药品生物检定技术（第2版）课件 第三篇 第十一章 疫苗的质量控制与生物活性检定

第十一章疫苗的质量控制与生物活性检定目录01概述02乙肝疫苗及其体外相对效力检查学习目标1.掌握疫苗的概念及分类、质量标准要求。2.熟悉常见疫苗（如乙肝疫苗）的生物活性检定方法。知识目标1.学会酶联免疫吸附法的基本操作。2.能够读懂、理解生物试剂盒的说明书。能力目标具备按照标准操作规程、操作步骤进行独立操作的意识。素养目标第一节概述疫苗是以病原微生物或其组成成分、代谢产物为起始材料，采用生物技术制备而成，用于预防、治疗人类相应疾病的生物制品。疫苗具有免疫活性，接种人体后可刺激免疫系统产生特异性体液免疫和（或）细胞免疫应答，使人体获得对相应病原微生物的免疫力。一、疫苗的概念1.灭活疫苗系指病原微生物经培养、增殖，用理化方法灭活以去除其增殖能力后制成的疫苗，如钩端螺旋体疫苗、甲型肝炎灭活疫苗等。2.减毒活疫苗系指采用病原微生物的自然弱毒株或经培养传代等方法减毒处理后获得致病力减弱、免疫原性良好的病原微生物减毒株制成的疫苗。二、疫苗的种类3.亚单位疫苗系指病原微生物经培养后，提取、纯化其主要保护性抗原成分制成的疫苗，如A群脑膜炎球菌多糖疫苗、流感亚单位疫苗等。4.基因工程疫苗系使用重组技术将编码病原微生物保护性抗原的基因重组到细菌（如大肠埃希菌）、酵母或细胞，经培养、增殖后，提取、纯化所表达的保护性抗原制成的疫苗，如重组乙肝型肝炎疫苗。二、疫苗的种类接种疫苗是预防和控制传染病的重要手段，通过适宜途径将疫苗接种于人体，使受种者产生针对疾病的特异免疫力，可抵御病原微生物侵袭而起到预防作用。

为更好地发挥疫苗的防病作用，需制定相应的免疫规划和免疫策略，并根据疾病的流行特征及疫苗的特性和效能制定免疫程序。表11-1列出了国家免疫规划的疫苗及预防的疾病种类（2021年版）。表11-2列出了部分国家非免疫规划的疫苗及预防的疾病种类。三、疫苗的应用表11-1

国家免疫规划疫苗与预防的疾病种类（2021年版）序号疫苗种类预防传染病种类英文缩写接种途径1乙肝疫苗乙型病毒性肝炎HepB肌内注射2卡介苗结核病（主要指结核性脑膜炎、粟粒性肺结核等）BCG皮内注射3脊灰灭活疫苗脊髓灰质炎IPV肌内注射4脊灰减毒活疫苗bOPV口服5百白破疫苗百日咳、白喉、破伤风DTaP肌内注射6白破疫苗DT肌内注射7麻腮风疫苗麻疹、风疹、流行性腮腺炎MMR皮下注射8乙脑减毒活疫苗流行性乙型脑炎JE-L皮下注射9乙脑灭活疫苗JE-I肌内注射10A群流脑多糖疫苗流行性脑脊髓膜炎MPSV-A皮下注射11A群C群流脑多糖疫苗MPSV-AC皮下注射12甲肝减毒活疫苗甲型病毒性肝炎HepA-L皮下注射13甲肝灭活疫苗HepA-I肌内注射14双价肾综合征出血热灭活疫苗出血热EHF肌内注射15人用炭疽活疫苗炭疽Anth皮上划痕16钩端螺旋体疫苗钩体病Lep皮下注射表11-2

部分国家非免疫规划疫苗与预防的疾病种类序号疫苗种类预防传染病种类接种途径123价肺炎球菌多糖疫苗肺炎链球菌引起的肺炎、脑膜炎、中耳炎和菌血症等肌内注射2b型流感嗜血杆菌结合疫苗b型流感嗜血杆菌引起的感染肌内注射3流感全病毒灭活疫苗流感病毒裂解疫苗流感肌内注射4双价人乳头瘤病毒疫苗人乳头瘤病毒感染肌内注射5冻干人用狂犬病疫苗狂犬病肌内注射6水痘减毒活疫苗水痘皮下注射

《中国药典》2025年版人类疫苗总论对疫苗的过程控制进行了详细规定，加强了对疫苗生产的原材料、生产过程的监管，从而减少疫苗应用事故的发生。对疫苗的生产和使用全过程进行严格的质量控制，有效确保疫苗的安全性、有效性、可控性和一致性。1.全过程质量控制2.批间一致性的控制3.目标成分及非目标成分的控制四、疫苗的过程控制第二节乙肝疫苗及其体外相对效力检查

1985年，我国开始使用血源乙肝疫苗，1992年研制成功重组中华仓鼠卵巢细胞乙肝疫苗。同期从美国Merck公司引进的重组酵母乙肝疫苗于1993年完成中间试制，1995年获准生产。1998年后淘汰了血源乙肝疫苗，目前用于免疫接种的有三种重组乙肝疫苗（酿酒酵母、汉逊酵母、CHO细胞）。一、乙肝疫苗及其发展本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）经纯化，加入氢氧化铝佐剂制成。二、重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）体外相对效力检查法（一）检查前准备1.仪器、设备：移液器及配套枪头、天平、量筒等；生物安全柜、涡旋混合器、离心机、酶标仪、水浴锅等。2.试剂：PBS，供试品处理液。3.参考品溶液及供试品溶液。（二）检查法（ELISA法）

本法系以酶联免疫吸附法（ELISA法）测定供试品中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）含量，并以疫苗参考品为标准，采用双平行线分析法计算供试品的相对效力。使用时按试剂盒说明书进行。1.平衡2.编号3.稀释

加稀释液。4.加样

分别加待测样本、阴性对照、阳性对照。5.温育37℃，60分钟。6.洗涤

缓冲液洗涤5次。7.加酶

酶标抗体。8.温育37℃，60分钟。9.洗涤

缓冲液洗涤5次。10.显色

加底物A、底物B，混匀，暗处放置30分钟。11.终止

加终止液。12.测定

阴性和阳性对照吸光度均值应在试剂盒要求范围内，试验有效。3次测定数据采用量反应平行线测定法计算。几何平均值作为最终结果。以参考品为标准，供试品相对效力应不小于0.5