CN119410764A 一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方法 （中国水产科学研究院黄海水产研究所）_第1页
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文档简介

所本发明提供一种快速检测草鱼幼鱼性别的雌雄个体并分别对雌雄个体进行组织样品的提用TIANampMarineAnimalsDNAkit试剂盒提取3尾雌鱼和3尾雄鱼的肌肉组织基因组DNA,NanoDrop2000超微量分光光度计测量DNA的浓度琐，实现了仅需通过一次PCR扩增及琼脂糖凝胶2获取草鱼数尾，以性腺形态确定雌雄个体并分别对雌雄个体进存于_20℃冰箱；利用TIANampMarineAnimalsDNAkit试剂盒提取3尾雌鱼和3尾雄鱼的肌肉组织基因组DNA,NanoDrop2000超微量分光光度计测量DNA的浓度和OD260/OD280比值，采用权利要求1中所述引物对待检测样品进行PCR扩增，对扩增所得产4.根据权利要求2所述的一种快速检测草鱼幼鱼性别的方法3[0001]本发明涉及生物检测技术领域，具体为一种快速检测草鱼幼鱼性别的引物和方[0005]针对现有技术的不足，本发明提供了一种快速检测草鱼并保存于_20℃冰箱；[0014]利用TIANampMarineAnimalsDNAkit试剂盒提取3尾雌鱼和3尾雄鱼的肌肉组织基因组DNA,NanoDrop2000超微量分光光度计测量DNA的浓度和OD260/OD280比值，[0016]采用引物对待检测样品进行PCR扩增，对扩增所得产物以琼脂糖凝胶电泳图中的4[0025]图1为本发明的草鱼性别标记候选引物PCR扩增结果示意图，其中a）为CL_1F/[0026]图2为本发明的草鱼特异性性别标记引物PCR扩增验证结果示意图，其中e）为5[0041]在某养殖场购买2龄草鱼30尾，解剖观察性腺形态确定雌雄个体分别为13尾和17[0049]6）加两倍体积预冷的无水乙醇，轻轻摇匀，沉淀DNA，4℃条件下12000rpm离心F1_F10和M1_M10的重测序数据拆分为L=20bp序列的短序列引物集合，将数组中的每个短5’GAGGCAGCCAATAAGGAGTC_3’5’AGATGTCCTCGTGAAGTCAA_3’5’CACAGCCCAGACTGAGATAG_3’65’CTTGTTTCAGCGGCAGGTGT_3’5’CATAACAGAGCCTAAGTGCC_3’5’TGTTTCAGCGGCAGGTGTTT_3’5’ACTCAAGAAGACAAACACCC_3’分别取4μlPCR反应液和DL2000mark

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