《天然药物化学》课件-黄连中提取分离小檗碱

实训项目黄连中小檗碱的提取、精制与检识第一部分

提取（一）实验准备1、试药（每组用量）：黄连饮片35g，0.3%硫酸溶液，饱和石灰水，脱脂棉花，95%乙醇溶液，浓盐酸、食盐，0.5%盐酸小檗碱乙醇溶液对照品（实验老师准备）2、学生仪器（每组用量）：500ml烧杯1个，50ml烧杯1个，10ml量筒1个，玻璃漏斗、玻璃棒1根，脱脂棉一块（8cm*8cm，厚0.5cm），磁力搅拌器,玻璃皿3、公共仪器：

滴管3只，500ml烧杯1个，200ml量筒1个（二）实验内容1、提取流程如下黄连饮片35g0.3%硫酸溶液350ml，加热微沸10分钟，棉花滤过（保留棉花）0.3%硫酸溶液200ml，加热微沸10分钟，棉花滤过滤渣（第二次提取）滤液滤渣（弃去垃圾桶）滤液合并两次滤液用石灰乳调pH11-12，放置5分钟，棉花滤过滤液浓盐酸调PH2-3（量体积）加入8%（W/V）食盐，搅拌均匀，常温静置24h（二）实验内容2、结果记录溶液颜色澄清度贴上瓶签第一部分

提取提取液颜色澄清度体积第二部分

分离和精制（一）实验准备1、试药（每组用量）：纯化水、浓盐酸、2、学生仪器（每组用量）：50ml烧杯1个，500ml烧杯1个、玻璃棒1根，滤纸1张3、公共仪器：真空抽滤泵、50ml量筒1个，滴管1只，50ml烧杯1个

（二）实验内容1、抽滤：用真空抽滤泵抽滤，沉淀用纯水洗至中性，得盐酸小檗碱粗品。（80度下干燥20min）第二部分

分离和精制滤纸准备（称量滤纸重量）纯水准备（共用）抽滤泵的使用产率计算3、精制流程图第二部分

分离和精制第二部分

分离和精制精品产率=精品重量/药材的重量X100%下次实验再做！！！思考：下图那个品质较好？1、精制：将上述溶液抽滤，晶体用纯化水洗至中性，继续抽干，于80℃以下干燥半小时，即得精制盐酸小檗碱，称重，计算产率。（精品重量/药材的重量*100%）

精品产率计算S=精品重量/药材的重量X100%结果判定

产品重量（0.0000g）性状盐酸小檗碱精品颜色、性状、味道产率（0.00%）精品产率计算S=精品重量/药材的重量X100%2、检识（1）化学检识（2）薄层检识第三部分

检识第三部分

检识（1）化学检识：

实验准备1、试药（每组用量）：纯化水、氢氧化钠试液2滴、丙酮溶液4滴，浓硫酸，95%乙醇，5%没食子酸乙醇溶液、漂白粉2、学生仪器（每组用量）：表面皿2个、试管1支、自制薄层板1块、层析缸3、公共仪器：电子天平、水浴锅（保温100度）、500ml烧杯、滴管4支、50ml量筒3个

第一份供试液制备：取盐酸小檗碱少许置于试管（大）中，加入稀硫酸8ml，加入少许漂白粉，即显樱红色。第三部分

检识第二份供试液制备：取盐酸小檗碱少许（约0.2g），加入10ml纯化水，水浴加热溶解，制得

1）丙酮小檗碱试验：

2）没食子酸-浓硫酸试验法：第三部分

检识1）丙酮小檗碱试验：取适量供试液（2ml）于试管中，加氢氧化钠4滴，显橙色，放冷，加入丙酮8滴，出现浑浊（黄色丙酮小檗碱结晶）。第三部分

检识2）没食子酸-浓硫酸试验法：取适量供试液置于蒸发皿中，加入5%没食子酸乙醇溶液2-3滴，蒸干，趁热沿壁加入浓硫酸数滴，仔细观察颜色变化。（显翠绿色/翡翠绿）记录第三部分

检识（1）化学检识结果判定试剂丙酮小檗碱试验没食子酸-浓硫酸试验法颜色、沉淀第三部分

检识样品制备：

0.5%盐酸小檗碱乙醇溶液1ml制备方法：精密称取盐酸小檗碱0.0050g，置于表面皿中，滴加无水乙醇20滴，使之溶解既得。第三部分

检识对照品制备：0.5%盐酸小檗碱乙醇溶液50ml（实验老师准备）（2）薄层检识

1）供试液与对照品溶液制备①层析缸展开剂饱和：甲醇-丙酮-乙酸（4:5:1），用量筒分别量取甲醇8ml，丙酮10ml，乙酸2ml，倒入层析缸中混合，加盖，预先饱和20min（应随时封盖，不要让溶剂挥发到空气中）②点样：用毛细管吸取样品溶液和对照品溶液，分别点在硅胶薄层板上，重复点样3-5次。（再次强调点样注意事项）③展开：将薄层板放于层析缸中，展开完毕，观察荧光斑点，并计算Rf值。第三部分

检识

2）展开剂（2）薄层检识

3）比移值的计算第三部分

检识对供d2d1Rf对=d对1d2Rf供=d2d供1注意：1）原点距离下边缘2cm，左右边缘1.52）原点直径不超过0.5cm3）两个原点之间的距离1.5cm斑点原点溶剂前沿（2）薄层检识

4）结果判定试液比移值斑点形状、颜色对照品供试品画图第三部分

检识4）结果判定第三部分

检识（二）实验内容3、湿法制备薄层板

第三部分

检识1）制薄层层析液：取0.3%羧甲基纤维素钠8ml于50ml烧杯中，称取3g硅胶G粉，少量多次撒入羧甲基纤维素钠溶液中，边加边加搅拌（不能剧烈搅拌，以免产生大量气泡）（二）实验内容3、湿法制备薄层板

第三部分

检识2）铺板：将上述溶液倾倒于玻璃板上，通过晃动玻璃板，使