ISO 238832026 肉、鱼及其制品氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱串联质谱法标准立项发展报告

肉、鱼及其制品氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱串联质谱法标准立项发展报告StandardizationDevelopmentReport:Meat,fishandtheirproducts—Determinationoffluoroquinoloneresiduecontent—Highperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometrymethod摘要随着水产养殖和畜禽养殖业的规模化发展，氟喹诺酮类药物因其广谱抗菌活性和良好药代动力学特性被广泛应用于动物疫病防治。然而，该类药物的不合理使用导致其在肉、鱼等动物源性食品中的残留问题日益突出，对消费者健康构成潜在威胁，也对国际贸易中的技术壁垒产生深远影响。为有效应对这一全球性食品安全挑战，国际标准化组织（ISO）制定并发布了ISO23883:2026《肉、鱼及其制品氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱串联质谱法》。该标准是动物源性食品中氟喹诺酮类药物残留检测领域的重要技术规范文件，确立了基于高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）技术的统一检测方法，明确了样品的提取净化流程、仪器分析条件、方法性能指标及质量控制要求。本报告系统梳理了该标准的立项背景、研制历程、核心技术内容、国内外相关标准对比及推广应用前景，旨在为我国相关检测实验室、食品生产企业及标准化工作者提供全面、深入的标准解读与参考。标准的发布实施将有效推进各国检测方法和结果互认，促进国际食品贸易便利化，为保障全球食品安全和消费者健康提供坚实的技术支撑。关键词：氟喹诺酮类药物残留；高效液相色谱-串联质谱；国际标准化组织；肉鱼制品；食品安全；检测方法标准Keywords:fluoroquinoloneresidues;HPLC-MS/MS;ISO;meatandfishproducts;foodsafety;analyticalmethodstandard一、引言1.1研究背景氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones,FQs）是一类以4-喹诺酮为母核人工合成的广谱抗菌药物，通过抑制细菌DNA回旋酶和拓扑异构酶Ⅳ的活性发挥杀菌作用。因其抗菌谱广、抗菌活性强、体内分布广泛、与常用抗菌药物无交叉耐药性等优点，该类药物在畜禽及水产养殖中广泛用于治疗呼吸系统、消化系统及泌尿生殖系统感染性疾病。常用的氟喹诺酮类药物包括恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、双氟沙星等。然而，氟喹诺酮类药物的不合理使用甚至滥用，直接导致其在动物可食性组织中的残留蓄积。人长期摄入含氟喹诺酮残留的动物源性食品后，可能引起胃肠道不适、过敏反应、中枢神经系统毒性，甚至诱导细菌耐药性的产生和传播，严重影响临床抗感染治疗的效果，构成公共健康隐患。针对这一问题，国际食品法典委员会（CAC）、欧盟、美国、中国等国际组织和国家均制定了严格的氟喹诺酮类药物最大残留限量（MRLs）标准，并对检测方法提出了高灵敏度、高选择性和高可靠性的要求。建立科学、统一、可操作的残留检测方法标准，成为各国食品安全监管体系建设的核心任务之一。1.2标准的战略意义在此国际大背景下，国际标准化组织（ISO）认识到制定统一的氟喹诺酮类药物残留检测国际标准具有多重战略意义：-填补标准空白：此前ISO体系内尚无专门针对肉、鱼及其制品中氟喹诺酮类药物残留量测定的通用方法标准，各国采用的方法在原理、流程和性能上差异较大，影响了检测结果的互认和比较。-推进国际贸易：食品国际贸易中，因检测方法和评价标准不一致引发的技术性贸易措施争端频发，统一的标准有助于消除贸易壁垒，促进公平贸易。-提升检测能力：高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）技术凭借高选择性、高灵敏度、可同时定性定量的显著优势，已成为目前兽药残留确证检测的主流技术，通过标准化可以推动该技术在全球范围内的规范化应用。-服务公共卫生：统一且严格的标准有助于各国有效监控食品中氟喹诺酮类药物残留水平，为风险评估和风险管理提供科学依据。为此，ISO于2026年正式发布了ISO23883:2026，标准全称为《肉、鱼及其制品氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱串联质谱法》，适用于肉、鱼及其制品中氟喹诺酮类药物的定性和定量检测。二、标准编制背景与立项过程2.1国内外标准现状分析在ISO23883:2026发布之前，各国及相关国际组织已建立了若干针对氟喹诺酮类药物残留检测的标准方法，但各标准覆盖的药物种类、适用基质、检测原理和技术指标不尽相同：|标准/文件|发布机构|检测方法|适用基质|检测药物种类||-----------|----------|---------|----------|-------------||GB31658.17-2021|中国农业农村部|HPLC-MS/MS|动物源性食品|氟喹诺酮类多组分||EU2002/657/EC配套方法|欧盟参考实验室|LC-MS/MS|肉、鱼、蛋、奶等|氟喹诺酮类及喹诺酮类||AOAC2007.01|AOAC国际|LC-MS/MS|鱼、虾等水产品|氟喹诺酮类多组分||FDA方法手册相关章节|美国FDA|LC-MS/MS|牛、猪、禽肉等|氟喹诺酮类||CAC/RCP68-2008|国际食品法典委员会|—|肉、鱼等|相关残留监控规范|上述标准虽在一定程度上满足了各自区域的监管需求，但在国际层面尚未形成一套兼顾科学性、适用性和协调一致性的统一方法标准，一定程度上制约了国际间检测结果的互认和食品贸易的顺畅进行。2.2ISO立项的必要性与紧迫性-国际互认的需求：随着全球经济一体化，肉、鱼及其制品国际贸易量日益增长，出口国和进口国之间的检测方法和结果互认需求强烈。ISO标准作为国际公认的技术规则，在促进贸易便利化方面具有不可替代的作用。-方法间的等效性评估缺乏：不同标准采用的提取溶剂、净化方式、色谱柱类型、流动相体系和质谱参数存在明显差异，导致不同实验室对同一样品的检测结果可比性不强。需要一份统一的基准方法供各国参考和采纳。-技术进步的推动：高效液相色谱-串联质谱技术在近年来取得长足发展，灵敏度、分辨率和稳定性显著提升，为制定更高水平的国际标准奠定了坚实的技术基础。2.3立项过程与研制历程ISO23883:2026由ISO/TC34（食品技术委员会）下设的SC6（肉及肉制品分技术委员会）和SC9（水产品分技术委员会）联合归口管理，项目建议由多个成员国联合提出。研制工作遵循ISO国际标准制定程序，主要包括以下阶段：|阶段|内容|时间节点||------|------|----------||NWIP（新工作项目提案）|提出标准制定建议，获得成员国投票通过|2022年||WD（工作组草案）|成立工作组，起草标准初稿|2022-2023年||CD（委员会草案）|分技术委员会内部征求意见和修改|2023-2024年||DIS（国际标准草案）|面向全体成员国征求意见和投票|2024-2025年||FDIS（最终国际标准草案）|最终审查和投票|2025-2026年||IS（正式国际标准）|出版发布|2026年5月|在标准研制过程中，工作组开展了多轮国际协同验证实验，来自不同国家和地区的十余个实验室参加了协同验证，以考察方法在鱼肉、畜肉、禽肉等不同基质中的适用性和重现性，为方法性能指标的确定提供了科学依据。三、标准主要内容和技术要点3.1标准适用范围ISO23883:2026规定了肉、鱼及其制品中氟喹诺酮类药物残留量的高效液相色谱-串联质谱测定方法，适用于猪肉、牛肉、羊肉、禽肉以及淡水鱼、海水鱼及其加工制品等基质中多种氟喹诺酮类药物（包括但不限于恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星等）残留的定性和定量检测。标准明确指出，该方法的定量限满足主要贸易国和国际组织设定的最大残留限量（MRLs）的监控要求。3.2方法原理试样中的氟喹诺酮类药物残留经适当的提取溶剂（通常为酸化乙腈或酸化甲醇溶液）提取，经固相萃取柱净化或QuEChERS方法净化后，采用高效液相色谱-串联质谱仪（HPLC-MS/MS）进行分析。在电喷雾离子源（ESI）正离子模式下，目标化合物经多反应监测（MRM）模式进行定性与定量，内标法定量。3.3技术路线标准规定的技术流程包括以下关键环节：1.样品制备：样品经均质化处理，保证取样代表性。2.提取：采用酸化有机溶剂提取，使目标分析物从基质中充分释放。3.净化：采用固相萃取（SPE）或分散固相萃取（d-SPE）去除基质干扰物，净化效果直接影响检测灵敏度和仪器寿命。4.浓缩与复溶：净化后的提取液经氮吹浓缩后以适当溶剂复溶。5.仪器分析：HPLC-MS/MS分析，梯度洗脱程序实现多组分色谱分离，质谱MRM模式实现高选择性检测。6.数据处理与结果计算：采用内标法绘制标准曲线，按峰面积比计算各药物残留量。3.4方法性能指标标准对方法的关键性能指标提出了明确要求，包括：|性能参数|指标要求||----------|----------||定量限（LOQ）|≤1μg/kg（按具体药物和基质确定）||检测限（LOD）|≤0.3μg/kg||回收率|70%~120%||相对标准偏差（RSD）|≤20%（重复性）；≤25%（再现性）||线性范围|定量限至100倍定量限范围内线性良好，相关系数r²≥0.99||基质效应|应进行基质匹配标准曲线校正或采用稳定同位素内标消除|四、标准的主要创新点与技术特色4.1多残留同步检测标准覆盖了养殖业常用的十余种氟喹诺酮类药物，实现了同一方法下多组分同步提取、同步净化和同步检测，大幅提高了检测效率，降低了实验室运行成本，能够更好地满足兽药残留监控计划对高通量检测的需求。4.2适用基质范围广标准兼顾肉和鱼类等多种基质，在样品前处理方案的优化上进行了充分的交叉验证。针对鱼肉基质中脂肪含量高、色素和磷脂干扰严重等特点，标准规定了行之有效的净化对策，保障了不同基质中方法表现的稳健性。4.3采用内标法定量标准推荐使用同位素内标（如恩诺沙星-d5、环丙沙星-d8等）进行校正，可有效补偿样品制备过程中的analyteloss以及基质引起的离子抑制或增强效应，显著提高定量结果的准确度和精密度。4.4明确质量控制要求标准设置了严格的质量控制条款，包括空白试验、添加回收试验、标准曲线核查、仪器灵敏度核查等，贯穿样品分析全过程，确保检测结果的可信度。五、标准与国内外相关标准的对比分析|对比维度|ISO23883:2026|中国GB31658.17-2021|欧盟相关标准||----------|----------------|----------------------|-------------||标准性质|国际标准|国家标准|法规配套技术文件||适用范围|肉、鱼及其制品|动物源性食品|动物源性食品||药物覆盖种类|10余种氟喹诺酮类|多种氟喹诺酮类|氟喹诺酮类及喹诺酮类||定量方法|内标法（推荐同位素内标）|内标法或外标法|内标法||前处理方法|SPE或QuEChERS|SPE或QuEChERS|SPE||LOQ|≤1μg/kg|各物质不同，一般为0.5~2μg/kg|与具体MRL相关|通过对比可以看出，ISO23883:2026在药物覆盖范围、基质适用性和方法标准化程度上具有综合优势，可作为各国制修订本国标准的参考基准。六、主要参与单位介绍ISO23883:2026的制定由ISO/TC34/SC6和SC9联合工作组（JWG）完成。其中，中国检验检疫科学研究院作为国内该领域的重要技术支撑单位，全程深度参与了标准的研制工作。中国检验检疫科学研究院（ChineseAcademyofInspectionandQuarantine，CAIQ）是国家市场监督管理总局直属的公益性科研机构，是国家级食品安全检测技术研究的权威机构之一。该院设有食品安全研究所、动物检疫研究所、农产品安全研究中心等多个专业部门，长期从事食品中兽药残留、农药残留、生物毒素、非法添加物等有害物质的检测技术研究和标准制修订工作。在兽药残留检测领域，该院主持和参与制定了多项国家标准和行业标准，在高效液相色谱-串联质谱多残留分析方法方面积累了丰富的研究成果和实践经验。在ISO23883:2026的研制过程中，该院承担了方法验证、基质拓展研究和国际协同实验等重要任务，提出的样品前处理优化方案和质谱参数设置建议被标准文本充分吸纳。此外，该院具备完善的实验室质量管理体系（通过ISO/IEC17025认可），配备高分辨质谱、三重四极杆质谱等先进仪器设备，为标准的验证和推广提供了坚实的技术平台。未来，该院将继续发挥技术优势，推动ISO23883:2026在我国的落地实施，并积极为我国食品安全标准体系与国际接轨提供技术支撑。七、标准实施的意义与应用前景7.1有利于提升我国氟喹诺酮残留检测能力ISO23883:2026的发布为我国相关检测实验室提供了与国际接轨的方法依据。通过引入该标准的技术要求，可以帮助各实验室优化现有检测流程、提高方法性能、完善质量控制体系，从而全面增强我国对肉、鱼及其制品中氟喹诺酮类药物残留的检测和监控能力。7.2有利于促进国际贸易与对外合作在国际贸易中，采用ISO标准进行检测有助于降低因方法差异引发的贸易纠纷。对于出口肉类和水产品的企业而言，按照ISO23883:2026进行自检自控，可以更好地满足进口国的技术要求，提升产品的国际竞争力。同时，该标准也有助于我国与其他国家在食品安全检测领域开展更加深入的技术合作与结果互认。7.3有利于推动检测技术进步与标准体系完善该标准所确立的技术思路和方法框架，可为其他类别兽药残留检测标准的制修订提供有益参考。同时，标准的实施也将促进高效液相色谱-串联质谱技术在我国基层实验室的更广泛应用，带动相关仪器设备、试剂耗材和数据处理软件的国产化发展。八、结论与展望ISO23883:2026《肉、鱼及其制品氟喹诺酮类药物残留量的测定高效液相色谱串联质谱法》的发布，是国际食品标准化工作在兽药残留检测领域取得的一项重要成果。该标准基于科学、严谨的技术路线，融合了当前高效液相色谱-串联质谱技术的最新进展，兼顾了不同国家和地区的技术能力和实际需求，具有方法先进、适用性广、可操作性强的突出特征。面向未来，随着氟喹诺酮类药物新品种的出现、国际贸易对检测方法要求的不断提高以及新型前处理技术和质谱技术的持续发展，ISO23883:2026也将面临动态修订和完善的需要。建议国内相关机构以本标准的实施为契机，加快推动实验室能力建设，深化标准应用研究，积极跟踪国际标准化动态，在兽药残留检测国际标准的制修订中贡献更多中国智慧和中国方案，为全球食品安全保障作出更大贡献。参考文献[1]国际标准化组织.ISO23883:2026Meat,fishandtheirproducts—Determinationoffluoroquinoloneresiduecontent—Highperformanceliquidchromatography-tandemmass