病原生物学与免疫学 第二十一章

第二十一章疱疹病毒第二十一章疱疹病毒疱疹病毒（herpesvirus）是一群中等大小、有包膜的DNA病毒。现已发现100多种，其中能引起人类疾病的疱疹病毒称为人疱疹病毒（humanherpesvirus，HHV），主要有单纯疱疹病毒-1型、单纯疱疹病毒-2型、水痘—带状疱疹病毒、EB病毒、人巨细胞病毒，亦分别称为HHV-1、HHV-2、HHV-3、HHV-4和HHV-5型。另外，还有HHV-6、HHV-7、HHV-8型。第二十一章疱疹病毒疱疹病毒的共同特点包括：①病毒呈球形，核心为双链线型DNA，衣壳呈二十面体立体对称，外有包膜，包膜上有由糖蛋白组成的刺突；有包膜的成熟病毒体直径为150～300nm。第二十一章疱疹病毒②除EBV、HHV-8外，其他人疱疹病毒均能在人二倍体细胞核内复制并产生明显的细胞病变，感染细胞核内有嗜酸性包涵体，且感染细胞可与邻近未感染的细胞融合，形成多核巨细胞。③病毒可通过呼吸道、消化道、泌尿生殖道、胎盘等多种途径侵入机体，可引起增殖性感染、潜伏感染、整合感染及先天性感染等。第一节单纯疱疹病毒第一节单纯疱疹病毒概述单纯疱疹病毒（herpessimplexvirus，HSV）是疱疹病毒的典型代表，由于急性期发生水疱性皮疹即单纯疱疹而得名。第一节单纯疱疹病毒一、生物学性状.HSV有HSV-1和HSV-2两个血清型，两者DNA有50%的同源性。HSV包膜表面的gD糖蛋白诱导产生中和抗体的能力强，可用于研究亚单位疫苗。第一节单纯疱疹病毒一、生物学性状.HSV感染动物宿主的范围较广，常用实验动物为家兔、豚鼠及小鼠等。HSV在多种细胞中能增殖，常用原代兔肾、人胚肾、人胚肺及地鼠肾等传代细胞分离培养病毒。HSV抵抗力弱，对脂溶剂等多种消毒剂敏感。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性HSV的感染十分普遍，患者和健康携带者是该病的传染源。病毒存在于疱疹病灶或健康带毒者的唾液中，主要通过直接密切接触和性接触传播，也可垂直感染胎儿或新生儿。感染后症状不明显，常见为皮肤、黏膜的局限性疱疹，偶见全身或致死性感染。单纯疱疹病毒感染通常分为原发感染、潜伏与复发感染和先天性及新生儿感染。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性（一）原发感染HSV-1的原发感染多见于6个月以后的婴儿，最常引起的疾病是龈口炎，表现为牙龈、咽颊部的黏膜上产生成群的疱疹，疱疹破裂后形成溃疡，病灶内含有大量病毒。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性（一）原发感染此外，还可引起疱疹性角膜结膜炎、疱疹性脑炎等；HSV-2的原发感染多发生于性生活后，主要引起生殖器疱疹。另据研究发现，HSV-2感染还与宫颈癌的发生有密切关系。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性（二）潜伏与复发感染HSV原发感染后，机体产生特异性免疫以清除病毒，未被清除的少数HSV常在感觉神经节中长期潜伏。通常，HSV-1潜伏在三叉神经节及颈上神经节，HSV-2潜伏在骶神经节。潜伏状态下，只有很少的病毒基因表达。当机体受到多种因素（如发热、创伤、情绪紧张、细菌或病毒感染及使用糖皮质激素等）影响后，潜伏的病毒被激活，病毒沿感觉神经纤维轴索下行至神经末梢，感染上皮细胞，表现为同一部位的复发性疱疹。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性（三）先天性及新生儿感染妊娠妇女感染HSV-1，病毒可经胎盘感染胎儿，影响胚胎的有丝分裂，造成流产、死胎或先天性畸形。HSV-2在分娩时可通过产道感染新生儿，发生新生儿疱疹。第一节单纯疱疹病毒二、致病性与免疫性（三）先天性及新生儿感染HSV原发感染1周左右，血中出现中和抗体，3～4周达到高峰并可持续多年。HSV包膜糖蛋白的中和抗体对宿主具有重要的保护作用，可以中和游离病毒，阻止病毒在体内播散，但不能清除潜伏在神经细胞内的病毒，也不能阻止复发。约70%～90%的成年人有HSV-1抗体，HSV-2的抗体阳性率随性成熟而逐渐升高。特异性细胞免疫可以破坏已受病毒感染的细胞，并清除病毒，但不能清除神经节内的潜伏病毒。第一节单纯疱疹病毒三、微生物学检查HSV较易分离培养。可采集皮肤、生殖器等病变部位的水疱液、脑脊液、角膜刮取物、唾液、阴道拭子等标本，接种于兔肾、人胚肾等易感传代细胞株。根据细胞病变特征，进行初步判断；然后用单克隆抗体进行免疫荧光鉴定或应用DNA限制性内切酶图谱分析来定型。（一）病毒分离与鉴定第一节单纯疱疹病毒三、微生物学检查取病变部位标本，采用免疫荧光或酶联免疫吸附试验检测病毒抗原，或用PCR、原位杂交法检测病毒核酸等可快速诊断。（二）快速诊断第一节单纯疱疹病毒四、防治原则.目前，对疱疹病毒的感染尚无特异性预防措施。避免接触患者可减少感染机会。孕妇产道有HSV-2感染时，可行剖宫产或给新生儿注射丙种球蛋白做紧急预防。碘苷、阿糖腺苷等对疱疹性角膜炎有较好的疗效；阿昔洛韦对HSV有抑制作用，对生殖器疱疹、疱疹性脑炎、复发性疱疹有较好的疗效，但不能防止潜伏感染的再发。第二节水痘—带状疱疹

病毒第二节水痘—带状疱疹病毒概述水痘—带状疱疹病毒（varicella-zostervirus，VZV）在儿童初次感染时引起水痘，恢复后病毒可潜伏在体内，少数人在青春期或成年后复发表现为带状疱疹，故被称为水痘—带状疱疹病毒。第二节水痘—带状疱疹病毒一、生物学性状.VZV只有一个血清型，基本特性与HSV相似。VZV只在人及猴的成纤维细胞中缓慢增殖，产生核内嗜酸性包涵体和多核巨细胞，人是唯一的自然宿主。第二节水痘—带状疱疹病毒二、致病性与免疫性.VZV的传染源为水痘患者，主要经呼吸道传播，多在冬春季流行，皮肤是病毒的主要靶器官。无免疫力的儿童初次感染后，经2周左右的潜伏期，出现全身皮肤斑丘疹、水疱，皮疹呈向心性分布，躯干比面部和四肢多，并可继发感染，发展成脓疱疹。第二节水痘—带状疱疹病毒二、致病性与免疫性.儿童水痘病情较轻，偶见脑炎和肺炎等并发症。新生儿及细胞免疫缺陷者、白血病患者、长期使用免疫抑制剂的儿童可表现为重症，甚至危及生命。成人水痘症状较重，常并发肺炎，死亡率较高。孕妇患水痘，除病情严重外，还可导致胎儿畸形、流产或死产。第二节水痘—带状疱疹病毒二、致病性与免疫性.带状疱疹仅发生于有水痘病史的人，成人、老年人、免疫缺陷者及应用免疫抑制剂的患者多发。患过水痘的儿童，少量未被清除的病毒潜伏于脊髓后根神经节或颅神经的感觉神经节中。第二节水痘—带状疱疹病毒二、致病性与免疫性.成年后，当机体受到外伤、发热、放射治疗、脏器移植及患白血病等有害因素刺激或细胞免疫功能下降时，潜伏在神经节内的病毒被激活，活化的病毒经感觉神经纤维轴突下行至所支配的皮肤区，在细胞内增殖后引起带状疱疹。由于疱疹沿感觉神经支配的皮肤分布，串联成带状，故称带状疱疹。第二节水痘—带状疱疹病毒二、致病性与免疫性.儿童患水痘后，机体可建立持久的免疫力，极少出现再感染，但对潜伏于神经节中的病毒不能清除，因而不能阻止病毒被激活而引起带状疱疹。第二节水痘—带状疱疹病毒三、微生物学检查微生物学检查临床症状典型的水痘或带状疱疹，一般不需要实验室诊断。必要时可检测疱疹基底部材料涂片和活检组织切片中的嗜酸性包涵体，亦可用单克隆抗体免疫荧光法检查VZV抗原，有助于快速诊断。第二节水痘—带状疱疹病毒四、防治原则防治原则应用VZV减毒活疫苗对1岁以上未患过水痘的儿童和成人接种，可以有效地预防水痘的感染和流行。应用水痘—带状疱疹特异抗血清或人免疫球蛋白预防VZV感染有一定效果。临床可用阿糖腺苷、阿昔洛韦等核苷类似物及大剂量干扰素进行治疗。第三节EB病毒第三节EB病毒概述EB病毒（Epstein-Barrvirus，EBV）是引起传染性单核细胞增多症和某些淋巴细胞增生性疾病的病原体，是1964年由Epstein和Barr在研究非洲儿童恶性淋巴瘤的病因时，从瘤细胞培养中发现的一种新的病毒，并命名为EB病毒。第三节EB病毒一、生物学性状.EB病毒的形态结构与其他疱疹病毒相似。一般用人脐带血淋巴细胞或外周血分离的淋巴细胞培养EBV。EBV抗原可分为两类：①病毒潜伏感染时表达的EBV抗原：包括EBV核抗原（EBNA）和潜伏感染膜蛋白（LMP）。②病毒增殖性感染相关的抗原：包括EBV早期抗原（EA）和EBV晚期抗原（LA），其中LA又包括病毒的衣壳抗原（VCA）和病毒的膜抗原（MA）。第三节EB病毒二、致病性与免疫性.EBV在人群中的感染非常普遍，我国3～5岁儿童EBV相关抗体阳性率达90%以上，多为隐性感染。EBV的传染源为EBV携带者和患者。病毒首先侵入口咽部，在黏膜上皮细胞内形成增殖性感染，然后感染淋巴细胞，进入血液循环造成全身性感染。与EBV感染有关的疾病有以下三种。第三节EB病毒二、致病性与免疫性传染性单核细胞增多症是一种急性全身淋巴细胞增生性疾病，为青春期初次感染大量EBV后发病，潜伏期为30～50天。典型表现为持续发热、头痛、咽喉痛、淋巴结和脾肿大，部分患者伴有肝大、黄疸、皮疹等，外周血单核细胞和异型淋巴细胞显著增多。（一）传染性单核细胞增多症第三节EB病毒二、致病性与免疫性非洲儿童恶性淋巴瘤又称伯基特淋巴瘤，多见于非洲中部、新几内亚、南美洲某些热带雨林地区的6岁左右儿童，好发部位为颜面、腭部。若侵袭脊髓或血管受损，可导致下肢瘫痪。（二）非洲儿童恶性淋巴瘤第三节EB病毒二、致病性与免疫性鼻咽癌是我国广东、广西、福建、湖南等地的一种常见肿瘤，多发生于40岁以上的中老年人。EBV与鼻咽癌的关系十分密切，表现在：①鼻咽癌活检组织中可查出EBV的DNA和EBNA。②鼻咽癌患者血清中EBV相关抗原如EA、VCA、MA和EBNA等的抗体效价高于正常人。采用EBV的VCA-IgA型抗体检测，是早期诊断鼻咽癌的重要指标。（三）鼻咽癌第三节EB病毒三、微生物学检查微生物学检查实验室检查多用免疫酶染色法或免疫荧光法检测抗体。其中异嗜性抗体检测主要用于传染性单核细胞增多症的辅助诊断；对鼻咽癌的诊断，可检测VCA-IgA或EA-IgA，抗体效价为（1∶5）～（1∶10）或持续上升者，有辅助诊断意义。第三节EB病毒四、防治原则防治原则目前，EBV疫苗尚在研制和试用中，应尽量避免与患者接触，养成良好的卫生习惯。对鼻咽癌高发地区进行血清学检查，对特异性抗体阳性者进行定期跟踪检查，以便早发现、早治疗。阿昔洛韦的临床应用显示，在用药期间，能减少EBV从咽部排毒，但不能改善传染性单核细胞增多症的症状，对免疫缺陷患者中的EBV淋巴瘤治疗也无效。第四节巨细胞病毒第四节巨细胞病毒概述巨细胞病毒（cytomegalovirus，CMV）是巨细胞包涵体病的病原体，被感染的细胞肿大，并有巨大的核内包涵体，故而命名。第四节巨细胞病毒一、生物学特性.CMV具有典型的疱疹病毒的形态和基因结构，与HSV极为相似，但感染宿主和细胞范围均狭窄，且种属特异性高。CMV体外培养只能在人二倍体成纤维细胞中复制，病毒增殖速度缓慢，复制周期长。初次分离一般需2～6周才出现典型的病变，其特点是细胞变圆、肿胀、核变大、形成多核巨细胞，核内出现周围绕有晕轮的大型嗜酸性包涵体，如猫头鹰眼状。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性.人群中CMV感染极为普遍，成人的抗体阳性率达60%～90%。初次感染多在2岁以下，多呈隐性或潜伏感染。病毒在唾液腺、乳腺、肾脏、白细胞及其他腺体等部位潜伏，可长期或间歇地从唾液、乳汁、精液、尿、宫颈和阴道分泌物中排出，可通过口腔、胎盘、产道、哺乳、输血和器官移植等多种途径进行传播。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性（一）先天性感染孕妇感染CMV发生原发感染或复发感染时，病毒通过胎盘感染胎儿，引起宫内感染，初生婴儿表现为黄疸、肝脾大、血小板减少性紫癜、溶血性贫血及不同程度的神经系统损害，包括小脑畸形、智力低下、耳聋、脉络膜视网膜炎、视神经萎缩等，重者可导致早产、流产、死产或出生后死亡。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性（二）新生儿感染CMV可从泌尿道和宫颈排出，分娩时新生儿可经产道感染，出生后可经哺乳感染。一般无临床症状，少数表现为轻度呼吸困难、肝功能轻度损害；通常全身症状轻，无神经损伤。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性（三）免疫功能低下者的感染器官移植、放化疗、AIDS、肿瘤或长期使用免疫抑制剂的患者，由于免疫力低下，易激活体内潜伏状态的CMV，造成播散性感染，如严重肺炎、肝炎、视网膜炎、脑膜炎等，并可导致死亡。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性（四）输血感染输入含有大量CMV的新鲜血液，可发生输血后单核细胞增生样综合征、肝炎及潜伏感染。这种感染与EBV引起的传染性单核细胞增多症不同，患者血清中无异嗜性抗体及EA抗体。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性（五）细胞转化与致癌的潜能CMV和其他疱疹病毒一样，能使细胞转化，具有潜在的致癌作用。CMV的隐性感染率较高，其DNA可整合于宿主细胞染色体，与恶性肿瘤的发生有关。CMV可能与宫颈癌、结肠癌、前列腺癌、Kaposi肉瘤有关。第四节巨细胞病毒二、致病性与免疫性.人感染CMV后，能产生多种抗体，但都不能有效地防御CMV感染。细胞免疫在抗CMV感染中起着重要作用，但同时CMV对细胞免疫有抑制作用。第四节巨细胞病毒三、微生物学检查微生物学检查取患者尿液、唾液、阴道分泌物、肝活检组织、支气管肺泡灌洗液、白细胞等接种于人二倍体成纤维细胞中，观察细胞病变及染色后的巨大细胞和典型包涵体。还可用血清学方法检查CMV-IgM抗体，或用核酸杂交法和PCR方法检查病毒的核酸，快速、敏感、准确，可辅助诊断CMV的近期感染。第四节巨细胞病毒四、防治原则防治原则目前尚无有效的CMV疫苗，不含核酸的亚单位疫苗及基因工程疫苗正在研制中。在输血或器官移植时，应避免CMV传播；孕妇应避免接触CMV感染者；婴儿室发生患儿感染时，应及时隔离以防交叉感染。丙氧鸟苷是目前临床上认为有效的抗人巨细胞病毒药物；磷甲酸能有效减轻免疫功能低下患者CMV感染的临床症状。本章小结本章小结疱疹病毒是一群中等大小、有包膜的DNA病毒，其中能引起人类疾病的疱疹病毒称为人疱疹病毒，主要有单纯疱疹病毒-1型、单纯疱疹病毒-2型、水痘—带状疱