实验诊断学之肝功能常用的实验室检查

肝功能常用的实验室检查肝脏的基本功能肝脏是人体最大的腺体器官，接受来自门静脉和肝动脉双重血液供应，产生的胆汁经胆管排入十二指肠。肝脏独特的组织结构决定了其重要的生理功能，不仅在糖，蛋白质，脂类，维生素和激素代谢方面与全身各组织器官密切相关，而且具有分泌，排泄和生物转化等重要功能。物质代谢是肝脏最重要的功能。糖、蛋白质、脂类三大物质代谢都在肝细胞中进行。包括肝糖原的合成和分解，糖异生，氨基酸的脱氨基和脱羧基；血浆中决大部分蛋白质的合成，非必需氨基酸的合成；脂肪酸的合成及氧化，酮体的合成，胆固醇的合成及代谢生成胆酸。此外还参与维生素的储存、运输、活化。2.肝脏对体内的非营养物质进行生物转化。

内源性如激素、神经递质和其他胺类等对机体有强烈生物学活性的物质，以及氨、胆红素等对机体有毒性的物质。

外源性物质如药物，肠道细菌产生的胺、酚、吲哚等也在肝脏中进行转化。肝细胞通过氧化、还原、水解、结合反应将它们降解，或使其溶解度增高，从胆汁或尿液排出体外。肝功能试验肝脏通过肝细胞众多酶系统和胆道系统来完成其强大的物质代谢、生物转化和分泌排泄功能。当肝细胞或胆道受到不同程度损伤时，物质代谢产物、生物转化的前体，分泌排泄物，以及肝细胞酶在血液中的含量就会出现相应的变化。通过实验室检测血液中相关物质浓度和成分，来了解肝脏某一方面的功能状态。一.反映蛋白质代谢功能绝大多数血浆蛋白由肝脏合成，如白蛋白，脂蛋白，凝血因子，转运蛋白等，当肝细胞受损时，这些蛋白质合成减少，其中白蛋白表现最明显；B细胞合成γ球蛋白相对增多，血浆蛋白组分发生改变。凝血因子合成减少，有出血倾向。尿素合成减少，血氨含量升高，氨中毒症状。1.血清总蛋白（STP）和白蛋白（A）球蛋白（G）

白球比值（A/G）1）血清总蛋白(STPserumtotalprotein)是血清中所含各种蛋白的总称，包括白蛋白和球蛋白，测定用双缩脲法。2）白蛋白(ALB

albulin)为血液中的主要蛋白质由肝脏合成，白蛋白主要维持血浆渗透压，代谢物质转运，供能作用，测定用溴甲酚绿法。总蛋白和白蛋白含量是反映肝功能的重要指标。3）球蛋白(GLOglobulin)为血清中总蛋白减去白蛋白以外的蛋白质(TP-A=G)，主要为免疫球蛋白和补体，与机体的免疫状态有关，4）A/G比值〉1，如〈1称白球比倒置。双缩脲法测定TP原理:两分子尿素加热脱氨缩合成为双缩脲与碱性铜溶液中铜离子形成紫红色化合物，称双缩脲反应，碱性铜溶液称双缩脲试剂。加热NH3↑+紫红色络合物一个双缩脲分子含2有个肽键，蛋白质分子中有许多肽键，因而可有双缩脲样反应。血清A测定

（BCG法：溴甲酚绿法）原理：

A具有与阴离子染料结合的性质，在PH4.2环境中带正电荷的白蛋白（PI4.7）与阴离子染料溴甲酚绿结合，由黄色变为蓝绿色。+PH4.2蓝绿色络合物参考值TP60-80g/L

A40-50g/L

G20-30g/LA/G1.5-2.5:1临床意义：肝脏具有较强的储备代偿功能，只有当肝细胞病变达到一定程度时才会出现血清蛋白的改变。急性或局灶性肝损伤时多正常，因此用于了解慢性肝损伤程度。除肝损伤外，其他系统疾病也会导致血清蛋白的成分变化。1.STP和A降低：⑴常见于肝脏疾病有亚急性重症肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，肝癌。STP<60g/L

或A<25g/L称低蛋白血症，常会出现水肿症状。⑵营养不良性如蛋白摄入不足或消化吸收不良。⑶蛋白丢失过多如肾病综合症，严重烧伤，急性大出血等。⑷消耗增加见于慢性消耗性疾病如结核病，甲亢，恶性肿瘤等。2.STP升高及G升高：当STP>80g/L或

G>35g/L时，称为高蛋白血症或高球蛋白血症。

⑴慢性肝脏疾病如自身免疫性肝炎，慢性活动性肝炎，酒精性肝炎，肝硬化等，晚期STP降低。⑵M球蛋白血症见于浆细胞病中的骨髓瘤，巨球蛋白血症，浆细胞白血病等。⑶自身免疫性疾病如SLE，类风湿关节炎等。⑷慢性炎症和感染如结核病，疟疾，血吸虫病等。3.G浓度降低见于应用免疫抑制剂，先天性低γ球蛋白血症。4.A/G降低或倒置A/G比值1.5-2.5:1，如〈1称白球比倒置。主要见于较严重的肝细胞损伤如肝硬化，肝癌等，也见于M蛋白血症如骨髓瘤。2.血清蛋白电泳原理和方法：在碱性条件下（PH8.6），血清蛋白质带负电荷，在电场中会由阴极向阳极移动。由于各种蛋白质分子量大小不等，所带负电荷量不等，因此在同一电场中移动的速度就不同，白蛋白分子量较小，负电荷相对较多，移动速度最快，球蛋白移动速度较慢，电泳后从阳极开始，依次为Α、α1-G、α2-G、β-G及γ-G五个区带，可以将血清蛋白不同组分分开。正常血清蛋白电泳示意图一般采用醋酸纤维素薄膜电泳，阴极点样，电泳结束后进行染色，常用丽春红，氨基黑。然后用光密度计扫描得到其相对含量曲线图。参考值：白蛋白：62-71%

1球蛋白：3-4%

2球蛋白：6-10%

球蛋白：7-11%

球蛋白：9-18%临床意义：形成特征性电泳图。1.肝脏疾病急性及轻症肝炎时电泳图谱多无异常，在慢性活动性肝炎，肝硬化，肝癌时，白蛋白减少，α1，α2，β球蛋白也有减少倾向，γ球蛋白合成增加。2.M蛋白血症见于骨髓瘤，巨球蛋白血症表现为白蛋白稍低，单克隆或多克隆γ球蛋白明显升高，形成M蛋白区带。3.肾病综合征，由于血脂升高，可见α2和β球蛋白增高，白蛋白和γ球蛋白降低。几种常见疾病的电泳示意图单克隆γ球蛋白血症多克隆γ球蛋白血症低γ球蛋白血症

球蛋白

LDL&VLDLC3C反应蛋白转铁蛋白

2球蛋白2巨球蛋白转甲视蛋白质III血浆铜蓝蛋白结合珠蛋白(为主要成分)3.血清前白蛋白测定（PA）PA(prealbulin)是一种载体蛋白，分子量比白蛋白小，由肝细胞合成，在精细电泳图谱上位于白蛋白前方看到一条染色很浅的区带。一般采用免疫比浊法测定。PA+相应的抗PA抗体复合物（形成一定浊度）临床意义：降低见于⑴营养不良，慢性感染和恶性肿瘤等消耗性疾病。⑵对肝炎，肝硬化，肝癌等的早期肝细胞损伤有一定的参考价值，比白蛋白能早期反映肝脏损害情况。4.血浆凝血因子测定体内绝大多数凝血因子由肝细胞合成，当肝细胞严重受损时，凝血因子合成减少，有出血倾向。凝血因子相关检测试验会出现不同程度的异常，与肝细胞受损程度有一定的相关性。一般采用PT或APTT来检测。时间延长或比值增大提示肝细胞损伤。5.血氨测定氨基酸脱氨基反应，肠道细菌对尿素和未吸收的氨基酸、蛋白质的分解都产生氨，在肝脏通过鸟氨酸循环生成尿素而解毒。当肝细胞严重受损伤失代偿时，血氨水平明显升高，表现出肝性脑病症状。临床意义：升高常见于严重肝病如肝硬化，肝癌，重症肝炎。二.反映脂类代谢功能1.血清胆固醇和胆固醇酯测定决大部分内源性胆固醇由肝细胞合成，合成后部分胆固醇经LCAT酯化成胆固醇酯。当肝细胞受损时，胆固醇和LCAT合成减少，胆固醇酯含量也减少。临床意义：1.肝细胞严重损伤时如肝硬化，重症肝炎胆固醇和胆固醇酯合成减少。2.胆汁淤积时胆汁反流入血，且胆固醇合成增加，血中总胆固醇增加。由于以游离胆固醇增加为主，胆固醇酯与游离胆固醇的比值降低。2.阻塞性脂蛋白X测定

LP-X是一种异常的低密度脂蛋白，当胆汁淤积时，胆汁中的磷脂反流入血后形成的。临床意义：胆汁淤积性黄疸时升高。肝外胆管阻塞造成的淤积程度较重，LP-X含量很高，可>2000mg/L，鉴别肝内外梗阻有一定价值。三.反映胆红素代谢排泌功能胆红素是在网状内皮系统中，主要由衰老RBC的血红素分解后形成生成后在血液中与白蛋白结合运输，此时尚未与其它配体结合，称为非结合胆红素（间接胆红素）非极性分子非结合胆红素被转运到肝脏，经肝细胞摄取后，通过肝脏的生物转化作用，与葡萄糖醛酸结合称为结合胆红素（直接胆红素）极性分子结合胆红素由胆道排入肠腔，被细菌还原成尿胆原一部分尿胆原被肠粘膜吸收进入体内被肝细胞摄取，其中一部分进入血循环从肾脏排出残留肠腔的尿胆原氧化后，以粪胆素排出因此，当胆红素生成过多或肝细胞的摄取、结合、转运、排泄等过程发生障碍，可导致血中胆红素升高1.血清胆红素测定包括总胆红素（STB），结合胆红素（CB）和非结合胆红素（UCB）。一般采用加溶剂的重氮反应。重氮反应原理1）直接反应结合胆红素+重氮试剂碱性溶液偶氮胆红素（紫红色）2）间接反应非结合胆红素+重氮试剂咖啡因或甲醇

偶氮胆红素参考值：总胆红素（STB）1.7-17.1umol/L结合胆红素（CB）0-6.8umol/L非结合胆红素（UCB）1.7-10.2umol/L临床意义：1.根据总胆红素判断有无黄疸及黄疸的程度STB17.1—34.2

mol/L隐性黄疸34.2—171

mol/L轻度黄疸171—342

mol/L中度黄疸>342

mol/L重度黄疸2.根据黄疸程度判断黄疸原因

（总胆红素水平）

完全阻塞性黄疸>342umol/L

不完全阻塞性黄疸171-342umol/L

肝性黄疸17.1-171umol/L

溶血性黄疸<85.5umol/L3.根据结合胆红素与总胆红素得比值，协助鉴别黄疸类型CB／STB＞50％淤积性黄疸

CB／STB20％-50％肝细胞性黄疸

CB／STB＜20％溶血性黄疸4.结合胆红素还有助于早期发现处于隐性黄疸肝胆疾病。2.尿胆红素和尿胆原测定非结合胆红素为脂溶性非极性物质，不能透过肾小球滤过膜，溶血性黄疸尿胆红素为阴性；结合胆红素是水溶性极性物质，可以通过肾小球滤过膜从尿中排出，肝细胞性和梗阻性黄疸尿胆红素为阳性。尿胆原在溶血性黄疸和肝细胞性黄疸时浓度升高。CBUCBCB/STB尿胆红素尿胆原溶血性轻↑重↑<0.2阴性明显升高CBUCBCB/STB尿胆红素尿胆原肝细胞性中↑中↑0.2-0.5阳性轻度升高CBUCBCB/STB尿胆红素尿胆原梗阻性重↑轻↑>0.5强阳性减少四.反映胆酸的代谢胆汁酸(BAbileacid)是在肝脏中以胆固醇为原料合成的，是胆汁的主要成分，以胆盐的形式存在。从结构上分为游离胆酸和结合胆酸，从来源上分为初级胆酸和次级胆酸。主要功能是促进脂类和脂溶性维生素的吸收，维持胆汁中胆固醇的溶解状态利于排出。95％的胆酸经肠肝循环被肝细胞摄取再利用，极少量进入血循环，因此是反映肝细胞损伤和胆汁淤积较敏感的指标。临床意义：1.急性肝炎，慢性活动性肝炎，酒精性肝炎，肝硬化，肝癌等肝细胞损伤后胆酸释放入血升高。2.见于胆汁淤积造成的反流入血。五.血清酶及同工酶检测肝脏强大的物质代谢，生物转化和分泌排泄功能依赖其丰富的酶反应系统，是人体含酶类最多的器官。这些酶具有一定的组织特异性，当肝细胞损伤或胆管系统受刺激时，某些酶在血液中的含量升高。通过测定它们来了解肝脏的功能状态。同工酶是指催化同一化学反应，但分子结构，理化性质及免疫反应都不同的一组酶，可以存在于不同组织，或同一细胞的不同亚结构内，它们可以提高酶学检测的组织特异性。1.血清转氨酶及其同工酶测定氨基转移酶简称转氨酶，目前用于肝功能检查的有两种：丙氨酸氨基转移酶（ALT）也称谷丙转氨酶（GPT），天冬氨酸氨基转移酶（AST）也称谷草转氨酶（GOT）。1.ALT催化丙氨酸与α-酮戊二酸的氨基转移反应，生成丙酮酸和谷氨酸。2.AST催化天冬氨酸与α-酮戊二酸的氨基转移反应，生成草酰乙酸和谷氨酸。3.ALT主要分布在肝细胞胞浆内，细胞损伤时释放入血。其次是骨骼肌，肾脏，心肌组织。指示肝细胞损伤的特异性较强。4.AST主要分布在心肌，其次是肝脏，骨骼肌和肾脏组织。绝大部分AST存在于线粒体内，细胞严重受损时才明显升高。器官特异性和敏感性不如ALT。参考值：ALT0－40U/LAST0－40U/LALT/AST≤1临床意义：1.急性病毒性肝炎早期和急性期ALT和AST均明显升高，可达正常上限的几十倍。以ALT升高更显著，ALT/AST＞1。恢复期不能降至正常或再升高，提示可能转为慢性。重症肝炎时，若黄疸进行性加重，酶活性反而降低，表现为“胆酶分离”现象，说明肝细胞严重坏死，预后不良。2.慢性病毒性肝炎转氨酶轻度升高（100-200U/L）或正常，ALT/AST＞1。若AST较ALT升高显著，即ALT/AST＜1，提示慢性肝炎进入活动期可能。3.酒精性肝病，药物性肝炎，脂肪肝，肝癌等转氨酶一般轻度升高。酒精性肝病AST升高显著，ALT/AST＜1。4.肝硬化转氨酶活性取决于肝细胞坏死程度，早期升高明显，晚期活性可正常。5.肝内、外胆汁淤积转氨酶一般正常或轻度升高。6.AST对急性心肌梗死有较高诊断价值，一般6－8小时后升高，可达正常值的4－10倍。7.其他疾病如皮肌炎，肺梗死，肾梗死等转氨酶一般轻度升高，50－200U/L。AST同工酶测定肝细胞中存在两种AST同工酶，存在于胞浆的组分称为上清夜AST（ASTs），含量少。存在于线粒体中的组分称ASTm，含量多。两者的变化可反映肝细胞坏死的程度。临床意义：轻、中度急性肝炎时，AST升高幅度较小，以ASTs为主。重症肝炎，暴发性肝炎，酒精性肝病时升高幅度大，以ASTm为主。2.碱性磷酸酶及其同工酶测定碱性磷酸酶（ALP）在碱性条件下水解磷酸酯。主要分布在肝脏，骨骼，也存在于肾脏，小肠和胎盘组织中，常用于肝脏和骨骼疾病的检查指标。胆道疾病时由于ALP的合成增加而排泄减少，血清中浓度升高有助于诊断。参考值：成人40－110U/L临床意义：1.肝胆系统疾病各种肝内、外胆管阻塞如泥沙样结石、癌栓、华支睾吸虫，胰头癌、胆道蛔虫等，以及病毒性、药物性胆汁淤积，原发性胆汁性肝硬化等肝内胆汁淤积ALP显著升高。肝实质细胞损伤如肝炎，肝硬化等，ALP轻度升高。2.黄疸的鉴别胆汁淤积性ALP明显升高，肝细胞性ALP轻度升高，溶血性ALP正常。3.骨骼疾病如纤维性骨炎，佝偻病，骨软化症，骨肉瘤，骨转移癌，甲状旁腺机能亢进等ALP升高较明显。4.妊娠中晚期及生长发育期儿童ALP轻度升高。碱性磷酸酶同工酶测定磷酸酶同工酶有6种，根据来源不同分为：ALP2肝型，ALP3骨型，ALP4胎盘型，ALP5小肠型，ALP1是细胞膜组分和ALP2的复合物，ALP6是IgG和ALP2的复合物。参考值：正常人血清中以ALP2为主，占总ALP的90％，还有少量ALP3；发育中的儿童ALP3增多，占60％以上。妊娠中晚期ALP4增多，占40－65％。临床意义：1.胆汁淤积性黄疸时，ALP1产生明显增多，导致ALP1＞ALP2。2.急性肝炎主要是肝细胞损伤时，ALP2明显升高，ALP1轻度升高，使得ALP1＜ALP2。3.80％以上的肝硬化患者，ALP5明显升高，可达总ALP的40％以上。3.γ-谷氨酰基转移酶测定γ-谷氨酰基转移酶（GGT或γ-GT）主要是催化谷胱甘肽上的γ-谷氨酰基转移到另一底物上，参与氨基酸转运和谷胱甘肽的代谢。血清中的GGT主要来自于肝胆系统。当肝内合成增加或胆汁排出障碍时，血液中GGT升高。参考值：正常人＜50U/L临床意义：1.胆道梗阻性疾病各种原因导致的肝内、外胆汁淤积，肝癌往往造成压迫性胆道梗阻，且癌细胞也合成GGT，均可使GGT明显升高。2.急性肝炎时，GGT中等程度升高，慢性肝炎，肝硬化时GGT大多正常。3.酒精性肝损伤时，ALT和AST仅轻度升高时，GGT则出现明显升高。4.脂肪肝，胰腺炎，胰腺肿瘤等GGT可轻度升高。4.乳酸脱氢酶及其同工酶测定乳酸脱氢酶（LD）是参与糖酵解的酶，广泛存在于机体的各个组织中，正常情况下血清中的LD主要来自心肌，占70％以上，来源于肝脏的约占5％。因此对肝脏疾病诊断的特异性较差。红细胞中含有大量LD，溶血时对检测结果影响较大。急性肝炎，肝硬化，胆汁淤积，慢性活动性肝炎等LD均升高。根据H亚基（心型）和M亚基（肌型）组合不同，乳酸脱氢酶同工酶分为5种。其中LD1和LD2主要来自心肌，LD3来自肺、脾脏，LD4和LD5主要来自肝脏，其次为骨骼肌。同工酶检测具有组织定位作用，特异性大大增加。在急性肝炎，慢性活动性肝炎，肝硬化，原发性肝癌等肝细胞损伤时，LD5升高，且LD5>LD4；在胆道梗阻未累及肝细胞时，LD4>LD5；恶性肿瘤肝转移时，LD4和LD5同时升高。5.-L-岩藻糖苷酶测定-L-岩藻糖苷酶（AFU）