CN119403927A 用于抑制跨膜丝氨酸蛋白酶6（tmprss6）表达的组合物和方法 （诺和诺德股份有限公司）

2024.12.18PCT/EP2023/0670702023.06.23WO2023/247738EN2023.12.28本文提供了抑制TMPRSS6表达的寡核苷酸。特别是涉及治疗与铁调素缺乏或抑制相关的疾2SEQIDNO:600所示核苷酸序列的至少20个连续核苷酸，并且其中所述反义链包含与3.根据权利要求1_2中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQIDNO:4.根据权利要求1_3中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含SEQIDNO:5.根据权利要求1_4中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含至少一个所述有义链包含36个核苷酸并且所述反义链包含22个核苷酸，每条所述有义链的位置8_11以及所述反义链的位置_包含根据化学式1a(MePhosphonate_49.根据权利要求1_8中任一项所述的RNAi寡核苷311.根据权利要求1_10中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含长度为一12.一种用于降低TMPRSS6表达的RNAi寡核苷酸，所述寡核苷酸包含有义链和反义链，所述有义链包含5'_[mGs][mG][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs][mGs][mG]_3’(SEQIDNO:613.一种药物组合物，其包含根据权利要求13.一种药物组合物，其包含根据权利要求1_12中任一项所述的RNAi寡核苷酸和药学14根据权利要求1_12中任一项所述的RNAi寡核苷酸，或根据权利要求13所述的药物15.根据权利要求1_12中任一项所述的RNAi寡核苷酸，或根据权利要求13所述的药物4表达。TMPRSS6参与由铁缺乏触发的跨膜信号通路，并抑制激活HAMP——编码铁调素的基在北欧人群中p.C282Y突变的发生率很高(Alexander和Kowdley,GeneticsinMedicine,[0005]与其在抑制铁调素表达中的作用一致，TMPRSS6的突变导致诸如铁难治性缺铁性5[0006]这类证据提示了靶向TMPRSS6在治疗与铁过载相关的疾病中的作用。当前针对此不希望受理论的束缚，靶向TMPRSS6的寡核苷酸可用于治疗与铁调素缺乏或抑制相关的疾双链体区域，其中所述反义链包含与SEQIDNO:661_852中任一者的TMPRSS6mRNA靶序列[0016](i)长度为19_30个核苷酸的反义链，其中所述反义链包含选自SEQIDNO:1_19267[0025]在一些实施方案中，所述寡核苷酸的至少一个核苷酸与一个或多个靶向配体缀[0027]在一些实施方案中，所述互补区域在所述反义链的核苷酸位置2_8处与所述补区域在所述反义链的核苷酸位置2_11处与所述TMPRSS6mRNA靶序列完全互补，其中核苷中任一者的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述反义链包含SEQIDNO:600_68IDNO:597所示的核苷酸序列，并且所述反义链包含如SEQIDNO:618所示的核苷酸序列。包含如SEQIDNO:607所示的核苷酸[0047]在一些实施方案中，所述反义链包含选自SEQIDNO:600_601、606[0049]在一些实施方案中，所述有义链包含选自SEQIDNO:579_580、585IDNO:639所示的核苷酸序列，并且所述反义链包含如SEQIDNO:660所示的核苷酸序列。包含如SEQIDNO:649所示的核苷酸序列。9酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含5'_[mGs][mG][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:621)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs]酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含5'[mGs][mC][mU][mA][mC][mU][mC][fU][fG][fG][fU][mA][mU][mU][mU][mC][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:622)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fG][fG][mA][fA][mA][mU][fA][mC][mC][mA][fG][mA][mG][mU][mA][mG][mCs]酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含5'_[mCs][mU][mC][mA][mC][mC][mU][fG][fC][fU][fU][mC][mU][mU][mC][mU][mG][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:632)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fAs][fCs][fC][fA][mG][fA][mA][mG][fA][mA][mG][mC][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mGs]酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含5'_[mAs][mG][mU][mG][mU][mG][mA][fA][fA][fG][fA][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]3’(SEQIDNO:639)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fCs][fAs][fG][fC][mU][fA][mU][mG][fU][mC][mU][mU][fU][mC][mA][mC][mA][mC][mUs]酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含5'_[mGs][mG][mG][mU][mG][mC][mA][fC][fU][fA][fU][mG][mG][mC][mU][mU][mG][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]3’(SEQIDNO:628)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fC][fA][mA][fG][mC][mC][fA][mU][mA][mG][fU][mG][mC][mA][mC][mC][mCs]酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:621并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:632并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:639并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:628并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:621并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:632并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:639并且所述反义链包含SEQID酸包含有义链和反义链，其中所述有义链包含SEQIDNO:628并且所述反义链包含SEQID[0085]在一些实施方案中，本公开提供了一种用于降低细胞、细胞群体或受试者中的[0086]i.使所述细胞或细胞群体与本文所述的RNAi寡核苷酸或本文所述的药物组合物氨酸蛋白酶_2(matriptase_2)蛋白的量或水平，或以上两者。在一些实施方案中，降低[0095]图1A和图1B提供的图描绘了在用GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸处理后，外源性表达人TMPRSS6的小鼠(流体动力学注射模型)肝脏中剩余的人TMPRSS6mRNA的百分比(％)。向CD1小鼠皮下给予1mg/kg或2mg/kg的在PBS中配制的所示GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷[0097]图3A图3D提供了描绘GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸0416(图3A)、0651(图包括由核苷酸27一30组成的四环结构。反义链是互补的并且包括由2个核苷酸组成的突出向食蟹猴(Macacafascicularis)皮下给予1mg/kg或4mg/kg的在PBS中配制的所示GalNAc理的动物确定猴TMPRSS6mRNA的水向食蟹猴皮下给予1mg/kg或4mg/kg的在PBS中配制的所示GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸。5E)和第168天(图5F)收集肝脏样品，并使用qPCR测定相对于PBS处理的动物确定猴铁调素mRNA的水平。[0104]图10AB提供了GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸0416的化学图，其中A和B表示图[0105]图11AB提供了GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸0651的化学图，其中A和B表示图[0106]图12AB提供了GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸0831的化学图，其中A和B表示图[0107]图13AB提供了GalNAc缀合的TMPRSS6寡核苷酸1546的化学图，其中A和B表示图[0109]跨膜丝氨酸蛋白酶6(TMPRSS6)编码位于细胞表面上的II型跨膜丝氨酸蛋白铁稳态中发挥作用。肝脏)中的TMPRSS6表达来治疗与铁调素缺乏或抑制相关的[0113]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸(例如，RNAi寡核苷酸)靶向构成TMPRSS6[0114]在一些实施方案中，为了在体内抑制TMPRSS6表达的目的，所述寡核苷酸靶向症或状况的受试者或患者中治疗益处的量或碱基配对与TMPRSS6靶序列结合或退火的互补区域。靶向序列或互补区域通常具有合适的一些实施方案中，寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的序列互补的靶向序列或包含与SEQIDNO:193_384中任一者的序列互补的靶向序列或互补区域，并且该靶向序列核苷酸包含与SEQIDNO:193_384中任一者的序列互补的靶向序列或互补区域，并且该靶193_384中任一者的序列互补的靶向序列或互补区域，并且该靶向序列或互补区域的长度含与TMPRSS6靶序列为部分互补的靶向序列或[0119]在一些实施方案中，该寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的序列完全苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的序列为部分互补的靶向序列或互补区域。在一[0121]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸(例如，RNAi寡核苷酸)包含与SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶向序列或互补区域，任选地其中所述连续核苷酸序列的长度为19个核苷酸。在一些实施方案中，该寡核苷酸包含与SEQIDNO:844、或不超过5个错配，条件是该靶向序列或互补区域在适当杂交条件下与TMPRSS6mRNA结合中，该寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶向序列或SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶向序列或互补区域，其中该靶向苷酸序列互补的靶向序列或互补区域，其中该靶向序列或互补区域可以与相应的TMPRSS6[0125]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸通过在切酶(Dicer)参与的上游或下游加入[0126]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸在切酶参与(例如，切酶切割)的下游加入例如，NucleicAcidsinChemistryandBiology,Blackburn(编),ROYALSOCIETYOFCHEMISTRY,2006)、shRNA(例如，具有19bp或更短的茎；参见，例如，Moore等人(2010)Baker(2006)RNA12:163_176)、不对称siRNA(aiRNA；参见，例如，Sun等人(2008)(2007)J.Am.Chem.Soc.129:15108_09)以及小的内部分段干扰RNA(siRNA；参见，例如，或抑制TMPRSS6表达的寡核苷酸结构的其他非限制性实例是微小RNA(miRNA)、短发夹RNA义链，该有义链包含SEQIDNO:577_597中任一者的序列，[0153]在一些实施方案中，有义链包含SEQIDNO:579的序列并且反义链包含SEQID义链包含SEQIDNO:607的序列。酸的DNA对应物)和/或一个或多个经修饰的核苷酸和/或一个或多个经修饰的核苷酸间键IDNO:385_576的序列。在一些实施方案中，该寡核苷酸的有义链长于27个核苷酸(例如，链包含选自SEQIDNO:577_597的核苷酸序列，其中该核苷酸序列长于25个核苷酸(例如，SEQIDNO:577_597的核苷酸序列，其中该寡核苷酸包含长度为1至6个核苷酸的5’_突出反义链包含选自SEQIDNO:598_618的核苷酸序列，其中该寡核苷酸包含长度为1至6个核实施方案中，该寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶酸)包含反义链，该反义链包含如SEQIDNO:385_576中任一者所示的序列或由如SEQIDIDNO:598_618中任一者所示的序列组成。在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含反义少21个、至少22个或至少23个)连续核苷酸。在一些实施方案中，本文公开的用于靶向[0182]在一些实施方案中，本文公开的用于靶向TMPRSS6mRNA并抑制TMPRSS6表达的寡些实施方案中，本文公开的用于靶向TMPRSS6mRNA并抑制TMPRSS6表达的寡核苷酸(例如，RNAi寡核苷酸)包含如SEQIDNO:193_384中任一者所示的有义链序列。在一些实施方案的寡核苷酸具有有义链，该有义链由如SEQIDNO:661_852中任一者所示的序列的至少约文的寡核苷酸具有有义链，该有义链由如SEQIDNO:577_597中任一者所示的序列的至少用于靶向TMPRSS6mRNA并抑制TMPRSS6表达的寡核苷酸少21个、至少22个或至少23个)连续核苷酸。在一些实施方案中，本文公开的用于靶向[0187]在一些实施方案中，本文提供的寡核苷酸(例如，RNAi寡核苷酸)包含与SEQID中，该寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶向序列或且其中Lp在S1与S2之间形成长度为4个核苷酸的[0188]在一些实施方案中，如本文所述的具有结构S1_Lp_S2的茎_环的环(Lp)是三环[0189]在一些实施方案中，如上所述的具有结构S1_Lp_S2的茎_环的环(Lp)是四环中，本文的寡核苷酸包含与SEQIDNO:661_852中任一者的连续核苷酸序列互补的靶向序[0191]在一些实施方案中，在有义链与反义链之间形成的双链体的长度为至少12个(例一些实施方案中，在有义链与反义链之间形成的双链体的长度在12_30个核苷酸的范围内(1)至十六(16)、一(1)至十五(15)、一(1)至十四(14)(1)至十六(16)、一(1)至十五(15)、一(1)至十四(14)后靶向所需细胞的能力和/或热力学稳定性)的修饰核苷酸[0281]在一些实施方案中，本文所述的寡核苷酸包含有义链，该有义链的约10_15％、F基团修饰。在一些实施方案中，有义链中位置1_7和12_20处的每个核苷酸处的糖部分被处的每个核苷酸的糖部分被2’_F修饰，并且该反义链的其余每个核苷酸的糖部分被选自处的每个核苷酸的糖部分被2’_F修饰，并且该反义链的其余每个核苷酸的糖部分被选自CH2基尿苷硫代磷酸酯[MePhosphonate_烷基膦酸酯键、硫代烷基磷酸三酯键、亚磷酰胺键、膦酸酯键或硼代磷酸酯20和21以及反义链的位置21和22中的每一个之间具有硫代磷酸酯键。在一些实施方案中，寡核苷酸的有义链和反义链包含选自下组的核苷酸序列：酸序列：[0389]通用结合核苷酸的非限制性实例包括但不限于肌苷、1_β_D_呋喃核糖基_5_硝基吲哚和/或1_β_D_呋喃核糖基_3_硝基吡咯(参见公开号为2007/0254362的美国专利申请；VanAerschot等人(1995)NucleicAcidsRes.23:4363_4370；Loakes等人(1995)Nucleic治疗的生物体的不良影响和/或避免寡核苷酸过度流失到不会从该寡核苷酸或其作用(例组的核苷酸序列：糖蛋白(脱唾液酸糖蛋白)方面起主要作用。GalNAc部四环(tetraLp)是腺嘌呤(A)和鸟嘌呤(G)核苷酸的任意组合。在一些实施方案中，该四环(tetraLp)包含经由本文所述的任何连接体与该四环的任何一个或多个鸟嘌呤(G)核苷酸实施方案中，所述四环(tetraLp)包含经由本文所述的任何连接体与该四环的任何一个或[0419]在一些实施方案中，所述四环(tetraLp)具有经由本文所述的任何连接体与该四环的任何一个或多个腺嘌呤(A)核苷酸附接的单价GalNAc，如以下化学式3所示(X＝杂原实施方案中，所述四环(tetraLp)具有经由本文所述的任何连接体与该四环的任何一个或[0427]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸包含与腺嘌呤核苷酸附接的单价GalNAc部寡核苷酸的核苷酸缀合。基于缩醛的连接体例如在公开号为WO2016/100401的国际专利申义链的位置27_30处。在化学式中，是与寡核苷酸链连接的连接点(化学式7和化学式[0442]在一些实施方案中，本文的寡核苷酸(例如，RNAi寡核苷酸)不具有与之缀合的[0460]其中所述寡核苷酸包含与核苷酸缀合的至少一个GalNAc部分。用于降低TMPRSS6被修饰，其中反义链包含与SEQIDNO:661_852中任一者的TMPRSS6mRNA靶序列互补的互NO:193_384中任一者的序列的有义链和包含选自SEQIDNO:385_576的互补序列的反义NO:577_597中任一者的序列的有义链和包含选自SEQIDNO:598_618的互补序列的反义NO:619_639中任一者的序列的有义链和包含选自SEQIDNO:640_660的互补序列的反义酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:184所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:181所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:158所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:134所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:102所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:184所具有由1_4个核苷酸组成的突出端的不对称双链体酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:181所具有由1_4个核苷酸组成的突出端的不对称双链体酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:158所具有由1_4个核苷酸组成的突出端的不对称双链体酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:134所具有由1_4个核苷酸组成的突出端的不对称双链体酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:102所具有由1_4个核苷酸组成的突出端的不对酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:184所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:181所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:158所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:134所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:102所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:184所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:181所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:158所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:134所酸序列包含与TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，其中该互补区域如SEQIDNO:102所[0506]在一些实施方案中，本公开提供了一种用于降低TMPRSS6mX_mX_mX_mX_mX_mX_mX_mX_[ademX_GalNAc]_[ademX_GalNAc]_[ademX_GalNAc]_mX_mX_[fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:621)的序列和所有修饰，并且其中反义链包含5'[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs][mGs]寡核苷酸包含有义链和反义链，其中有义链包含5'[mGs][mC][mU][mA][mC][mU][mC][fU][fG][fG][fU][mA][mU][mU][mU][mC][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:622)的序列和所有修饰，并且其中反义链包含5'[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fG][fG][mA][fA][mA][mU][fA][mC][mC][mA][fG][mA][mG][mU][mA][mG][mCs][mGs][fC][fU][fU][mC][mU][mU][mC][mU][mG][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQID[fC][fA][mG][fA][mA][mG][fA][mA][mG][mC][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mGs][mGs][fA][fG][fA][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]3’(SEQID[fG][fC][mU][fA][mU][mG][fU][mC][mU][mU][fU][mC][mA][mC][mA][mC][mUs][mGs][fU][fA][fU][mG][mG][mC][mU][mU][mG][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]3’(SEQID[fC][fA][mA][fG][mC][mC][fA][mU][mA][mG][fU][mG][mC][mA][mC][mC][mCs][mGs][0525]在一些实施方案中，本公开提供了一种用于降低TMPRSS6核苷酸序列：其中所述RNAi是具有如图10A_B所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图14B所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图11A_B所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图14C所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图12A_B所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图14D所示结构的缀合其中所述RNAi是具有如图13A_B所示结构的缀合合适的脂质包括Oligofectamine、Lipofectamine(LifeTechnologies)、NC388[0550]适合注射使用的药物组合物包括无菌水溶液(当水溶性时)或分散体以及用于即TMPRSS6表达的RNAi寡核苷酸)，尽管活性成分的百分比可在总组合物的重量或体积的约量或水平的降低来确定TMPRSS6表达的降低。这些方法包括本文描述的和本领域普通技术[0555]本文提供的方法可用于任何合适的细胞类型。在一些实施方案中，细胞是表达定或技术来确定。在一些实施方案中，通过将与寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中的细胞或细胞群体导致未与该寡核苷酸接触或与对照寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中的中，TMPRSS6表达的对照量或水平是尚未与本文的寡核苷酸接触的细胞或细胞群体中酸)或包含一种或多种寡核苷酸的药物组合物施用至患有与铁调素缺乏或抑制相关的疾案中，与未接受所述一种或多种寡核苷酸或药物组合物或接受一种或多种对照寡核苷酸、酸)或包含该一种或多种寡核苷酸的药物组合物施用至患有与铁调素缺乏或抑制相关的疾一种或多种对照寡核苷酸、药物组合物或治疗的受试者(例如，参考或对照受试者)中TMPRSS6mRNA的量或水平相比，该受试者中TMPRSS6mRNA的量或水平降低至少约30％、约者，使得与施用该寡核苷酸或药物组合物之前的膜型丝氨酸蛋白酶一2蛋白的量或水平相酸)或包含该一种或多种寡核苷酸的药物组合物施用至患有与铁调素缺乏或抑制相关的疾水平相比，该受试者中TMPRSS6基因活性/表达的量或水平降低至少约30％、约35％、约或水平相比，该受试者中TMPRSS6活性的量或水平降低至少约30％、约35％、约40％、约案中，与未接受所述一种或多种寡核苷酸或药物组合物或接受一种或多种对照寡核苷酸、案中，与未接受所述一种或多种寡核苷酸或药物组合物或接受一种或多种对照寡核苷酸、相关或受TMPRSS6表达调节影响的生物标志物的量或水平或其任意组合降低。在一些实施TMPRSS6表达调节相关或受TMPRSS6表达调节影响的生物标志物的量或水平或其任意组合可以是疾病开始或维持所需的基因，或者已被鉴定为与患上该疾病的较高风险相关的基粘膜)或通过直接注射到靶器官(例如，受试者酸的嘧啶核苷酸互补的一个核酸的嘌呤核苷酸可以通过彼此形成氢键而碱基配对在一起。(Cyp3a11)、细胞色素P4503A4(CYP3A4)、延胡索酰乙酰乙酸水解酶(Fah)、葡萄糖6_磷酸或不具有双链体区域。作为一组非限制性实例，寡核苷酸可以是但不限于小干扰RNAWO2011/133871号国际专利申请；第8,927,513号美国专利；和Prakash等人(2015)酶2蛋白和/或膜型丝氨酸蛋白酶2活性的量长度为至少15个连续核苷酸)来标识，是指通过核苷酸间键合连续地连接在一起的多个核链寡核苷酸，其中反义链或反义链的一部分被Argonaute2(Ago2)核酸内切酶在靶mRNA(例该切割在TMPRSS6基因转录过程中形成的mRNA分子的核苷酸序列部分处或附近。在一些实施方案中，靶序列位于TMPRSS6基因的蛋白质编码区内。在一些实施方案中，靶序列位于稳定性的增加可检测为相邻茎双链体的解链温度(Tm)的增加，该Tm高于由随机选择的核苷环)可以赋予包含长度至少为2个碱基对(bp)的双链体的发夹在10mMNa2HPO4中至少约50一些实施方案中，四环可以赋予包含长度至少为2个碱基对(bp)的双链体的发夹在10mM键键合和接触相互作用(Cheong等人(1990)Nature346:680_82；Heus&Pardi(1991)核苷酸的标准IUPAC_IUB符号可以如Cornish_Bowden(1985)NucleicAcidsRes.13:3021_酸包含形成双链体区域的有义链和反义链，其中所述反义链包含与SEQIDNO:661_852中任一者所示的TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域，并且其中所述互补区域的长度为至少[0629]10.根据前述实施方案中任一项所述的RN[0630]11.根据前述实施方案中任一项所述的[0632](i)长度为19_30个核苷酸的反义链，其中所述反义链包含含有与TMPRSS6mRNA靶[0635]14.根据实施方案1_12中任一项所述的RN[0640]19.根据实施方案13_18中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述环是包含序列[0641]20.根据实施方案13_19中任一项所述的RNA[0644]23.根据实施方案13_22中任一项所述的RNA[0645]24.根据实施方案13_23中任一项所述的RNAi寡核[0648]27.根据前述实施方案中任一项所述的R[0651]30.根据实施方案27_29[0654]33.根据实施方案27_29[0657]36.根据前述实施方案中任一项所述的R[0658]37.根据前述实施方案中任一项所述[0659]38.根据前述实施方案中任一项所述的RN[0660]39.根据实施方案1_36中任一项所述的RNAi[0663]42.根据实施方案36_41中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含[0668]47.根据实施方案36_46中任一项所述的R[0669]48.根据实施方案36_47中任一项所述的RNA[0670]49.根据实施方案36_48中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的约[0671]50.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含从5’[0678]53.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含从5’[0685]56.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含从5’[0692]59.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含从5’[0703]63.根据前述实施方案中任一项所述的R[0704]64.根据实施方案63所述的RNAi[0705]65.根据前述实施方案中任一项所述的RN[0707]67.根据前述实施方案中任一项所述的[0717]72.根据实施方案71所述的RNAi寡核苷核苷酸包含根据化学式1a(MePhosphonate_4O_mU)[0719]74.根据前述实施方案中任一项所[0721]76.根据实施方案13_75中任一项所述的[0723]78.根据实施方案13_77中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述环(Lp)包含[0725]80.根据实施方案79所述的RNAi寡核苷酸，其中所[0727]82.根据实施方案13_81中任一项所述的RNA[0728]83.根据实施方案13_82中任一项所述的RN[0729]84.根据实施方案13_82中任一项所述的R[0730]85.根据前述实施方案中任一项所述[0731]86.根据实施方案1_84中任一项所述[0732]87.根据实施方案1_84和86中任一项[0733]88.根据前述实施方案中任一项所述的[0734]89.根据前述实施方案中任一项所述的[0737]92.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含SEQ[0738]93.根据前述实施方案中任[0739]94.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述反义链包含SEQ[0740]95.根据前述实施方案中任[0741]96.根据前述实施方案中任一项所述的RN[0751]97.根据前述实施方案中任一项所述的R[0759]100.根据实施方案1_97中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如[0760]101.根据实施方案1_97中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如[0761]102.根据实施方案1_97中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如[0762]103.根据实施方案1_97中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如[0781]108.根据前述实施方案中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中所述有义链包含如[0782]109.根据实施方案1_107中任一项所述的R[0783]110.根据实施方案1_107中任一项所述的[0784]111.根据实施方案1_107中任一项所述[0785]112.根据实施方案1_107中任一项所述的R[0786]113.根据实施方案1_107中任一项所述的[0788]所述反义链包含22个核苷酸并包含如SEQIDNO:600所示的核苷酸序列，并且所述有义链包含36个核苷酸并包含如SEQIDNO:579所示的核苷酸序列，每条所述链的核苷[0794]115.根据实施方案114所述的RNAi寡核[0795]116.根据实施方案114_115中任一项所述的R乳糖胺(GalNAc)部分缀合的所述环Lp的核苷酸各自包含根[0797]117.一种用于降低TMPRSS6表达的RN义链，其中所述有义链包含5'_[mGs][mG][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:621)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs][mGs][mG]_3'(SEQ核糖核苷；s＝硫代磷酸酯，并且其中ademA-GalNAC=[0799]118.一种用于降低TMPRSS6表达的RNAi[0800]所述有义链包含5'_[mGs][mG][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:621)的序列[0801]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs][mGs][mG]_3'(SEQIDNO:642)[0807]119.一种用于降低TMPRSS6表达的RNAi[0808]所述有义链包含5'_[mGs][mG][mU][mG][mC][mU][mA][fC][fU][fC][fU][mG][mG][mU][mA][mU][mU][mU][mC][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:621)的序列[0809]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fGs][fAs][fA][fA][mU][fA][mC][mC][fA][mG][mA][mG][fU][mA][mG][mC][mA][mC][mCs][mGs][mG]_3’(SEQIDNO:642)[0817]120.一种用于降低TMPRSS6表达的RNA义链，其中所述有义链包含5'_[mGs][mC][mU][mA][mC][mU][mC][fU][fG][fG][fU][mA][mU][mU][mU][mC][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:622)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fG][fG][mA][fA][mA][mU][fA][mC][mC][mA][fG][mA][mG][mU][mA][mG][mCs][mGs][mG]_3'(SEQ核糖核苷；s＝硫代磷酸酯，并且其中ademA-GalNAC=[0819]121.一种用于降低TMPRSS6表达的R[0820]所述有义链包含5'_[mGs][mC][mU][mA][mC][mU][mC][fU][fG][fG][fU][mA][mU][mU][mU][mC][mC][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:622)的序列[0821]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fG][fG][mA][fA][mA][mU][fA][mC][mC][mA][fG][mA][mG][mU][mA][mG][mCs][mGs][mG]_3'(SEQIDNO:643)[0827]122.一种用于降低TMPRSS6表达的RNAi义链，其中所述有义链包含5'_[mCs][mU][mC][mA][mC][mC][mU][fG][fC][fU][fU][mC][mU][mU][mC][mU][mG][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:632)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fAs][fCs][fC][fA][mG][fA][mA][mG][fA][mA][mG][mC][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mGs][mGs][mG]_3'(SEQ核糖核苷；s＝硫代磷酸酯，并且其中ademA-GalNAC=[0829]123.一种用于降低TMPRSS6表达的RNA[0830]所述有义链包含5'_[mCs][mU][mC][mA][mC][mC][mU][fG][fC][fU][fU][mC][mU][mU][mC][mU][mG][mG][mU][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:632)的序列[0831]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fAs][fCs][fC][fA][mG][fA][mA][mG][fA][mA][mG][mC][fA][mG][mG][mU][mG][mA][mGs][mGs][mG]_3'(SEQIDNO:653)[0837]124.一种用于降低TMPRSS6表达的RN义链，其中所述有义链包含5'_[mAs][mG][mU][mG][mU][mG][mA][fA][fA][fG][fA][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:639)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fCs][fAs][fG][fC][mU][fA][mU][mG][fU][mC][mU][mU][fU][mC][mA][mC][mA][mC][mUs][mGs][mG]_3'(SEQ[0839]125.一种用于降低TMPRSS6表达的RNA[0840]所述有义链包含5'_[mAs][mG][mU][mG][mU][mG][mA][fA][fA][fG][fA][mC][mA][mU][mA][mG][mC][mU][mG][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:639)的序列[0841]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fCs][fAs][fG][fC][mU][fA][mU][mG][fU][mC][mU][mU][fU][mC][mA][mC][mA][mC][mUs][mGs][mG]_3'(SEQIDNO:660)[0847]126.一种用于降低TMPRSS6表达的RNA义链，其中所述有义链包含5'_[mGs][mG][mG][mU][mG][mC][mA][fC][fU][fA][fU][mG][mG][mC][mU][mU][mG][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:628)的序列和所有修饰，并且其中所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fC][fA][mA][fG][mC][mC][fA][mU][mA][mG][fU][mG][mC][mA][mC][mC][mCs][mGs][mG]_3'(SEQ核糖核苷；s＝硫代磷酸酯，并且其中ademA-GalNAC=[0849]127.一种用于降低TMPRSS6表达的RN[0850]所述有义链包含5'_[mGs][mG][mG][mU][mG][mC][mA][fC][fU][fA][fU][mG][mG][mC][mU][mU][mG][mU][mA][mA][mG][mC][mA][mG][mC][mC][mG][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][ademA_GalNAc][mG][mG][mC][mU][mG][mC]_3’(SEQIDNO:628)的序列[0851]所述反义链包含5'_[MePhosphonate_4O_mUs][fUs][fAs][fC][fA][mA][fG][mC][mC][fA][mU][mA][mG][fU][mG][mC][mA][mC][mC][mCs][mGs][mG]_3'(SEQIDNO:649)[0857]128.根据实施方案116_127中任一项所述的RNAi寡核苷酸，其中MePhosphonate_[0859]129.根据实施方案116_127中任一项所述的RNAi寡核苷酸方法，该方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据实施方案1_137中任一项所述的[0874]i)使所述细胞或细胞群体与根据实施方案1_137中任一项所述的RNAi寡核苷酸或[0875]ii)向所述受试者施用根据实施方案1_137中任一项所述的RNAi寡核苷酸或实施[0876]143.根据实施方案142所述的方法，其中降低TMPRSS6[0878]145.根据实施方案142_144[0882]149.根据实施方案139_148中任一项所述的方[0883]150.根据实施方案1_137中任一项所述的RNAi寡核苷酸或根据实施方案138所述[0886]153.根据实施方案1_137中任一项所述的RNAi寡核苷酸或实施方案138的药物组[0892]159.一种试剂盒，其包含根据实施方案1_13施方案138的药物组合物以及包装插页，该包装插页包括关于向患有与铁调素缺乏或抑制或适合使用的RNAi寡核苷酸或药物组合物，或根据实施方案158_159中任一项所述的试剂[0897]在先前实施例中描述的寡核苷酸(RNAi寡核苷酸)使用本文所述的方法来化学合NucleotideChemistryV:DeoxynucleosidePhosphoramidites—ANewClassofKeyIntermediatesforDeoxypolynucleotideSynthesis,TetrahedronLett.1981；22:离子交换高效液相色谱法(IE_HPLC)在AmershamSource15Q柱(1.0cm×25cm；AmershamPharmaciaBiotech)上使用15min步进线性梯度纯化寡聚体。梯度从90:10缓冲液260nm处的UV吸光度进行检测。变性Tris_硼酸盐_7M_尿素运行缓冲液购自Beckman_按照制造商推荐的方案，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间(MALDI_TOF)质谱法验证化[0905]为了生成TMPRSS6RNAi寡核苷酸，使用基于计算机的算法通过计算确定适合测定(反义)链序列，每个序列都具有与人(Hs)或鼠(Mm)mRNA(例如，分别为SEQIDNO:853和含与具有核苷酸序列相似性的同源TMPRSS6mRNA靶序列互补的互补区域的TMPRSS6RNAi