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文档简介
酵母菌死活细胞鉴别酵母菌死活细胞鉴别第1页一、目标和要求
1.观察酵母菌出芽繁殖方式,学习区分酵母菌死活细胞试验方法。2.掌握酵母菌普通形态特征及其与细菌区分。酵母菌死活细胞鉴别第2页二、基础原理
1.形态观察:酵母菌是不运动单细胞真核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有分裂繁殖;有性繁殖是经过接合产生子囊孢子。酵母菌死活细胞鉴别第3页2.死活判定:美蓝是一个无毒性染料,它氧化型呈蓝色,还原型呈无色。用美蓝对酵母活细胞进行染色时,因为细胞新陈代谢作用,细胞内含有较强还原能力,能使美蓝由蓝色氧化型变为无色还原型。所以,含有还原能力酵母活细胞是无色,而死细胞或代谢作用微弱衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。酵母菌死活细胞鉴别第4页啤酒酵母酵母菌死活细胞鉴别第5页酵母出芽酵母菌死活细胞鉴别第6页酵母菌死活细胞鉴别第7页酵母菌死活细胞鉴别第8页酵母菌出芽繁殖及芽体酵母菌死活细胞鉴别第9页三、器材
1、染液:吕氏碱性美蓝染液2、菌种:酿酒酵母斜面培养物3、仪器和其它用具:显微镜、载玻片、盖玻片等酵母菌死活细胞鉴别第10页四、操作步骤
1、美蓝浸片观察:1)在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作用接种环挑取少许少许酵母菌苔放在染液中,混合均匀。染液不宜过多或过少,不然在盖上盖玻片时菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。盖玻片不宜平放着放下,以免产生气泡影响观察。酵母菌死活细胞鉴别第11页3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母形态和出芽情况,并据颜色来区分死活细胞。4)染色约0.5h后再次进行观察,注意死活细胞数量是否增加。5)用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。酵母菌死活细胞鉴别第12页2、水-碘液浸片观察在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液,然后在其上加三滴水,取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀,盖上盖玻片镜检。酵母菌死活细胞鉴别第13页五、试验汇报
1、绘图说明所观察酵母菌形态特征。
酵母菌死
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