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文档简介

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h\t"标准文件_一级条标题,2,标准文件_附录一级条标题,2,"前言 II1范围 12规范性引用文件 13术语和定义 14检验项目 24.1原种成品卵 24.2一代杂交种成品卵 25检验流程 35.1原种检验流程 35.2桑蚕一代杂交种检验流程 36原种检验方法 46.1抽样 46.2外观包装检验及要求 46.3催青 46.4折净率 56.5单蛾良卵数 56.6每张良卵数 56.7良卵率 56.8实用孵化率 56.9微粒子病卵率 66.10合格判断 67一代杂交种检验方法 67.1抽样 67.2外观包装检验及要求 77.3催青 87.4每张良卵数 87.5良卵率 87.6实用孵化率 87.7微粒子病卵率 97.8合格判断 98卫生消毒 99数值修约 910检验报告 9前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由广西壮族自治区蚕业技术推广站提出、归口并宣贯。本文件起草单位:广西壮族自治区蚕业技术推广站、河池市蚕种场、玉林市蚕业技术推广站、广西南宁市邕州蚕种有限公司、广西益佳桑蚕养殖有限责任公司、百色市华农瑞泽蚕业有限责任公司。本文件主要起草人:胡文娟、黄艺、蒋满贵、汤庆坤、黎书明、唐亮、莫云霞、何松涛、黄康东、蒙霜、李莉苓、何珊珊、韦红群、夏青、唐名艳、商本庆、谢春红、李娟、覃龙伟、周洁、黄玲、梁志富、张银秀。桑蚕种成品卵检验规程范围本文件规定了桑蚕种成品卵检验的术语和定义、检验项目、检验流程,描述了检验方法和相应的质量指标。本标准适用于广西境内桑蚕种的质量检验。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T45191-2025桑蚕一代杂交种GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

饲育批rearingbatch在相同条件下,同时间收蚁的同一品种(或品系)的饲育区组成的群体。

制种批eggsraisinglot种茧调查符合品种性状或制种要求的饲育批组成的一个制种群体;同一制种批内也可按制种日(户)分段。[来源:GB/T45191-2025,3.12]

检疫批inspectionlotoffemalemoths作为一个检验单位抽样送检并进行合格与否判定的制种批,称为一个检疫批。

简化催青simplifiedincubation丙2~戊2胚胎(催青第1d~4d)保护温度24℃~25℃,相对湿度75%~80%,自然感光;戊3~己5胚胎(第5d~10d)保护温度26℃~28℃,相对湿度80%~85%,每日感光18h,80%以上转青后黑暗保护。

冷藏浸酸种acid-treatmenteggsafterchilling产下的蚕卵冷藏一定时间后,用盐酸溶液浸渍处理后的蚕种。

即时浸酸种commonacid-treatmenteggs蚕卵产下后,发育到胚胎形成期,用盐酸溶液浸渍处理后的蚕种。

桑蚕原种parenteggsofsilkworm供生产桑蚕一代杂交种用的蚕种。

桑蚕一代杂交种F1hybridofsilkworm桑蚕普通种桑蚕普种用桑蚕原种按固定杂交组合繁制的蚕种。

一本onebigpaperwithsilkwormeggs按平附种生产型式,在规格为48.5cm×37.5cm蚕连纸上产卵的4张一代杂交蚕种,俗称为一本。

平附种eggsoncard产附在一定规格蚕连纸上的蚕种。[来源:GB/T45191-2025,3.3]

散卵种looseeggs将产附于蚕连纸或散卵布上的蚕卵经脱落、消毒、比选等技术处理后的蚕种。[来源:GB/T45191-2025,3.4]

卵圈eggbatch蛾圈一只雌(母)蛾所产的蚕卵。

良卵normaleggs外观形态与色泽正常,并能正常孵化的蚕卵。

不良卵abnormaleggs不受精卵、死卵及在简化催青条件下胚胎不能正常发育的卵。

良卵率percentageofnormaleggs在调查样本中,良卵粒数占蚕卵总粒数的百分比。

实用孵化率practicalhatchabilityrate在调查样本中,80%蚕卵转青以后第3日孵化的蚕卵粒数占总良卵粒数的百分比。[来源:GB/T45191-2025,3.9]

微粒子病卵率rateofsilkwormpebrinediseaseinsilkwormeggs带微粒子孢子的蚕卵数占制种批(段)蚕卵总数的百分比。实际检验中按照规定的要求对成品蚕种进行抽样检验,以检出的微粒子病卵集团数来衡量。[来源:GB/T45191-2025,3.11,有修改]检验项目桑蚕原种成品卵检验项目包括:——外观包装检验;——折净率;——单蛾良卵数;——每张良卵数;——良卵率;——实用孵化率;——微粒子病卵率。桑蚕一代杂交种成品卵——外观包装检验;——每张(盒)良卵数;——良卵率;——实用孵化率;——微粒子病卵率。检验流程桑蚕原种检验流程桑蚕原种检验流程见图1。桑蚕原种检验流程图桑蚕一代杂交种检验流程桑蚕一代杂交种平附种检验流程桑蚕一代杂交种平附种流程见图2。桑蚕一代杂交种平附种检验流程图桑蚕一代杂交种散卵种检验流程桑蚕一代杂交种散卵种流程见图3。桑蚕一代杂交种散卵种检验流程图桑蚕原种检验方法抽样即时浸酸种在浸酸整理后抽取,冷藏浸酸种在蚕种入库后择时抽取。以母蛾检疫批为单位,按表1规定在3个以上点随机抽取外观检验用蚕种,用于外观包装标识检验。随机抽取上述蚕种2张,将每张种各卵圈纵向分割成2等份,将来自不同张的卵圈,按卵圈序号重新拼接成2张进行卵质检验,其中1张为正样,另1张为备样。样品保存条件与原制种批相同。原种成品卵质量检验抽样表母蛾检疫批数量(张)外观包装检验(张)(用于外观包装、折净率、单蛾良卵数等检验)卵质检验(张)(用于每张良卵数、良卵率、实用孵化率及病卵率等检验)≤500102501~1000202≥1001302外观包装检验及要求按表1规定的数量抽取外观包装检验样品,进行检验。生产标识:逐张检查样品蚕连纸上标识是否齐全。蚕连纸上应标明生产单位、许可证号、执行标准、品种、批次、蚕种编号、制种日期等信息。质量标识:销售的蚕种应经检验合格,并附合格证。催青将6.1.2中正样的1号~7号卵圈,按简化催青法进行催青,即丙2~戊2胚胎(催青第1d~4d)保护温度24℃~25℃,相对湿度75%~80%,自然感光;戊3~己5胚胎(第5d~10d)保护温度26℃~28℃,相对湿度80%~85%,每日感光18h,80%以上转青后黑暗保护。将6.1.2中正样的15~28号卵圈每圈分别装入小纸袋,在温度(29±0.5)℃、相对湿度≥85%的环境中催青。折净率调查6.1.1中抽取的外观检验用蚕种底板上的合格卵圈数,按式(1)计算折净率: z=j1j×100% (式中:z——折净率(%);j——调查卵圈总数(圈);j1——合格卵圈数(圈)。单蛾良卵数观察整理后的每张样品的卵圈情况,选择其中良卵数最少的三个卵圈进行调查,取平均值作为单蛾良卵数。每张良卵数按照6.3.1的要求催青正样的1号~7号卵圈,黑暗保护2d后,逐圈调查样卵孵化良卵数和未孵化良卵数(孵化的蚁蚕头数等于样卵孵化良卵数,可使用图像识别蚁蚕的方式调查样卵孵化良卵数,要求设备调查准确率在99%以上)。按式(2)计算样卵良卵数,取平均值,按式(3)计算每张良卵数: lx=lf+l式中:

lx——样卵良卵数(粒)

lf——样卵孵化良卵数(粒);ln——样卵未孵化良卵数(粒) ls=l×28 (式中:lsl——平均样卵良卵数(粒);28——代表一张原种由28个卵圈组成。良卵率取调查每张良卵数的卵圈,逐圈调查样卵不良卵粒数。按式(4)计算良卵率,取平均值: l=lxlx+式中:l——良卵率(%);lx——样卵ly——样卵实用孵化率从6.6的调查数据中,取样卵孵化良卵数和样卵良卵数,按式(5)计算实用孵化率,取平均值: f=lf

lx×100%式中:

f——实用孵化率(%);

lf——样卵孵化良卵数(粒)

lx——样卵良卵数(粒)。微粒子病卵率分蚁取6.3.2中催青的卵圈,待蚁蚕孵化并自然死亡后检验。将每个卵圈孵化的蚁蚕及死卵置于一个研磨容器中,作为一个检验集团。注液研磨将蚁蚕及死卵磨碎,再注入1ml~2ml1%氢氧化钠或氢氧化钾溶液,充分研磨。取样制片按研磨容器序号,每个研磨容器取2滴样液点于2块载玻片上,加盖盖玻片,制成镜检标本,分别由2名检验员检验。显微镜检验和记载结果用600倍以上光学显微镜检验,两名检验员对检,每个标本观察10个以上视野。发现微粒子孢子的样品,再点样复检确认。初检无微粒子孢子的样品以14个研磨容器为单位收集,经离心去上清液点样复检,若发现有微粒子孢子的重新点样回查确认。如实记录镜检结果。合格判断桑蚕原种质量指标(表2)桑蚕原种质量指标项目外观包装卵质单蛾良卵数(粒)折净率(%)生产标识质量标识每张良卵数(粒)良卵率(%)实用孵化率(%)病卵率(%)夏制种中系≥330≥50.0齐有≥11000≥92.0≥92.00日系≥330≥50.0齐有≥10000≥92.0≥92.00春秋制种中系≥360≥50.0齐有≥11000≥92.0≥92.00日系≥360≥50.0齐有≥10000≥92.0≥92.00桑蚕一代杂交种检验方法抽样平附种抽样冷藏浸酸种在蚕种入库后择时抽取,即时浸酸种在浸酸整理后抽取。以母蛾检疫批为单位,在3个以上点随机抽取外观检验用蚕种10本,用于包装标识检验。随机抽取上述蚕种2张,其中1张为正样,另1张为备样。从正样中割取3个20cm2的样卵,用于每张良卵数、良卵率及实用孵化率等项目检验。以批为单位,在3个以上点以本为单位随机抽取不少于10%的蚕种,轻微抖动或带一次性橡胶手套轻抚卵面,收集落下的蚕卵用于微粒子病卵率检验,需要的蚕卵重量如表2。蚕卵均分成两份,1份为正样,另1份为备样。一代杂交种平附种抽样数量批蚕种数量(张)病卵率检验抽样卵重量(g)其他检验抽样张数(张)(用于每盒良卵数、良卵率及实用孵化率等检验)100张以下102101~10001421001~20001622001~40001824001~60002226001~80002428001~10000282散卵种抽样冷藏浸酸种在蚕种入库后择时抽取,即时浸酸种在浸酸整理后抽取。每一制种批在3个以上点,以盒为单位随机抽取10盒以上,逐盒称量重量并记录。将上述10盒蚕种混合后按照表3抽取适量蚕卵,平分成两份,1份正样,1份备样。正样中抽取3.00g蚕卵分装成1.00g的样卵,将样卵平铺粘附于带胶蚕种纸(规格5cm×5cm)上,用细沙填充于间隙,制备成类似平附种样本的3个样卵,并标明样本信息,用于每盒良卵数、良卵率及实用孵化率等项目检验。将上述正样余下蚕卵,用于微粒子病卵率检验。一代杂交种散卵种抽样数量批蚕种数量(张)病卵率检验抽样蚕卵重量(g)其他检验抽样蚕卵重量(g)(用于每盒良卵数、良卵率及实用孵化率检验)小计抽样蚕卵重量(g)100张以下10616101~1000146201001~2000166222001~4000186244001~6000226286001~8000246308001~1000028634外观包装检验及要求平附种在3个以上点随机抽取10本蚕种,进行外观包装检验。产卵面积:用刻度尺测量每本蚕种的边长,计算产卵面积。取10本蚕种产卵面积平均值计算张种产卵面积。产卵面积应≥400cm2/张。卵面产附:观察样品蚕种的卵面及产附情况。卵面应整洁,产附应平整。生产标识:检查样品蚕种的标识信息是否齐全。蚕连纸上应标明生产单位、许可证号、执行标准、品种、批次、蚕种编号、制种日期、良卵粒数等信息。质量标识:销售的蚕种应经检验合格,并附合格证。散卵种在3个以上点随机抽取10盒蚕种,进行外观包装检验。逐盒称量蚕种,计算10盒蚕种的平均每盒重量。散卵装盒:散卵盒制作材料应对蚕种无害,散卵盒应透气、牢固、无破漏和发霉,盒体容积≥50cm3/盒。生产标识:检查样品蚕种的标识信息是否齐全。散卵盒上应标明生产单位、许可证号、执行标准、品种、批次、良卵粒数等信息。质量标识:销售的蚕种应经检验合格,并附合格证。催青将7.1.1.2或7.1.2.2中抽取3个样卵,按简化催青法进行催青,即丙2~戊2胚胎(催青第1d~4d)保护温度24℃~25℃,相对湿度75%~80%,自然感光;戊3~己5胚胎(第5d~10d)保护温度26℃~28℃,相对湿度80%~85%,每日感光18h,80%以上转青后黑暗保护。用于病卵率检验的样卵,即7.1.1.3中抽取的平附种样卵或7.1.2.3中抽取的散卵种样卵,置于温度(29±0.5)℃、相对湿度≥85

%的环境中催青。每张(盒)良卵数按照7.3.1的要求将样卵催青,黑暗保护2d后,逐圈调查样卵孵化良卵数和未孵化良卵数(孵化的蚁蚕头数等于样卵孵化良卵数,可使用图像识别蚁蚕的方式调查样卵孵化良卵数,要求设备调查准确率在99%以上)。按式(6)计算样卵良卵数,平附种按式(7)计算每张良卵数,散卵种按式(8)计算每盒良卵数: lx=lf+l式中:

lx——样卵良卵数(粒)

lf——样卵孵化良卵数(粒);ln——样卵未孵化良卵数(粒) ls=l20×α 式中:ls——每张良卵数(粒)

l——平均样卵良卵数(粒);

α——张种产卵面积(cm2);

20——代表20等份。 lr=l×b (AUTONUM)式中:lr——每盒良卵数(粒)

l——平均样卵良卵数(粒);

b——平均每盒重量(g)。良卵率取调查每张良卵数的三个样卵,调查样卵不良卵粒数,按式(9)计算良卵率,取平均值: l=lxlx+l式中:l——样卵良卵率(%);

lx——样卵良卵数(粒)ly——样卵不良卵数(实用孵化率从7.4的调查数据中,取样卵孵化良卵数和样卵良卵数,按式(10)计算实用孵化率,取平均值: f=lf

lx×100%式中:

f——实用孵化率(%);

lf

lx——样卵良卵数(粒)微粒子病卵率分蚁按7.3.2催青的样卵,待其出蚁并自然死亡后,按批蚕种数量大小及第一、第二样本集团数要求(表6),以200头蚁蚕为一个集团检验。注液研磨先将蚁蚕磨碎,再注入1ml~2ml1%氢氧化钠或氢氧化钾溶液,充分研磨。取样制片按研磨容器序号,每个研磨容器取2滴样液,点于2块载玻片上,加盖盖玻片,制成镜检标本,分别由2名检验员检验。显微镜检验和记载结果用600倍以上光学显微镜检验,两名检验员对检,每个标本观察10个以上视野。发现微粒子孢子的样品,再点样复检确认。初检无微粒子孢子的样品以14个研磨容器为单位收集,经离心去上清液点样复检,若发现有微粒子孢子的重新点样回查确认。如实记录镜检结果。合格判断桑蚕一代杂交种质量指标(表5);桑蚕一代杂交种微粒子病检验规定与判定标准(表6)。桑蚕一代杂交种质量指标项目平附种散卵种外观包装卵面:整洁产附:平整生产标识:齐全质量标识:有散卵盒容积:不小于50cm3包装材料:无破漏、透气、牢固、对蚕种无害生产标识:齐全质量标识:有每张或盒良卵数(粒)25000±500良卵率(%)≥92.0实用孵化率(%)≥95.0病卵率(%)<0.15良卵粒数、良卵率、实用孵化率、

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