR分型的分析策略有哪些？（9分）3.解释PCR扩增中引物设计的基本原则。（8分）案例分析题（1题，共20分）案例背景：一起盗窃案中，从现场遗留的烟蒂上提取唾液样本，进行STR分型，结果如下表（部分基因座）：|基因座|烟蒂样本基因型|嫌疑人基因型|受害人基因型||--|-|--|--||D3S1358|15,17|15,17|16,18||vWA|17,19|17,19|18,20||FGA|21,23|21,23|22,24||TH01|6,9|6,9|7,8|问题：1.判断烟蒂样本是否为混合样本？说明依据。（5分）2.计算D3S1358基因座的亲权指数（PI），假设15等位基因在人群中的频率为0.10。（5分）3.结合结果，分析嫌疑人是否为烟蒂提供者，并说明理由。（10分）试卷答案选择题1.B解析思路：有机酚-氯仿法适用于大分子DNA提取，但降解样本易导致DNA损失，而硅膜法、磁珠法、Chelex-100法更适合微量/降解样本。2.C解析思路：STR重复序列在PCR过程中发生链内滑动，产生“-1”或“-2”等位基因片段，形成stutter峰，这是STR分型的固有特征。3.A解析思路：样本中的血红蛋白是常见PCR抑制剂，会抑制DNA聚合酶活性，导致扩增失败；引物设计不合理、pH值异常、酶活性过高属于其他问题。4.A解析思路：毛细管电泳中，电压大小直接影响电场强度，从而控制DNA片段的迁移率；样本浓度、温度、染料类型影响分离效果但非关键因素。5.B解析思路：似然比（LR）是亲权鉴定中衡量假设支持度的指标，公式为P(证据|假设)/P(证据|对立假设)，PI是LR的另一种表达形式。6.B解析思路：三个独立区域（样本制备、PCR扩增、产物分析）可防止样本交叉污染，确保结果准确性；提高效率、降低成本、便于存储非主要目的。7.A解析思路：STR基因座命名中，“D”代表DNA，“8”表示染色体位置，“S1179”为基因座编号；重复序列长度、发现顺序、等位基因数量与命名无关。8.B解析思路：降解DNA导致大片段丢失，STR分型时小片段可检出，大片段等位基因无法扩增，表现为等位基因丢失；峰高比异常、stutter峰增加、峰面积扩大属于其他现象。9.B解析思路：CODIS数据库核心组件为STR基因座数据，用于个体识别和比对；线粒体DNA、SNP、Y染色体标记为补充标记。10.B解析思路：Mg²⁺浓度过高会降低引物特异性，导致非特异性产物增加；扩增效率降低、引物二聚体减少、时间缩短与浓度过高无关。填空题1.CSF1PO；四核苷酸重复序列解析思路：CSF1PO是最常用STR基因座之一，其核心序列为四核苷酸重复，具有高度多态性。2.样本制备区、PCR扩增区、产物分析区解析思路：三区域设置是防污染标准流程，分别对应样本处理、扩增和检测环节，避免交叉污染。3.遗传支持度；PI=X/(1-X)，X为等位基因在人群中的频率解析思路：PI表示被控父亲是孩子生物学父亲的相对可能性，计算基于等位基因频率，公式为PI=似然比。4.DNA浓度、DNA纯度、DNA完整性解析思路：质量控制需检测DNA浓度（确保模板量）、纯度（A260/A280比值）、完整性（电泳条带无降解）。5.混合比例解析思路：峰高比反映混合样本中各组分比例，如1:1混合时峰高比接近1:1，用于判断混合程度。6.10%-15%解析思路：stutter峰高度通常为主峰的10%-15%，是STR扩增的固有特征，用于区分真实峰和干扰峰。7.-20℃解析思路：DNA样本需在-20℃或更低温度保存，防止降解；4℃短期保存但易降解。8.DNA模板、引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶解析思路：PCR反应体系核心组分包括模板DNA、引物（结合位点）、dNTPs（合成原料）、Taq酶（催化扩增）。9.核心序列重复次数解析思路：STR等位基因命名依据核心序列重复次数差异，如repeats=10对应特定片段长度。10.1.7-2.0解析思路：DNA纯度检测中，A260/A280比值1.7-2.0表示无蛋白质或RNA污染；比值过低含蛋白，过高含RNA。名词解释1.等位基因解析思路：同一位点上控制同一性状的不同基因形式，在STR分型中表现为不同长度扩增产物，由核心序列重复次数差异决定。2.峰高比解析思路：毛细管电泳图谱中，同一基因座两个等位基因峰的高度比值，正常样本为1:1-3:1，用于判断混合样本或等位基因丢失。3.亲权指数（PI）解析思路：衡量被控父亲是孩子生物学父亲的相对可能性，计算公式为PI=似然比，PI>1支持亲权关系，PI<1排除。4.stutter峰解析思路：STR扩增过程中因链内滑动产生的“-1”或“-2”等位基因片段，高度为主峰10%-15%，是STR分型的特征峰。5.混合样本解析思路：来自两个或多个个体的DNA混合样本，STR分型时出现多个峰，需通过峰高比、软件辅助分析各组分。简答题1.简述法医DNA提取的质量控制措施。答案：样本标识（唯一编号）、阴性对照（监测污染）、定量检测（分光光度计测浓度纯度）、完整性检测（电泳观察条带）、抑制剂检测（PCR扩增验证）。解析思路：质量控制需覆盖样本全流程，防止污染和降解，确保DNA质量符合扩增要求。2.混合样本STR分型的分析策略有哪些？答案：峰高比分析（判断混合比例）、stutter峰识别（区分主峰与干扰峰）、基因座一致性分析（确认混合成分）、软件辅助（去卷积分析）、条件优化（提高低组分检出率）。解析思路：混合样本需多策略结合，通过峰高比确定比例，软件辅助解卷积，优化条件提升灵敏度。3.解释PCR扩增中引物设计的基本原则。答案：长度18-22bp、GC含量40-60%、避免二级结构（发夹）、3'端稳定性（GC含量高）、特异性（与模板匹配）。解析思路：引物设计需确保高效结合和特异性，避免非扩增，提高PCR效率和准确性。案例分析题1.判断烟蒂样本是否为混合样本？说明依据。答案：是混合样本。依据：D3S1358、vWA、FGA基因座出现3个峰，且峰高比接近1:1，提示至少两个个体混合。解析思路：基因座出现多个峰且峰高比均衡是混合样本的典型特征，需结合多个基因座判断。2.计算D3S1358基因座的亲权指数（PI），假设15等位基因在人群中的频率为0.10。答案：PI=1/0.10=10。解析思路：嫌疑人基因型15,1