食用菌菌种技术员考试题及答案

食用菌菌种技术员考试题及答案一、单项选择题（本大题共20小题，每小题1分，共20分。在每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，请将其代码填在括号内。）1.食用菌菌种生产中，最适宜的碳氮比（C/N）因菌种类型和培养阶段不同而异，一般营养菌丝生长阶段适宜的C/N范围是（）。A.5:1~10:1B.10:1~20:1C.20:1~40:1D.40:1~60:12.在制作母种（一级种）培养基时，常用的凝固剂是（）。A.琼脂B.明胶C.硅胶D.果胶3.香菇菌丝体生长的最适温度范围是（）。A.5℃~10℃B.15℃~25℃C.24℃~27℃D.30℃~35℃4.进行高压蒸汽灭菌时，通常要求压力达到0.1MPa~0.15CMPa，此时对应的温度大约是（）。A.100℃B.110℃C.121℃D.132℃5.鉴别双核菌丝体的重要形态特征是（）。A.锁状联合B.厚垣孢子C.担孢子D.分生孢子6.下列哪种消毒剂常用于接种箱或接种室的熏蒸消毒？（）A.75%酒精B.0.1%升汞C.甲醛+高锰酸钾D.3%来苏尔7.双孢蘑菇栽培种（三级种）培养料中，常用的主要氮源添加物是（）。A.葡萄糖B.麸皮或米糠C.石膏D.石灰8.食用菌菌种保藏中，最常用且简便的短期保藏方法是（）。A.液氮超低温保藏B.矿物油保藏法C.冰箱斜面低温保藏法D.冷冻干燥保藏法9.银耳菌丝体属于（）。A.单核菌丝B.双核菌丝C.具有锁状联合的双核菌丝D.多核菌丝10.在菌种分离中，利用子实体内部组织进行分离获得纯菌种的方法称为（）。A.孢子分离法B.组织分离法C.基质分离法D.寄主分离法11.棉籽壳培养基在灭菌前，其含水量一般控制在（）。A.40%~50%B.55%~65%C.70%~80%D.85%~90%12.平菇菌丝生长阶段对酸碱度的要求，最适pH值一般为（）。A.3.0~4.0B.5.5~6.5C.7.5~8.0D.9.0~10.013.下列哪种杂菌是食用菌制种过程中最常见的竞争性杂菌，菌落呈绿色？（）A.曲霉B.青霉C.木霉D.毛霉14.制作原种（二级种）时，容器通常采用（）。A.试管B.玻璃瓶或塑料袋C.培养皿D.三角瓶15.灭菌后的培养基，在接种前需要进行（）。A.高温培养B.低温培养C.空白培养D.干燥处理16.金针菇菌丝体在生长阶段属于（）。A.好气性B.厌气性C.兼性厌气D.严格厌气17.为了防止培养料发酸，在拌料时常加入的pH调节剂是（）。A.碳酸钙B.硫酸镁C.磷酸二氢钾D.尿素18.食用菌菌种质量检测中，“菌丝洁白、浓密、生长均匀”属于（）。A.杂菌指标B.菌丝形态指标C.出菇指标D.孢子指标19.在转接菌种时，接种工具（如接种铲、接种环）通常需要在酒精灯火焰上进行（）。A.灼烧灭菌B.烘烤C.消毒D.冷却20.草菇菌丝生长属于（）。A.低温型B.中温型C.高温型D.广温型二、多项选择题（本大题共10小题，每小题2分，共20分。在每小题列出的五个备选项中有两个或两个以上是符合题目要求的，请将其代码填在括号内。多选、少选、错选均不得分。）1.食用菌菌种根据培养阶段和来源不同，通常分为（）。A.母种B.原种C.栽培种D.液体菌种E.固体菌种2.下列属于食用菌菌种培养基主要碳源物质的有（）。A.葡萄糖B.蔗糖C.纤维素D.木质素E.淀粉3.高压蒸汽灭菌锅在使用时，必须注意的操作要点包括（）。A.排尽冷空气B.装锅不宜过满C.压力降至0时方可打开锅门D.灭菌物品间留有空隙E.可以使用饱和蒸汽4.造成食用菌菌种污染的主要原因有（）。A.培养基灭菌不彻底B.接种操作不规范C.培养环境不洁净D.菌种本身带杂菌E.培养温度过高5.鉴别食用菌菌种优劣，可以通过观察（）。A.菌丝颜色B.菌丝长势C.是否有锁状联合D.有无杂菌斑点E.培养基收缩情况6.下列属于食用菌生长发育必需的大量元素有（）。A.碳(C)B.氮(N)C.磷(P)D.钾(K)E.硫(S)7.食用菌菌种分离常用的方法有（）。A.组织分离法B.孢子分离法C.基内菌丝分离法D.寄生分离法E.土壤分离法8.关于食用菌菌种的保藏，下列说法正确的有（）。A.低温保藏可以减缓菌丝代谢速度B.继代移植次数过多会导致菌种退化C.液氮保藏需要使用保护剂D.矿物油保藏可以防止培养基干燥E.所有菌种都适合用同样的方法保藏9.在制作木腐菌（如香菇、木耳）的原种时，常用的基质材料包括（）。A.阔叶木屑B.棉籽壳C.麦粒D.玉米芯E.禽粪10.接种室或接种箱进行空间消毒常用的化学药剂有（）。A.甲醛溶液B.高锰酸钾C.煤酚皂液D.75%酒精E.气雾消毒盒三、判断题（本大题共15小题，每小题1分，共15分。请判断下列说法的正误，正确的打“√”，错误的打“×”。）1.食用菌是一类没有叶绿素，不能进行光合作用，必须依靠现成有机物质营养生活的真菌。（）2.所有的食用菌菌丝体都具有锁状联合结构。（）3.母种通常是转接到木屑或棉籽壳等固体培养基上进行扩大培养的。（）4.高压蒸汽灭菌时，冷空气排不干净会导致灭菌温度达不到要求，从而造成灭菌失败。（）5.食用菌菌种在培养过程中，一旦发现绿霉污染，应立即挑出并丢弃，不可试图用药剂处理继续使用。（）6.双孢蘑菇属于草腐菌，其栽培种培养基中可以添加一定量的经过发酵的牛粪。（）7.在制作菌种培养基时，只需加入碳源和氮源即可，不需要添加无机盐和生长因子。（）8.菌种瓶内的菌丝长满后，应尽快使用，存放时间过长会导致菌丝老化，生活力下降。（）9.紫外线灯可以对接种室空气进行表面消毒，但其穿透力弱，只能杀灭物体表面的微生物。（）10.银耳菌种由于是伴生菌，分离时必须将银耳菌丝与香灰菌丝配合才能正常生长。（）11.为了加快菌丝生长速度，可以将培养温度一直设定在菌丝生长的最适温度上限。（）12.PDA培养基（马铃薯葡萄糖琼脂培养基）是适用于绝大多数食用菌母种分离和培养的基础培养基。（）13.菌种退化主要表现为菌丝生长速度变慢、抗逆性降低、子实体产量和品质下降。（）14.液体菌种具有生长周期短、菌丝龄一致、易于分散等特点，但在固体栽培中接种技术要求较高。（）15.棉籽壳颗粒虽然细小，但透气性差，不适合单独作为香菇原种的培养料。（）四、填空题（本大题共15小题，每小题1分，共15分。请将正确的答案填在横线上。）1.食用菌菌种生产必须遵循“单一性”原则，即一个菌株或一个品种的菌种中，不允许混有其他__________或杂菌。2.在菌种分类中，一级种通常称为__________，它是用孢子分离或组织分离法获得的纯菌丝体。3.高压蒸汽灭菌的原理是利用__________释放的潜热进行灭菌。4.食用菌对水分的要求包括两个方面：一是培养料的__________，二是空气相对湿度。5.香菇属于__________结实性真菌，其子实体分化需要变温刺激。6.制作麦粒菌种时，麦粒在装瓶前必须先进行__________，以免破皮后导致培养基变粘，透气性变差。7.在显微镜下观察，__________的存在是鉴定绝大多数担子菌菌种是否为双核菌丝体的重要标志。8.食用菌菌种培养过程中，若发现棉塞受潮，容易滋生__________杂菌。9.为了补充氮源和维生素，在木屑培养基中常添加__________或米糠。10.菌种“老化”（退化）的生理基础主要是细胞内__________的积累和酶活性的改变。11.猴头菇菌丝生长阶段对光线的要求是__________（填“需光”或“避光”）。12.食用菌菌种转接的扩大倍数应根据菌种的__________和培养基的养分来决定，一般母种扩接原种倍数较低。13.在PDA培养基中，马铃薯主要提供__________和生长因子，葡萄糖提供碳源。14.常见的菌种容器封口材料中，__________具有透气性好、耐高压灭菌的特点，常用于原种和栽培种生产。15.灵芝菌丝体生长的最适pH值为__________左右。五、简答题（本大题共4小题，每小题5分，共20分。）1.简述食用菌菌种生产中“无菌操作”的关键步骤及注意事项。2.什么是菌种的“退化”？造成菌种退化的常见原因有哪些？3.简述组织分离法获得食用菌母种的基本程序。4.在食用菌菌种培养过程中，如何鉴别链孢霉（Neurosporasp.）污染？发现后应如何处理？六、综合应用题（本大题共3小题，第1小题10分，第2小题10分，第3小题10分，共30分。）1.某菌种厂在生产香菇原种时，配方为：阔叶木屑78%，麦麸20%，石膏1%，糖1%。培养基含水量控制在60%左右。(1)请计算配制100千克（干料重）该培养基所需木屑、麦麸、石膏、糖各多少千克？（2分）(2)若要求最终含水量为60%，则100千克干料需要添加多少千克的水？（计算结果保留一位小数）（4分）(3)在灭菌过程中，若使用高压蒸汽灭菌，应如何正确操作以确保灭菌彻底？（4分）2.某技术员在接种箱内进行平菇母种转接原种的操作，一周后发现部分菌种瓶内出现了橘红色或粉红色的粉末状霉斑，且蔓延速度极快。(1)请判断这是哪种杂菌污染？（2分）(2)分析造成这种污染的可能原因（至少列举三点）。（4分）(3)针对这种杂菌，应采取哪些预防和治理措施？（4分）3.某食用菌实验室引进了一批新的黑木耳菌株，需要对其进行菌种质量鉴定。(1)请列出菌种质量鉴定的主要内容包括哪些方面？（4分）(2)在显微镜下观察时，应重点关注哪些微观特征以确认其为优良的双核菌丝？（3分）(3)除了微观观察，还需要进行哪些栽培试验来验证其种性？（3分）参考答案一、单项选择题1.C2.A3.B4.C5.A6.C7.B8.C9.B10.B11.B12.B13.C14.B15.C16.A17.A18.B19.A20.C二、多项选择题1.ABC2.ABCDE3.ABD4.ABCD5.ABCDE6.ABCDE7.ABC8.ABCD9.ABCD10.ABCE三、判断题1.√2.×3.×4.√5.√6.√7.×8.√9.√10.√11.×12.√13.√14.√15.×四、填空题1.菌株2.母种3.饱和水蒸汽4.含水量5.异型6.预煮或浸泡7.锁状联合8.细菌或酵母菌9.麦麸10.有毒代谢产物11.避光12.质量级别13.碳源14.聚丙烯薄膜或透气棉塞15.5.5~6.0五、简答题1.简述食用菌菌种生产中“无菌操作”的关键步骤及注意事项。答：关键步骤及注意事项包括：(1)环境消毒：接种前对接种室、接种箱或超净工作台进行严格的空间消毒（如紫外线照射、药剂熏蒸）。(2)物品消毒：接种工具、双手、菌种管/瓶外壁需用75%酒精擦拭或浸泡消毒。(3)火焰封口：接种过程中，试管口或瓶口需在酒精灯火焰旁灼烧灭菌，并利用火焰周围的无菌区进行操作。(4)快速操作：接种动作要迅速、准确，减少暴露在空气中的时间。(5)冷却接种：灼烧后的接种工具需先接触培养基斜面或空白处冷却，防止烫死菌丝。(6)塞塞封口：接种后迅速塞回棉塞或封口膜，确保封闭严密。2.什么是菌种的“退化”？造成菌种退化的常见原因有哪些？答：菌种退化是指食用菌菌种在遗传或生理上发生变异，导致菌丝生长速度变慢、抗逆性（抗杂、抗病、抗高温等）下降、子实体产量降低、品质变差或形态异常等现象。常见原因包括：(1)自然变异：菌丝细胞内基因发生自发突变。(2)继代次数过多：长期无性繁殖导致有害基因积累。(3)培养条件不当：培养基营养不适宜、环境条件恶劣（温度、pH不适）诱导生理退化。(4)病毒感染：菌种携带真菌病毒导致性状改变。(5)异核体不稳定性：双核菌丝中不同核发生分离或单核化。3.简述组织分离法获得食用菌母种的基本程序。答：基本程序如下：(1)选种：选择生长健壮、特征典型、无病虫害的优良子实体。(2)消毒：将子实体表面用75%酒精擦拭消毒，或用0.1%升汞进行表面灭菌（时间需严格控制），随后用无菌水冲洗。(3)分离：在无菌条件下，用无菌刀切开子实体，在菌盖与菌柄交界处或菌肉中心部位切取小块（米粒大小）组织块。(4)接种：将组织块迅速移接到PDA等母种培养基斜面上。(5)培养：置于适宜温度下恒温培养，定期检查，剔除污染。(6)纯化与转管：待菌丝长出后，挑选生长健壮的菌丝进行转管纯化，获得母种。4.在食用菌菌种培养过程中，如何鉴别链孢霉（Neurosporasp.）污染？发现后应如何处理？答：鉴别特征：(1)颜色：菌落初期为白色或浅灰色，很快产生大量分生孢子，呈现橘红色、粉红色或红色的粉末状霉斑。(2)生长速度：生长极快，蔓延迅速，常能冲破封口膜或棉塞。(3)形态：分生孢子团疏松，常呈面包屑状。处理措施：(1)发现污染必须立即隔离，在孢子未飞散前用塑料袋包裹移出培养室。(2)对污染的菌种瓶（袋）进行深埋或高压灭菌后丢弃，严禁在培养室内打开。(3)对培养室进行彻底的熏蒸消毒和清洁，防止孢子残留造成二次污染。(4)检查同批次其他菌种，加强通风降湿。六、综合应用题1.(1)计算各原料用量：木屑：100kg×78%=78kg麦麸：100kg×20%=20kg石膏：100kg×1%=1kg糖：100kg×1%=1kg(2)计算加水量：设加水量为Xkg。根据含水量公式：含水量=(加水量/(干料总重+加水量))×100%即：60%=X/(100+X)0.6×(100+X)=X60+0.6X=X40=0.4XX=100所以，需要添加100千克的水。(3)高压蒸汽灭菌操作要点：①装锅：将菌种瓶摆放整齐，留有蒸汽流通空间，不可装太满。②排冷气：打开排气阀，加热至有大量蒸汽冒出（约100℃），持续排气几分钟，排尽锅内冷空气，然后关闭排气阀。③升压保压：继续加热使压力升至0.12-0.15MPa（约121-123℃），开始计时，保持该压力和温度维持30-60分钟（视瓶大小而定）。④降压取物：灭菌结束后，自然冷却至压力降至“0”，打开锅盖留一小缝，利用余热烘干棉塞，稍冷后取出。2.(1)杂菌判断：这是链孢霉（Neurosporasp.），又称脉孢霉或红色面包