GBT 38403.2-2024 皮革和毛皮 防霉剂的测定 第2部分：液相色谱法（人工汗液萃取）标准立项发展报告

皮革和毛皮防霉剂的测定第2部分：液相色谱法（人工汗液萃取）标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:DeterminationofAntifungalAgentsinLeatherandFur—Part2:LiquidChromatographyMethod(ExtractionwithArtificialPerspiration)摘要关键词：皮革；毛皮；防霉剂；液相色谱法；人工汗液萃取；标准Keywords:Leather;Fur;AntifungalAgents;LiquidChromatography;ArtificialPerspirationExtraction;Standardization1引言1.1研究背景皮革和毛皮制品作为我国传统优势出口产品，在国民经济中占据重要地位。据中国皮革协会统计，我国年产皮革（折合牛皮）约6,500万张，毛皮服装及制品产量居世界首位，皮革及其制品年出口额超过800亿美元。然而，皮革和毛皮产品富含蛋白质和脂肪等营养物质，在加工、贮存、运输及使用过程中极易受到霉菌、细菌等微生物的侵袭而发生霉变，导致产品表面出现色斑、发脆、强度下降等质量问题，严重影响产品的外观品质和使用寿命。为防止霉变，皮革和毛皮加工过程中通常添加各类防霉剂。目前行业内广泛使用的防霉剂包括：2-巯基苯并噻唑（MBT）、2-(硫氰基甲基硫代)苯并噻唑（TCMTB）、4-氯-3-甲基苯酚（PCMC）、邻苯基苯酚（OPP）、对氯间二甲酚（PCMX）、3-碘-2-丙炔基氨基甲酸丁酯（IPBC）等。这些防霉剂在有效抑制微生物生长的同时，部分品种存在一定的生态毒性和人体健康风险。欧盟REACH法规、美国联邦法规等均对皮革制品中防霉剂的种类及限量提出了严格要求。我国GB20400-2006《皮革和毛皮有害物质限量》虽对部分防霉剂提出了限量要求，但相应的配套检测方法标准长期滞后，制约了标准的有效实施。1.2国内外标准现状在国际标准层面，ISO13365-1:2020《皮革防霉剂含量的测定第1部分：液相色谱法》和ISO13365-2:2020《皮革防霉剂含量的测定第2部分：人工汗液萃取法》分别规定了皮革中防霉剂的高效液相色谱测定方法和人工汗液萃取方法，为国际贸易中皮革防霉剂的检测提供了统一的技术依据。欧盟标准EN16777、美国材料与试验协会标准ASTMD4576等也从不同角度涉及皮革防霉剂的检测与评价。在国内标准层面，原国家标准GB/T38403-2019《皮革和毛皮化学试验防霉剂的测定》初步建立了皮革和毛皮中防霉剂的液相色谱检测方法，但未区分不同模拟使用场景的萃取条件，对于模拟人体汗液接触条件下的防霉剂释放行为缺乏针对性的方法学支持。随着我国皮革制品进出口贸易规模的持续扩大，以及消费者对产品安全性能要求的不断提高，建立与国际标准接轨的、基于人工汗液萃取条件的防霉剂测定方法标准已成为行业的迫切需求。1.3立项必要性本标准的制定具有多重必要性：第一，从产业需求角度，皮革和毛皮制品在穿着使用过程中会接触人体汗液，汗液中的盐分、酸性物质及酶类成分可能促进防霉剂从皮革基体向人体皮肤的迁移，通过建立人工汗液萃取条件下的检测方法，可更真实地评估产品在实际使用场景中防霉剂的释放风险。第二，从标准体系完善角度，GB/T38403.2-2024作为GB/T38403系列标准的组成部分，补充和完善了基于不同萃取条件的检测方法体系，与第1部分（直接萃取法）形成技术互补。第三，从国际贸易角度，该标准在技术内容上与ISO13365-2:2020保持高度一致性，有助于消除技术性贸易壁垒，促进我国皮革产品的国际贸易。2标准编制原则与依据2.1编制原则本标准的编制严格遵循以下原则：（1）科学性标准编制过程中充分调研了国内外相关技术文献和标准资料，系统分析了各类防霉剂的理化性质、色谱行为及人工汗液中的稳定性特征。方法学研究遵循分析化学方法验证的基本原则，对选择性、线性范围、检出限、定量限、精密度、准确度等关键技术参数进行了系统验证，确保方法的科学严谨。（2）适用性标准编制充分考虑我国皮革和毛皮行业的技术水平、实验室设备条件和检测人员的技术能力，在保证方法性能满足检测需求的前提下，尽量采用通用型仪器设备和分析条件，降低标准实施的设备门槛。同时，方法设计兼顾不同类型的皮革和毛皮基体，确保广泛的适用性。（3）协调性标准技术内容与GB/T38403.1（直接萃取法测定）保持方法学上的衔接与协调，与GB/T19941（皮革和毛皮化学试验甲醛含量的测定）等系列标准的技术框架保持一致。同时，积极参考ISO13365-2:2020等国际标准的技术要求，推动我国标准与国际标准接轨。（4）规范性标准编写严格遵循GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定，确保标准结构的规范性、技术要素的完整性和表述的准确性。2.2编制依据本标准编制的主要依据包括：-GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》-GB/T20001.4-2015《标准编写规则第4部分：试验方法标准》-GB20400-2006《皮革和毛皮有害物质限量》-ISO13365-1:2020《Leather—Determinationofthecontentofantifungalagents—Part1:Liquidchromatography》-ISO13365-2:2020《Leather—Determinationofthecontentofantifungalagents—Part2:Artificialperspirationextraction》-《全国皮革工业标准化技术委员会章程》及相关工作制度3标准主要技术内容3.1标准适用范围本标准规定了采用液相色谱法测定皮革和毛皮中防霉剂含量的人工汗液萃取方法，适用于各类皮革、毛皮及其制品中2-巯基苯并噻唑（MBT）、2-(硫氰基甲基硫代)苯并噻唑（TCMTB）、4-氯-3-甲基苯酚（PCMC）、邻苯基苯酚（OPP）、对氯间二甲酚（PCMX）、3-碘-2-丙炔基氨基甲酸丁酯（IPBC）等常见防霉剂的测定，也适用于经人工汗液萃取后液相色谱可分离检测的其他防霉剂的测定。3.2方法原理本标准的方法原理为：将皮革或毛皮试样裁剪至规定尺寸后，置于人工汗液溶液中，在模拟人体汗液接触的条件下进行恒温振荡萃取，使试样中的防霉剂释放并转移至人工汗液萃取液中。萃取液经滤膜过滤净化后，采用高效液相色谱仪（HPLC）配备紫外检测器（UV）或二极管阵列检测器（DAD）进行分离和定量测定，以保留时间定性、外标法定量。3.3人工汗液配方与配制人工汗液的配制是本标准的核心技术环节之一。标准规定的人工汗液配方包含以下组分：L-组氨酸盐酸盐一水合物、氯化钠、磷酸二氢钠二水合物等主要成分，用氢氧化钠溶液调节pH值至5.5±0.1（模拟酸性汗液条件）。该配方参考了ISO105-E04等国际标准中人工汗液的配制方法，并针对皮革和毛皮基材的特性进行了优化，确保在萃取效率和模拟真实性之间取得平衡。3.4样品前处理样品前处理是本标准的关键技术步骤。标准规定了试样的取样位置、尺寸规格（一般为10mm×10mm的方块或等效尺寸）、质量要求（精确至0.01g）以及平行试验的数量。萃取条件主要包括：人工汗液用量（按试样质量与汗液体积的特定比例）、萃取温度（37℃±2℃，模拟人体皮肤温度）、萃取时间（设定为2小时，参考ISO13365-2的技术参数），萃取方式采用恒温振荡。3.5液相色谱条件标准推荐的液相色谱条件为：C18反相色谱柱（如250mm×4.6mm，粒径5μm）或等效色谱柱；流动相采用乙腈-磷酸盐缓冲液体系进行梯度洗脱，通过优化梯度程序实现各防霉剂组分的有效分离；检测波长为230nm（根据不同防霉剂的最大吸收波长可进行调整）；柱温为30℃-40℃；流速为1.0mL/min；进样量为20μL。标准对色谱系统适用性提出了明确要求，包括理论塔板数、分离度、拖尾因子等系统适用性参数。3.6方法性能指标经过多家实验室的协同验证试验，本标准规定的方法性能指标如下：-线性范围：各防霉剂组分在0.5mg/L~100mg/L（或等效浓度范围）内线性关系良好，相关系数不低于0.995；-检出限（LOD）：各组分检出限为0.05mg/kg~0.5mg/kg（因组分而异）；-定量限（LOQ）：各组分定量限为0.2mg/kg~2.0mg/kg（因组分而异）；-精密度：在重复性条件下，各组分测定结果的相对标准偏差（RSD）不大于10%；再现性条件下相对标准偏差不大于15%；-回收率：在加标浓度为0.5mg/kg~50mg/kg范围内，各组分平均回收率为80%~110%。4标准编制过程4.1起草阶段2021年3月，全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）向国家标准化管理委员会提出本标准立项申请，并提交标准草案和立项建议书。2021年7月，国家标准化管理委员会下达标准制修订计划项目，批准本标准立项。项目立项后，牵头单位迅速组建了由科研院所、检测机构、生产企业等多方代表参加的标准起草工作组。工作组在对国内外相关标准和文献进行深入调研的基础上，于2021年10月形成标准草案第一稿，并召开了首次工作组会议，对标准技术方案进行讨论和论证。4.2试验验证与征求意见2022年1月至2022年6月，组织开展了实验室间协同验证试验。参与验证的实验室包括国家级质检中心、省级质检院、科研院所等共8家实验室。在为期6个月的验证试验中，各实验室使用统一的质控样品和盲样，按照标准草案规定的方法进行测定，提交了完整的验证数据。对验证数据进行统计分析后，确认方法各项性能指标满足检测要求。2022年9月，形成标准征求意见稿，并面向全社会广泛征求意见。征求意见范围涵盖皮革行业协会、生产企业、检测机构、科研院所等各类相关方。截至征求意见截止日期，共收到反馈意见87条，其中采纳或部分采纳72条，对标准技术内容进行了进一步修改完善。4.3标准审查与报批2023年6月，全国皮革工业标准化技术委员会组织召开标准审定会，与会专家对标准送审稿进行了逐章逐条的认真审查和充分讨论，一致同意通过审查，并提出部分修改意见。工作组根据审定意见对标准文本进行了最终修改完善，形成标准报批稿。2023年8月，按程序向国家标准化管理委员会提交标准报批材料。4.4发布与实施2024年3月15日，国家市场监督管理总局（国家标准化管理委员会）正式批准发布GB/T38403.2-2024《皮革和毛皮防霉剂的测定第2部分：液相色谱法（人工汗液萃取）》，自2024年10月1日起实施。5主要参与单位介绍5.1牵头单位概况本标准由中国皮革和制鞋工业研究院（现更名为：中国皮革制鞋研究院有限公司）牵头起草，该单位在皮革和毛皮检测技术标准化方面具有深厚的技术积累和丰富的工作经验。5.2单位资质与技术能力中国皮革制鞋研究院有限公司（以下简称"研究院"）成立于1959年，是中国皮革和制鞋行业唯一的国家级综合性科研机构，长期承担全国皮革工业标准化技术委员会（SAC/TC252）秘书处工作。研究院设有国家皮革制品质量检验检测中心、国家鞋类质量检验检测中心等国家级检测平台，拥有国际先进的液相色谱-质谱联用仪、气相色谱-质谱联用仪、电感耦合等离子体质谱仪等大型精密分析仪器设备，具备覆盖皮革和毛皮全产业链的化学检测能力。研究院拥有技术人员120余人，其中高级职称以上人员占比38%，博士和硕士学历人员占比45%，形成了一支结构合理、专业配套、技术过硬的研究与标准化人才队伍。近年来，研究院牵头或参与制修订国际标准、国家标准和行业标准150余项，在皮革和毛皮中有害物质检测、生态安全性评价等领域取得了多项具有国际影响力的研究成果。5.3在标准编制中的主要贡献研究院在本标准编制过程中承担了组织协调、技术研究、试验验证等核心工作。主要包括：组织完成标准前期预研工作，系统梳理国内外相关标准和文献；牵头开展人工汗液配方优化、萃取条件等关键技术试验研究；组织协调8家实验室完成协同验证试验；根据验证数据和反馈意见完成标准文本的多轮修改完善；组织标准技术内容的最终审定和报批工作。6标准实施的意义与影响6.1填补标准空白本标准的发布实施填补了我国皮革和毛皮领域基于人工汗液萃取条件下防霉剂测定方法标准的空白，完善了GB/T38403系列标准的技术体系。该标准与GB/T38403.1（直接萃取法）相辅相成，分别从总量分析和迁移量分析两个维度对皮革和毛皮中的防霉剂进行检测评价，为不同检测目的提供了针对性的技术手段。6.2支撑质量监管该标准为GB20400-2006《皮革和毛皮有害物质限量》等强制性国家标准中有关防霉剂限量要求的实施提供了关键的配套检测方法支撑。标准实施后，监管部门可将本标准作为皮革和毛皮产品质量监督抽查和风险监测的重要技术依据，有效提升对皮革产品中防霉剂残留的监管能力和水平，切实保障消费者健康安全。6.3促进国际贸易本标准在技术内容上与ISO13365-2:2020保持协调一致，有助于消除我国皮革产品出口贸易中的技术性壁垒。标准实施后，国内检测机构出具的检测数据可获得国际互认，降低企业重复检测成本，提升通关效率，对我国皮革产品开拓国际市场、提升国际竞争力具有积极的促进作用。6.4推动产业绿色发展本标准的实施将引导皮革和毛皮加工企业更加重视防霉剂的选用和使用量的控制，推动企业优化防霉剂配方，减少高风险防霉剂的使用，转向使用更加环保、安全的防霉替代产品。这有利于推动我国皮革行业绿色制造和可持续发展的进程，促进产业转型升级。7结论与展望GB/T38403.2-2024《皮革和毛皮防霉剂的测定第2部分：液相色谱法（人工汗液萃取）》国家标准的发布实施，是我国皮革和毛皮标准化工作的一项重要成果。该标准的制定历经标准预研、立项、起草、验证、审查、报批等多个阶段，历时近三年，汇聚了行业各方的智慧和力量。标准在技术内容上科学严谨、先进适用，在方法设计上兼顾了与国际标准接轨和国内实施条件的平衡。展望未来，随着消费者对皮革和毛皮产品安全性能要求的不断提高，以及国际上对化学物质管控要求的