NYT 4476-2025 大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程标准立项发展报告

大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程StandardizationDevelopmentReport:CodeofPracticeforIdentificationofSoybeanResistancetoPhytophthoraRootRot摘要大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程（NY/T4476-2025）是由中华人民共和国农业农村部发布的农业行业标准，于2025年1月9日发布，2025年5月1日正式实施。该标准针对大豆疫霉根腐病（*Phytophthorasojae*）这一严重影响我国大豆产量和品质的土传性病害，系统规定了大豆品种（系）及种质资源抗疫霉根腐病鉴定的术语定义、接种体制备、鉴定方法、病情调查与分级、抗性评价与判定等技术内容和操作流程。本报告基于标准立项背景、编制依据、主要技术内容和实施意义等方面，对该标准进行全方位解读与分析，旨在为标准使用者提供系统的技术指引，促进我国大豆抗病育种工作的规范化、标准化和国际化发展。标准的发布实施填补了我国在大豆抗疫霉根腐病鉴定领域行业标准的空白，对推动大豆抗病种质资源的精准评价与高效利用、加速抗病品种选育进程、保障国家大豆产业安全具有重要的现实意义和深远影响。关键词：大豆；疫霉根腐病；抗病性鉴定；技术规程；农业行业标准；种质资源Keywords:Soybean;PhytophthoraRootRot;DiseaseResistanceIdentification;TechnicalCodeofPractice;AgriculturalIndustryStandard;GermplasmResources1引言1.1研究背景大豆（*Glycinemax*(L.)Merr.）是世界上重要的油料作物和经济作物，也是我国居民植物蛋白和食用植物油的重要来源。近年来，随着国家对大豆产业安全的高度重视，大豆种植面积和产量稳步提升，但病害问题日益突出，成为制约大豆产业可持续发展的关键瓶颈因素之一。大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌（*Phytophthorasojae*）引起的一种毁灭性土传病害，广泛分布于世界各大豆主产区。该病害于1948年首次在美国印第安纳州被发现，此后在全球范围内迅速蔓延。我国于1989年在东北大豆产区首次分离得到大豆疫霉菌，此后在黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河南、安徽、山东等主要大豆产区相继发现并报道。大豆疫霉菌以卵孢子在土壤中越冬，可在土壤中长期存活，条件适宜时萌发产生游动孢子侵染大豆根部，导致幼苗出土前猝倒和出土后根腐，严重地块发病率可达50%以上，甚至造成绝产，对我国大豆生产构成严重威胁。选用和种植抗病品种是防治大豆疫霉根腐病最经济、有效且环境友好的途径。然而，大豆抗疫霉根腐病的精准鉴定是抗病育种和品种推广应用的前提和基础。由于大豆疫霉菌存在明显的生理小种分化现象，不同地区、不同时期的优势小种组成各异，且大豆品种（系）对不同小种的抗性反应存在显著差异，这对鉴定技术方法的规范性、准确性和可重复性提出了较高要求。1.2标准立项的必要性尽管大豆抗疫霉根腐病鉴定技术在科研实践中已有较为广泛的应用，但由于缺乏统一的行业标准，各科研单位和育种机构在鉴定方法上存在较大差异，主要体现在：接种体浓度和制备方法不统一，导致试验结果难以横向比较；接种方式多样（土壤接种法、根部接种法、下胚轴创伤接种法等），不同方法适用条件和判定标准各异；抗性评价的分级标准和判定指标不一致，影响品种抗性评价的准确性和可靠性。这种"各自为政"的局面严重制约了大豆抗病种质资源的精准评价、信息共享和高效利用，也不利于抗病品种的区域布局和推广应用。因此，制定统一的大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程，建立科学、规范、可操作性强且与国际接轨的鉴定技术体系，对于加速抗病育种进程、促进抗病品种的合理布局和科学应用、保障我国大豆产业安全和粮食安全具有重要的现实意义和战略价值。1.3标准编制依据本标准的编制主要依据以下法律法规和技术文件：-《中华人民共和国标准化法》及其实施条例-《农业行业标准管理办法》-GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》-GB/T6682《分析实验室用水规格和试验方法》-NY/T1305—2007《农作物品种抗病性鉴定技术规程第1部分：总则》等相关基础标准-国内外大豆疫霉根腐病研究领域的最新科研成果和技术进展2标准概况2.1标准基本信息表1标准基本信息|项目|内容||------|------||标准编号|NY/T4476-2025||标准名称|大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程||英文名称|CodeofPracticeforIdentificationofSoybeanResistancetoPhytophthoraRootRot||标准状态|现行||发布机构|中华人民共和国农业农村部||行业分类|农业（行业标准-农业）||分类号|植物栽培||发布日期|2025年1月9日||实施日期|2025年5月1日||国别|中国||语言|中文（简体）||标准性质|推荐性行业标准|2.2标准适用范围本标准规定了大豆抗疫霉根腐病鉴定技术的术语和定义、接种体制备、鉴定方法、病情调查与分级、抗性评价与判定等技术要求。本标准适用于大豆品种（系）和种质资源对大豆疫霉根腐病抗性的人工接种鉴定与评价，亦适用于田间自然病圃条件下的大豆抗疫霉根腐病辅助鉴定与评价。3主要技术内容解析3.1术语和定义标准明确了以下关键术语和定义：大豆疫霉根腐病（Phytophthorarootrotofsoybean）：由大豆疫霉菌（*Phytophthorasojae*Kaufmann&Gerdemann）侵染引起的大豆根部及茎基部腐烂的土传性病害。抗病性（diseaseresistance）：寄主植物抑制或延缓病原物侵入、扩展和繁殖的能力。生理小种（physiologicalrace）：同种病原物内具有不同寄主范围（致病力差异）的专化类型。鉴别寄主（differentialhost）：用于鉴别病原物生理小种或致病型的一组具有不同抗性基因的寄主品种。病情指数（diseaseindex）：根据植株发病严重程度的分级值加权计算得到的群体发病水平量化指标。接种体（inoculum）：用于人工接种病原物的病原体材料，包括游动孢子悬浮液、菌丝体等。3.2接种体制备接种体的质量和标准化制备是抗病性鉴定工作的重要环节。标准对大豆疫霉菌的活化培养、扩繁和接种体配制提出了明确技术要求。在大豆疫霉菌的活化培养方面，标准规定应采用适宜的大豆疫霉菌选择性培养基进行菌种的活化培养。大豆疫霉菌的培养温度一般控制在20℃～25℃范围内，光照条件可根据实际需要选择黑暗培养或光暗交替培养。培养时间视菌落生长情况而定，一般培养5～7天即可获得生长良好的菌落。为确保菌株的纯度和致病力，接种前需对菌株进行纯化鉴定和致病力测定。在接种体制备环节，标准重点规范了游动孢子悬浮液的制备方法。游动孢子悬浮液的大豆疫霉菌浓度一般采用血球计数板计数法进行检测，本标准要求的适宜浓度为每毫升1×10⁵～1×10⁶个游动孢子。为了保证试验结果的一致性和可重复性，标准对菌龄选择、诱导产孢条件、游动孢子释放和收集等关键步骤均做了明确规定，并对接种体的质量检查提出了要求。3.3鉴定方法标准根据实际应用场景和鉴定目的不同，将鉴定方法分为室内人工接种鉴定和田间自然病圃鉴定两大类。3.3.1室内人工接种鉴定方法室内人工接种鉴定是标准推荐的核心鉴定方法，主要包括以下三种：（1）下胚轴创伤接种法该方法适用于大量种质资源的初筛和品种抗性评价。具体操作为：将大豆种子播种于灭菌基质中，在适宜条件下培养至子叶展平期（一般播种后7～10天），用消毒后的接种针蘸取定量浓度的游动孢子悬浮液，在子叶节下方约1cm处的下胚轴部位刺伤接种。接种后保湿培养，根据病情发展情况进行调查记载。（2）根部接种法该方法通过将游动孢子悬浮液定量接种于大豆植株根际土壤中，模拟自然侵染条件，适用于品种（系）抗性的精准评价。具体操作为：将大豆幼苗移栽至装有灭菌蛭石或草炭土的营养钵中，在植株第一片复叶展开期，于植株基部定量浇灌游动孢子悬浮液。接种后保持适宜温湿度条件促进发病。（3）土壤接种法该方法将大豆疫霉菌的菌丝体或卵孢子培养物与灭菌土壤混合制成含菌土壤，将供试大豆品种播种于含菌土壤中，在适宜条件下培养至一定生育期后调查发病情况，适用于模拟自然条件下的大豆疫霉根腐病发生与为害。标准规定，室内人工接种鉴定应设置感病对照品种和抗病对照品种，每个处理不少于3次重复，每重复不少于10株，确保统计分析的可靠性。3.3.2田间自然病圃鉴定方法田间自然病圃鉴定是利用已知的大豆疫霉根腐病发生严重且分布均匀的病圃田间，通过自然感病方式进行抗性评价的辅助鉴定方法。标准规定，田间自然病圃应选择大豆疫霉根腐病发生历史清楚、发病均匀的田块，宜采用人工接种方法建立病圃。病圃鉴定采用完全随机区组设计，设置3次重复。在发病稳定期进行调查，调查方法和分级标准与室内接种鉴定一致。3.4病情调查与分级标准标准建立了科学合理的病情分级标准，将单株发病程度划分为以下5个等级：|病级|症状描述||------|----------||0级|无症状，植株生长发育正常||1级|植株下胚轴或根部有轻微变色病斑，面积占整株根部（或茎基部）面积的1%～25%，植株生长基本正常||3级|植株下胚轴或根部有明显病斑，面积占26%～50%，植株轻度矮化或叶片轻微黄化||5级|植株下胚轴或根部病斑面积占51%～75%，植株明显矮化、萎蔫或叶片黄化||7级|植株下胚轴或根部病斑面积占76%以上，植株严重萎蔫或枯死|病情指数计算公式为：$$DI=\frac{\sum(n_i\timess_i)}{N\timesS_{max}}\times100$$式中：$DI$为病情指数；$n_i$为各级发病株数；$s_i$为各级病级代表值；$N$为调查总株数；$S_{max}$为最高病级代表值。3.5抗性评价与判定标准标准根据病情指数将大豆品种（系）及种质资源对疫霉根腐病的抗性水平划分为以下5个评价等级：|抗性类型|病情指数范围|代码||----------|-------------|------||免疫（I）|DI=0|I||高抗（HR）|0＜DI≤20|HR||中抗（MR）|20＜DI≤40|MR||中感（MS）|40＜DI≤60|MS||感病（S）|DI＞60|S|标准明确规定，当感病对照品种的病情指数未达到本标准规定的有效判定标准时（一般要求感病对照病情指数≥60），该批次鉴定结果视为无效，需要重新进行鉴定。若抗病对照品种表现感病或感病对照品种表现抗病，亦应判定试验无效。该质控要求有效保障了鉴定结果的准确性和可靠性。4标准的主要技术特点与创新点4.1科学性与先进性本标准充分吸收和借鉴了国内外大豆疫霉根腐病抗性鉴定的最新研究成果和先进经验，在保证方法科学性的基础上，引入了国际通用的下胚轴创伤接种法等技术手段，并与我国大豆生产和科研实际相结合，形成了具有自主特色的鉴定技术体系。标准中各项技术参数均基于大量试验验证和多年实践积累，具有较强的科学依据和技术支撑。4.2系统性与完整性标准涵盖了从接种体制备、室内外鉴定方法、病情调查、抗性评价到结果判定等全流程技术环节，构建了一套系统完整的大豆抗疫霉根腐病鉴定评价技术体系。标准中明确了室内人工接种鉴定与田间自然病圃鉴定两种方法的适用条件和技术要点，实现了从实验室精确评价到田间辅助验证的有效衔接和互补。4.3规范性与可操作性标准对各关键技术环节均给出了明确的技术参数和操作规范，如游动孢子悬浮液浓度、接种量、培养条件、调查时间和方法等，具有较强的可操作性和可重复性。同时，标准设置了严格的试验有效性判定标准（对照品种校验），有力保障了不同试验批次、不同试验单位之间鉴定结果的可比性。4.4开放性与兼容性标准在方法选择上兼顾了不同层次使用单位的实际条件和需求，既包含了对仪器设备要求较高的精准定量接种方法，也包含了操作简便、易于推广的常规鉴定方法，体现了较好的开放性和适用性。标准在抗性评价分级上对接国内外通行的评价体系，有利于国际学术交流和合作研究。5主要编制单位介绍本标准的主要起草单位包括全国农业技术推广服务中心、中国农业科学院油料作物研究所、南京农业大学等单位，其中中国农业科学院油料作物研究所作为核心起草单位，发挥了重要的技术支撑作用。中国农业科学院油料作物研究所（以下简称"油料所"）始建于1960年，是中国农业科学院直属的专业性农业科研机构之一，坐落于湖北省武汉市，是我国从事油料作物科学技术研究的国家级公益性科研机构。油料所设有国家油料作物改良中心、农业农村部油料作物生物学与遗传育种重点实验室等国家级和省部级科研平台，建有国家油料作物种质资源库，保存各类油料作物种质资源3万余份，其中大豆种质资源8000余份。在大豆病害研究领域，油料所设有专门的植物保护研究团队，长期从事大豆疫霉根腐病、大豆胞囊线虫病、大豆花叶病毒病等重大病害的应用基础研究和防控技术研发。团队现有科研人员30余人，其中高级职称人员15人，具有博士学位人员占比超过80%。近五年来，团队先后主持国家重点研发计划课题、国家自然科学基金项目、国家现代农业产业技术体系（大豆）岗位科学家项目等国家级科研项目20余项，在大豆疫霉菌的致病机制、大豆抗病基因挖掘与利用、抗病种质资源创新等方面取得了一系列重要研究成果。油料所大豆病害团队在国内率先建立了大豆疫霉根腐病抗性鉴定标准化技术体系，创制了一批抗疫霉根腐病的大豆新种质和新品种（系），为我国大豆抗病育种提供了重要的技术支撑和材料基础。在NY/T4476-2025标准的研制过程中，油料所牵头组织了全国范围内的协作试验和实验室间比对验证工作，为标准的科学性和适用性提供了坚实的数据支撑和技术保障。此外，油料所还积极参与国际大豆疫霉根腐病研究协作网络，与美国的俄亥俄州立大学、爱荷华州立大学等国际知名研究机构保持密切的学术交流与合作关系，为提升我国在该领域的国际影响力和话语权发挥了积极作用。6标准实施的预期效益6.1社会效益NY/T4476-2025标准的发布实施，将有力促进大豆抗病育种工作的规范化和标准化，提高抗病品种选育效率和品种审定质量。通过统一鉴定技术标准，可实现不同育种单位、不同年度间鉴定结果的有效比对和信息共享，有利于加速抗病种质资源的发掘和利用，推动高产优质多抗大豆新品种的培育和推广应用，对保障国家粮食安全和食用植物油供给安全具有重要的战略意义。6.2经济效益大豆疫霉根腐病每年对我国大豆生产造成的产量损失十分可观，严重发生年份和地区可导致减产30%～50%甚至绝收。通过标准化抗性鉴定技术体系的应用