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UDP-葡萄糖基转移酶突变体及其应用和甜葡萄糖基转移酶突变体及其应用和甜菊糖苷莱基转移酶突变体相较于包括序列如SEQIDNO:1所示的氨基酸片段的原始的UDP一葡萄糖基转移变赋予了该UDP一葡萄糖基转移酶突变体具有更高的特异性催化莱鲍迪苷A转化为莱鲍迪苷D的及充分的转化，有利于莱鲍迪苷D大规模以及高2基转移酶突变体包括序列如SEQIDNO:10所示基转移酶突变体包括序列如SEQIDNO:11所示基转移酶突变体包括序列如SEQIDNO:12所示分子、权利要求6所述的重组菌株或权利要求7所述的复合酶制剂在莱鲍迪苷D制备中的应3从甜叶菊中提取分离、纯化得到莱鲍迪苷D；但莱鲍迪苷D在甜叶菊中的含量极低(<株或复合酶制剂在莱鲍迪苷D制备中的应用。4转移酶包括序列如SEQIDNO:1所示的菌BL21和大肠杆菌BL21(DE3)中的本发明提供的UDP葡萄糖基转移酶突变体相较于包括序列如SEQIDNO:1所示的赋予了该UDP葡萄糖基转移酶突变体更高的特异性催化莱鲍迪苷A转化成莱鲍迪苷D的活合酶制剂中不仅包括UDP一葡萄糖基转移酶突变体，还包括有重组菌株细胞中的全套酶系5[0028]表1.6789述UDP葡萄糖基转移酶突变体相较于原始的UDP葡萄糖基转移酶包括H18P突变和/或NO:10所示的氨基酸片段或与SEQIDNO:10所示序列具有至少90%同源性的变体序列。其NO:11所示的氨基酸片段或与SEQIDNO:11所示序列具有至少90%同源性的变体序列。列如SEQIDNO:12所示的氨基酸片段或与SEQIDNO:12所示序列具有至少90%同源性的变[0037]基于获得上述UDP一葡萄糖基转移酶突变体为目的，本发明还提供了一种核酸分[0043]基于获得上述UDP一葡萄糖基转移酶突变体为目的，本发明还提供了一种重组菌[0045]在一些具体的实施方式中，所述重组菌株的底盘细胞的具体实例包括但不限制在对重组菌株所表达的蛋白进行纯化以获得UDP一葡萄糖基转移酶突变体的纯酶制剂的过[0050]基于上述UDP葡萄糖基转移酶突变体在莱鲍迪苷D制备中的应用潜力，本发明还[0051]在本发明中，所述原料液中，所述蔗糖合成酶的浓度优选为10~40mM，如10mM、[0057]（2）采用表2所示的突变引物对UDP一葡萄糖基转移酶的编码基因进行PCR定点突基转移酶R370H突变体的编码基因（如SEQIDNO:8所示）和UDP一葡萄糖基转移酶H18P/[0058]表2.菌落中的部分细胞进行PCR鉴定及测序，将扩增正确的单菌落接种于含有100μg/mL氨苄青[0064]表3.UGT_H18P/R370H接种于LB液体培养基中，于37℃、180rpm下培养16h，接着加入终浓度为[0067]表4.本实施例用以说明以上实施例提供的复合酶制剂在生产莱鲍迪苷D中的应用，具按照添加

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