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植物品种特异性、一致性和稳定性测试指南连翘StandardizationDevelopmentReport:GuidelinesfortheConductofTestsforDistinctness,UniformityandStability—WeepingForsythia(*Forsythiasuspensa*)摘要关键词:连翘;植物新品种保护;特异性;一致性;稳定性;DUS测试;农业行业标准Keywords:WeepingForsythia;PlantVarietyProtection;Distinctness;Uniformity;Stability;DUSTesting;AgriculturalIndustryStandard1引言1.1研究背景连翘为木犀科(Oleaceae)连翘属(*Forsythia*)落叶灌木,原产于中国中部和北部地区,广泛分布于河北、山西、陕西、河南、湖北、四川等省份。连翘的干燥果实中医称为“连翘”,具有清热解毒、消肿散结的功效,是双黄连口服液、连花清瘟胶囊等著名中成药的核心原料药材。同时,连翘早春先叶开花,花色金黄、花期长,是我国北方地区重要的早春观花灌木和优良的水土保持树种。据不完全统计,全国连翘野生蕴藏量约50万吨,家种面积近200万亩,年产干品约10万吨,产业规模庞大。近年来,随着连翘医药及园林应用价值的深度开发,品种选育工作取得了长足进展。各地科研院所和企业先后选育出一批丰产型、高含量型、观赏型等不同应用方向的连翘新品种。截至2024年底,我国已受理连翘植物新品种权申请数十件。然而,由于缺乏统一的DUS测试指南,品种审查过程中存在测试指标不统一、判定标准不一致、测试周期差异大等问题,制约了品种权审查的质量与效率。1.2标准立项意义制定连翘DUS测试指南是完善我国植物新品种保护技术支撑体系的重要环节。该标准的发布填补了我国连翘属植物品种DUS测试领域的技术标准空白,对于规范连翘品种权审查、推动优良品种选育推广、促进种业自主创新和产业升级具有重要的现实意义和深远影响。2编制依据与原则2.1法规与政策依据本标准的编制主要依据以下法律法规和技术文件:-《中华人民共和国植物新品种保护条例》(2014年修订)及其实施细则-《中华人民共和国种子法》(2021年修订)-国际植物新品种保护联盟(UPOV)《测试指南总则》(TG/1/3)及其相关文件-UPOV关于DUS测试的TGP文件系列(TGP/7、TGP/8、TGP/9等)-《植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南总则》(NY/T2236-2012)2.2编制原则标准编制过程中坚持了以下原则:科学性:测试性状的选择以连翘的植物学特性为依据,充分参考国内外相关研究成果和测试实践经验,确保技术指标的客观性与可验证性。实用性:测试方法力求简便易行、经济高效,兼顾不同生态区和不同测试机构的条件差异,确保标准的可操作性。在保证测试质量和精度要求的前提下,充分考虑了基层测试单位的技术条件和成本承受能力。兼容性:标准的整体框架、性状选择和代码表述尽量与UPOV推荐的测试指南格式保持一致,兼顾国际通用性和国内品种特性,为未来开展国际品种测试合作预留技术接口。规范性:严格按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》和NY/T2236-2012等文件的规定进行编写,确保标准文本的规范性。3主要技术内容3.1适用范围本标准规定了连翘新品种特异性、一致性和稳定性测试的技术要求和判定方法,适用于连翘(*Forsythiasuspensa*)品种的DUS测试。对于连翘属内其他种或种间杂交品种的测试,可参照执行。3.2测试条件标准规定了测试圃地的基本要求,包括土壤条件、气候适应性、栽培管理措施等。测试圃地应能充分表达品种的性状特征,保证植株正常生长发育。测试栽培方式为露地栽培,测试周期至少为两个生长周期(即至少连续两个开花结实年度)。3.3测试方法3.3.1测试设计标准规定田间试验应采用随机区组设计,设三次重复。每个测试小区至少栽植10株测试植株,观测植株数量不少于5株。测试植株应为嫁接苗或扦插苗定植后生长正常、发育一致的植株,定植后第三年开始进行正式性状观测记录。3.3.2性状选择与观测标准系统规定了连翘DUS测试的性状指标体系,涵盖植株性状、茎干性状、叶片性状、花部性状、果实性状等5大类共36个基本性状。其中:-植株性状(5个):包括植株生长习性、植株高度、植株冠幅、分枝密度、主干数等;-茎干性状(5个):包括一年生枝颜色、枝节间长度、枝粗度、皮孔密度、枝姿态等;-叶片性状(8个):包括叶形、叶大小、叶色、叶缘锯齿、叶面特征、叶柄长度、叶质地、秋叶色等;-花部性状(14个):包括花冠颜色、花冠直径、花序类型、花瓣形态、花期早晚、开花持续期、花香、花瓣数、花萼形态、花冠筒长度、花丝颜色、花药颜色、雌蕊长度、自然结实率等;-果实性状(4个):包括果实形状、果实大小、果皮颜色、种子千粒重等。上述性状中,有12个为重点必测性状,用于品种特异性判定时的优先比较;其余为补充性状,根据品种类型和测试需要选用。3.3.3特异性判定标准规定,特异性判定主要依据性状表达代码的差异:若两个品种在同一性状上表达代码存在明确差异,且该差异能够在至少一个生长周期中稳定重现,则可判定该品种具备特异性。在性状差异判别中,数量性状的差异需达到至少一个代码级别的差异,质量性状的差异需表现为不同性状状态,伪质量性状需呈现可明确区分的不同形态特征。对于部分关键数量性状,标准列出了对应的标准品种(示例品种)作为参照。当测试品种与近似品种的性状差异达到一定程度时,结合形态标记和必要的分子标记辅助鉴定结果,进行综合判定。3.3.4一致性判定标准规定,一致性判定采用异型株法。对于营养繁殖或自花授粉的连翘品种,测试群体中异型株的比例不得超过2%,即在一个20株的观测群体中,异型株数量不得超过1株。对于开放授粉品种,可根据品种类型和繁殖方式适当放宽标准,但异型株比例不得超过10%。3.3.5稳定性判定标准规定,稳定性判定采用以下两种方法之一:-生长周期比较法:通过比较两个不同生长周期(如第一生长周期与第二生长周期)的观测结果,所有性状表达应保持一致,无显著差异;-繁殖材料代际比较法:通过比较上一代繁殖材料与当代繁殖材料所获得的植株性状表达,应保持一致且符合品种描述。3.4品种分组为提高测试效率,标准引入了品种分组技术。品种分组性状为:花冠颜色(单色/双色)、花期早晚、植株生长习性(直立型/开张型/垂枝型)。测试机构可根据品种分组性状将近似品种归入同一组内,分组测试有助于缩小测试范围、减少对照品种数量、提高特异性判定效率。3.5标准品种标准以表格形式列出了各性状的代码范围及对应的标准品种示例,为测试机构提供参照依据。例如:花冠颜色性状中,代码1(浅黄色)以‘EarlyForsythia’为参照,代码2(金黄色)以‘LynwoodGold’为参照,代码3(深黄色)以‘Sunrise’为参照,代码4(橙黄色)以‘BeatrixFarrand’为参照等。标准品种的选用主要参考了UPOV成员国连翘测试实践中积累的经验数据和公开品种描述资料。4关键技术问题说明4.1性状代码的量化连翘为木本植物,生长周期较长,部分性状(如花期、结实性状)在不同生态区和不同年份间存在一定的环境变异。为减小环境效应对测试结果的影响,标准在性状代码设置上充分考虑了性状的稳定性和可区分性,优先选择遗传力较高、环境影响较小的性状作为必测性状。对受环境影响较大的数量性状,标准设置了合理的观测时期和取样方法,并建议在多个生长周期中重复观测,以取重复观测结果的稳定表达值作为判定依据。4.2近似品种筛选近似品种的筛选是特异性判定前的关键步骤。标准规定,近似品种筛选应基于品种申报表中的性状描述信息,结合品种分组性状优先筛选同一组的已知品种,筛选范围应涵盖已受理或已授权保护的连翘品种以及公共知识范畴内的已知品种。必要时可通过分子标记技术辅助筛选。4.3分子标记技术的应用标准指出,分子标记技术可作为DUS测试的辅助手段,用于近似品种筛选、一致性辅助判定和特异性辅助验证。但分子标记检测结果不能替代田间形态性状观测,最终判定仍以形态性状的田间观测数据为主要依据。5标准实施的意义5.1对品种权审查的支撑作用本标准的发布填补了我国连翘DUS测试技术标准的空白。在标准发布前,连翘品种权审查缺乏统一的测试依据,不同测试机构之间在性状选取、观测方法和判定标准上存在较大差异,影响了审查结论的一致性和公正性。标准的实施将建立全国统一的连翘DUS测试技术平台,为品种权审查机构提供明确的技术依据和操作规范,有利于提高品种权审查质量与效率,缩短审查周期。5.2对育种创新的引导作用标准通过对连翘性状的系统梳理和代码化表达,为育种者提供了品种描述的统一语言。这不仅有利于育种者规范品种选育目标和性状记录方法,提高育种工作的科学性和效率,也有利于优良品种的推广和市场识别。同时,标准中引入的品种分组技术为育种者明确了不同品种类型间的差异性定位,有助于引导育种创新向多元化方向发展。5.3对产业发展的促进作用连翘作为大宗中药材和重要的园林观赏植物,其产业健康发展有赖于良种的选育与推广。本标准的实施将有效保护育种者的合法权益,激发社会资本投入连翘品种选育的积极性,推动优良品种的推广应用,促进连翘种植业的品种优化和结构调整。同时,统一的DUS测试标准也有利于连翘种苗市场的规范化管理,减少同物异名和同名异物现象,维护市场秩序和种植者利益。5.4对国际合作与品种保护的推动UPOV公约框架下,各成员国之间可以相互承认测试报告。本标准的编制充分考虑了与UPOV测试指南的兼容性,在性状选择、代码设置和判定规则等方面尽量采用UPOV推荐的做法,为未来连翘品种测试报告的国际互认奠定了基础。6标准编制单位与主要起草单位概况本标准由全国植物新品种测试标准化技术委员会(SAC/TC279)归口管理,由农业农村部科技发展中心提出并组织起草。主要起草单位包括:中国农业科学院果树研究所、山西农业大学(山西省农业科学院)果树研究所、河北省林业和草原科学研究院等。中国农业科学院果树研究所(以下简称“果树所”)作为本标准的牵头起草单位,在标准的研制过程中发挥了核心作用。果树所成立于1958年,坐落于辽宁省兴城市,是我国唯一的国家级果树专业科研机构,隶属中国农业科学院。研究所主要从事果树种质资源收集保存与评价、新品种选育、栽培技术、病虫害防控等方面的基础研究与应用研究,拥有国家果树种质资源圃、国家农业科技创新与集成示范基地等国家级科研平台。果树所设有专门的DUS测试实验室,具备完善的田间测试设施和分子生物学检测条件,长期承担农业农村部植物新品种测试任务,已累计完成各类果树及木本植物DUS测试项目200余项,积累了丰富的木本植物DUS测试经验。此外,山西农业大学(山西省农业科学院)果树研究所和河北省林业和草原科学研究院在标准研制过程中也发挥了重要作用,分别在连翘种质资源收集、区域适应性试验和性状数据采集等方面做出了积极贡献。7结论与展望当前,我国植物新品种保护制度正在不断完善,DUS测试标准体系逐步覆盖更多植物属种。连翘标准的发布不仅是连翘属植物品种保护工作的重要里程碑,也为其他木本药用植物(如金银花、枸杞、酸枣等)DUS测试标准的研制提供了有益参考和技术借鉴。参考文献[1]全国人民代表大会常务委员会.中华人民共和国种子法[Z].2021.[2]国务院.中华人民共和国植物新品种保护条例[Z].2014修订.[3]国际植物新品种保护联盟(UPOV).测试指南总则(TG/1/3)[S].2002.[4]农业农村部.植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南总则:NY/T2236-2012[S].北京:中国农业出版社,2012.[5]国际植物新品种保护联盟(UPOV).TGP/7:测试指南的研制[S].2008.[6]国家标准化管理委员会.标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则:GB/T1.1—2020[S].北京:中国标准出版社,2020.[7]中国药典委员会.中华人民共和国
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