QBT 8141-2025 饮料中绿原酸类化合物的测定 高效液相色谱法标准立项发展报告

饮料中绿原酸类化合物的测定高效液相色谱法StandardizationDevelopmentReport:DeterminationofChlorogenicAcidCompoundsinBeveragesbyHighPerformanceLiquidChromatography摘要随着我国饮料工业的快速发展和消费者健康意识的不断提升，饮料中功能性成分的准确测定成为食品质量安全控制的重要环节。绿原酸类化合物作为饮料中常见的生物活性成分，具有抗氧化、抗炎、调节血糖等多种生理功能，其含量水平直接影响饮料的品质评价和营养声称。然而，目前我国尚未建立统一的饮料中绿原酸类化合物的测定标准方法，各检测机构和企业实验室在检测过程中存在方法不一、结果可比性差等问题。为填补这一标准空白，工业和信息化部下达了《饮料中绿原酸类化合物的测定高效液相色谱法》行业标准制定计划，标准编号为QB/T8141-2025。该标准由全国食品工业标准化技术委员会归口管理，多家权威检测机构和科研院所共同参与起草。标准规定了饮料中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C等六种主要绿原酸类化合物的高效液相色谱测定方法，适用于饮料中上述化合物的定性定量检测。本标准的发布实施将有效规范饮料行业绿原酸类化合物的检测技术，为产品质量控制、市场监管和功能性饮料的研发提供有力的技术支撑。关键词：绿原酸类化合物；高效液相色谱法；饮料；行业标准；检测方法；质量控制AbstractWiththerapiddevelopmentofChina'sbeverageindustryandthecontinuousimprovementofconsumers'healthawareness,theaccuratedeterminationoffunctionalcomponentsinbeverageshasbecomeanimportantpartoffoodqualityandsafetycontrol.Chlorogenicacidcompounds,ascommonbioactivecomponentsinbeverages,possessvariousphysiologicalfunctionssuchasantioxidant,anti-inflammatory,andbloodglucoseregulation,andtheircontentlevelsdirectlyaffectthequalityevaluationandnutritionalclaimsofbeverageproducts.However,nounifiedstandardmethodforthedeterminationofchlorogenicacidcompoundsinbeverageshasbeenestablishedinChina,resultinginissuesofinconsistentmethodsandpoorcomparabilityofresultsamongdifferenttestinginstitutionsandenterpriselaboratories.Tofillthisstandardgap,theMinistryofIndustryandInformationTechnologyissuedtheplanforthedevelopmentoftheindustrystandard"DeterminationofChlorogenicAcidCompoundsinBeveragesbyHighPerformanceLiquidChromatography,"numberedQB/T8141-2025.ThestandardisunderthecentralizedmanagementoftheNationalFoodIndustryStandardizationTechnicalCommittee,withmultipleauthoritativetestinginstitutionsandresearchinstitutesparticipatinginitsdrafting.ThestandardspecifiestheHPLCmethodforthedeterminationofsixmajorchlorogenicacidcompoundsinbeverages,includingchlorogenicacid,neochlorogenicacid,cryptochlorogenicacid,isochlorogenicacidA,isochlorogenicacidB,andisochlorogenicacidC,andisapplicabletothequalitativeandquantitativedetectionoftheabovecompoundsinbeverages.Thepublicationandimplementationofthisstandardwilleffectivelystandardizethedetectiontechnologyofchlorogenicacidcompoundsinthebeverageindustry,providingstrongtechnicalsupportforproductqualitycontrol,marketsupervision,andthedevelopmentoffunctionalbeverages.Keywords:Chlorogenicacidcompounds;Highperformanceliquidchromatography;Beverages;Industrystandard;Detectionmethod;Qualitycontrol一、引言1.1研究背景绿原酸类化合物（ChlorogenicAcidCompounds）是由咖啡酸与奎尼酸通过酯键结合形成的酚酸类化合物，广泛存在于咖啡、茶、金银花、杜仲、菊苣等植物原料中。该类化合物具有显著的抗氧化活性，能够清除体内自由基，延缓细胞氧化损伤；同时具有抗炎、抗菌、保肝利胆、调节糖脂代谢等多种生物活性。近年来，随着功能饮料市场的迅速扩张，富含绿原酸类化合物的植物饮料、咖啡饮料、茶饮料等产品日益增多，消费者对饮料中活性成分含量的关注度持续升温。然而，与饮料行业的快速发展相比，绿原酸类化合物的检测标准体系建设明显滞后。目前，我国涉及绿原酸检测的标准主要针对中药材和植物原料，如《中华人民共和国药典》中收载的金银花、杜仲等药材的含量测定方法，以及部分植物提取物的相关标准。对于成分复杂、基质多样的饮料产品，尚缺乏统一、规范的绿原酸类化合物测定标准。由于饮料中糖类、色素、有机酸等共存成分复杂，直接套用药材检测方法往往导致分离度差、回收率低、基质干扰严重等问题，难以满足饮料产品质量控制的实际需求。1.2标准立项的必要性饮料中绿原酸类化合物检测标准的缺失带来了多方面的现实问题。第一，各生产企业采用自建方法进行内控检测，方法原理、仪器条件、前处理流程各不相同，导致同类产品的检测结果缺乏可比性。第二，市场监管部门在监督抽查过程中缺乏统一的判定依据，不利于公正执法和消费者权益保护。第三，功能性饮料在宣称"富含绿原酸"等营养声称时，缺少公认的检测方法作为验证支撑，容易产生虚假宣传和误导消费的风险。第四，随着饮料产品进出口贸易的不断增长，检测方法的不统一也增加了国际贸易中的技术壁垒风险。1.3标准制定依据本标准依据《中华人民共和国标准化法》和《行业标准管理办法》的有关规定，按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的要求进行编制。标准计划由工业和信息化部下达，由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口管理。标准的制定紧密围绕饮料行业的技术发展需求，充分参考了国内外相关标准和技术文献，经过广泛调研、实验验证和专家审议等程序完成编制工作。二、标准主要内容2.1范围界定本标准规定了饮料中绿原酸类化合物的高效液相色谱测定方法，包括方法原理、试剂与材料、仪器与设备、样品前处理、色谱条件、定性定量分析、精密度和准确度等技术内容。标准适用于咖啡饮料、茶饮料、植物饮料及其他含有绿原酸类化合物的饮料产品中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C六种化合物的测定。2.2方法原理本标准采用高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography，HPLC）作为核心检测技术。其方法原理为：试样经适当的提取和净化处理后，注入高效液相色谱仪，利用待测物在C18反相色谱柱上的保留行为差异实现各绿原酸类化合物的分离，经紫外检测器（UV）或二极管阵列检测器（DAD）在特定波长下进行检测，以色谱峰的保留时间进行定性，以色谱峰面积（或峰高）通过外标法进行定量。选择高效液相色谱法作为标准方法，主要基于以下几方面考量：一是高效液相色谱法技术成熟、仪器普及率高，在食品检测实验室中已广泛配备；二是该方法对绿原酸类化合物具有良好的分离效果和检测灵敏度，能够满足饮料中绿原酸类化合物的定量分析需求；三是相较于液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS），高效液相色谱法运行成本较低，更易于在基层检测机构和企业实验室推广应用。2.3样品前处理样品前处理是饮料中绿原酸类化合物测定的关键环节。考虑到不同饮料基质差异较大，标准针对不同类型样品规定了相应的前处理方案。对于成分相对简单的透明液体饮料（如碳酸饮料、水果饮料等），可采用直接稀释过滤的方式处理，即准确量取一定量试样，经0.45μm微孔滤膜过滤后直接进样分析。对于含有蛋白质、脂肪或大颗粒悬浮物的饮料（如含乳饮料、植物蛋白饮料等），需先经离心处理去除悬浮物，再经固相萃取（SPE）小柱净化以除去蛋白和脂肪等干扰物质。对于含有二氧化碳的碳酸饮料，需先经超声脱气处理后再行量取。2.4色谱条件标准推荐的色谱条件为：采用C18反相色谱柱（柱长150mm～250mm，内径4.6mm，粒径3μm～5μm），柱温控制在30℃～40℃之间。流动相采用乙腈-磷酸水溶液（或乙酸水溶液）体系进行梯度洗脱，检测波长设定在325nm～330nm之间（绿原酸类化合物的最大吸收波长）。流速一般为0.8mL/min～1.2mL/min，进样量为10μL。各绿原酸类化合物的分离顺序在标准色谱条件下依次为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C，六种化合物在30分钟内可实现基线分离，各色谱峰的理论塔板数不低于5000，分离度不低于1.5。2.5定性定量方法本标准采用保留时间法定性，即以标准品色谱图的保留时间与试样色谱图中相应色谱峰的保留时间进行比对，偏差不超过±0.5%。对于可疑峰，可通过二极管阵列检测器获取紫外光谱图进行辅助定性。定量方法采用外标法（多点校正），即将系列浓度的混合标准工作溶液依次注入色谱仪，记录色谱峰面积，绘制峰面积-浓度标准曲线，要求标准曲线的相关系数r不低于0.995。试样中各组分的含量根据标准曲线计算得到。2.6方法性能指标经多家实验室协同验证，本标准方法的主要性能指标达到以下水平：检出限与定量限：六种绿原酸类化合物的检出限（信噪比S/N=3）为0.02mg/L～0.05mg/L，定量限（信噪比S/N=10）为0.05mg/L～0.15mg/L，能够满足各类饮料样品中绿原酸类化合物含量测定的灵敏度要求。精密度：在重复性条件下，同一实验室对同一试样进行多次平行测定的相对标准偏差（RSD）不超过5%；在再现性条件下，不同实验室间测定的相对标准偏差不超过10%。线性范围：六种绿原酸类化合物在0.5mg/L～100mg/L浓度范围内呈现良好的线性关系。三、标准编制的技术创新点3.1首次建立覆盖饮料基质的绿原酸类化合物系统检测方法本标准是我国轻工行业首个针对饮料中绿原酸类化合物的检测方法标准，填补了该领域的标准空白。以往绿原酸的检测标准主要面向中药材和植物原料，而本标准针对饮料产品的特殊性进行了系统的方法学研究和方法验证，充分考虑了饮料中糖类、色素、有机酸、香精等多种共存成分对测定的干扰及其消除方案。3.2六种主要绿原酸类化合物同步检测标准实现了绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C六种主要化合物的同步分离与定量分析，克服了以往单一检测绿原酸或仅检测总绿原酸的局限性。这六种化合物是饮料原料中最为常见且含量较高的绿原酸类组分，覆盖了咖啡酰奎宁酸类的典型结构类型（3-位、4-位、5-位取代及双咖啡酰取代），能够较为全面地反映饮料中绿原酸类化合物的组成特征和含量水平。3.3针对不同饮料基质的差异化前处理策略饮料产品种类繁多，基质差异显著。标准在充分调研的基础上，将适用范围内的饮料进行了科学分类，针对不同类型饮料规定了差异化前处理方案，既保证了方法对不同基质的适应性，又兼顾了操作简便性和检测效率。对于基质简单、干扰较少的饮料采用直接稀释过滤法；对于基质复杂的饮料则引入固相萃取净化步骤，有效降低了基质效应。四、修订的企事业单位或标委会介绍4.1全国食品工业标准化技术委员会本标准由全国食品工业标准化技术委员会（SAC/TC64）归口管理。该技术委员会是在国家标准化管理委员会和工业和信息化部的领导下，负责全国食品工业领域标准化技术工作的专业组织。委员会由来自科研院所、高等院校、检测机构、行业协会和龙头企业的专家组成，在食品工业标准体系规划、标准制修订和技术审查方面具有丰富的经验和深厚的专业积累。在本标准的制定过程中，全国食品工业标准化技术委员会充分发挥了组织协调和技术把关作用，组织多轮专家研讨会和意见征集活动，对标准的技术内容进行了严格的科学性审查和规范性审查，确保了标准的质量水平。4.2主要起草单位本标准的主要起草单位包括中国食品发酵工业研究院有限公司、中国检验检疫科学研究院、广东省食品检验所等权威技术机构。其中，中国食品发酵工业研究院有限公司（以下简称"研究院"）是轻工行业具有重要影响力的综合性研究开发机构，长期从事食品发酵领域的科学研究和标准化工作。研究院成立于1955年，前身为轻工业部食品发酵工业科学研究所，经过数十年的发展，现已成为集科学研究、标准制定、质量检测、技术咨询于一体的综合性研究机构。研究院设有国家食品质量监督检验中心、全国食品发酵标准化中心等国家级技术平台，承担着大量食品领域国家标准、行业标准和团体标准的制修订工作。在饮料质量安全领域，研究院先后主持和参与制定了多项饮料产品标准和检测方法标准，在高效液相色谱分析技术方面积累了丰富的研究成果和实践经验。五、标准实施的意义与展望5.1对饮料行业的重要意义QB/T8141-2025标准的发布实施对饮料行业具有多重积极意义。首先，标准为饮料生产企业提供了统一、规范、可靠的绿原酸类化合物检测方法，有助于企业加强原料把关和出厂检验，提升产品质量控制水平。其次，标准为市场监管部门提供了明确的技术判定依据，有助于规范市场竞争秩序，打击虚假宣传行为，保护消费者合法权益。第三，标准为功能性饮料的产品研发和创新提供了技术支撑，企业可以依据标准方法对产品中绿原酸类化合物的含量进行准确评价，为新产品的品质声称和差异化竞争提供数据支撑。5.2对标准化体系建设的促进本标准的制定完善了我国饮料领域检测方法标准体系，填补了饮料中酚酸类活性成分检测标准的空白。标准的实施将带动饮料行业从单纯关注食品安全指标向食品安全与品质功能并重的方向发展，促进饮料标准体系从基础安全标准向品质提升标准延伸。5.3未来发展方向随着分析技术的不断进步和饮料行业的持续创新，绿原酸类化合物的检测方法标准仍有进