第45讲　动物细胞工程

第45讲动物细胞工程核心考点考题统计考情分析1.动物细胞培养技术2025·广东卷T5

2025·湖北卷T62025·北京卷T14

2025·河北卷T132024·江苏卷T11

2024·重庆卷T101.命题特点：侧重对基本概念、原理与技术理解的考查；结合科研/医学情境考查能力与素养。2.备考重点：（1）掌握动物细胞培养的过程、条件与应用，及单克隆抗体、克隆动物的原理与应用；（2）讨论干细胞应用的潜在危险及伦理问题2.动物细胞融合和单克隆抗体的制备2025·甘肃卷T16

2025·安徽卷T142025·黑吉辽蒙卷T19

2024·江西卷T163.动物细胞核移植技术2025·山东卷T14

2025·黑吉辽蒙卷T9考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体考点三动物体细胞核移植技术与克隆动物考点一动物细胞培养目录CONTENT高考真题感悟课时跟踪检测考点一动物细胞培养1.

概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成

，然后在

适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。单个细胞

2.

动物细胞培养的条件3.

动物细胞培养的过程（1）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就贴附在培养瓶的

瓶壁上，称为细胞贴壁。细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到

表面相互接触时，细胞通常会

，这种现象称为细胞

的接触抑制。（2）原代培养：

之前的细胞培养，即动物组织经处理后的

⁠

⁠。（3）传代培养：

后的细胞培养。停止分裂增殖

分瓶

初

次培养

分瓶

4.

干细胞的培养及其应用

1.

在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养。（2025·河北卷）

（

×

）提示：动物细胞培养需95％空气＋5％CO2的气体环境。2.

从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细

胞。（2025·安徽卷）

（

×

）

提示：原代细胞。3.

体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清。（2024·江苏卷）

（

×

）提示：血清灭菌后会使其中活性物质失效。×××4.

对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞。（2024·江苏卷）

（

×

）提示：卵母细胞无法在体外产生卵细胞。5.

营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制。

（2023·海南卷）

（

×

）提示：干细胞也有接触抑制。6.

大量悬浮培养流感病毒的单克隆细胞，培养基pH不会影响单克隆细胞

的病毒产量。（2023·辽宁卷）

（

×

）提示：培养基pH会影响细胞的增殖，进而影响病毒产量。7.

培养心肌细胞的时候既需要氧气也需要二氧化碳。（2022·江苏卷）

（

√

）×××√

结合下面动物细胞培养过程，探究以下问题：（1）动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器

官，请解释原因。提示：胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛。（2）进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质

主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？为什么？提示：蛋白质。不可以。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白

酶（适宜pH约为2）在此环境中没有活性，而胰蛋白酶或胶原蛋白酶在此

环境中活性较高，因此胰蛋白酶或胶原蛋白酶适用于细胞培养时的处理。

动物细胞培养技术1.

（2025·广东高考5题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支

架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮

细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（

）A.

制备细胞悬液B.

置于5％CO2等适宜条件下培养C.

离心收集细胞D.

用胰蛋白酶消化支架后分离片层√解析：动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A不符合题意；置于5％CO2等适宜条件下培养，其中5％的CO2可维持培养液的pH，B不符合题意；在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C不符合题意；不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D符合题意。2.

（2024·黑吉辽高考14题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行

贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正

确的是（

）A.

传代培养时，培养皿需密封防止污染B.

选取①的细胞进行传代培养比②更合理C.

直接用离心法收集细胞进行传代培养D.

细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关√解析：动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的。传代培养时，培养皿不能密封，A错误。处于指数增长期的细胞形态和生理特性相对稳定，适合进行传代培养，离体培养的细胞生命力比较脆弱，需要适应培养基的环境，传代最好在细胞生长覆盖瓶底80％～90％时进行，故选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误。题干显示从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C错误。悬浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，因此，细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关，D正确。题后归纳：动物细胞培养和植物组织培养的比较干细胞培养及应用3.

（2024·江苏高考11题）我国科学家利用人的体细胞制备多能干细胞，

再用小分子TH34成功诱导衍生成胰岛B细胞。下列相关叙述错误的是

（

）A.

基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞B.

在小分子TH34诱导下，多能干细胞发生基因突变，获得胰岛素基因C.

衍生的胰岛B细胞在葡萄糖的诱导下能表达胰岛素，才可用于移植治疗

糖尿病D.

若衍生的胰岛B细胞中凋亡基因能正常表达，细胞会发生程序性死亡√解析：体细胞可以通过特定的因子导入和培养条件，基因的调控和表达模式的改变，使得原本专一功能的体细胞去分化成为多能干细胞，即基因选择性表达被诱导改变后，可使体细胞去分化成多能干细胞，A正确；小分子药物通常是通过调节现有的生物通路和基因表达来实现其功能，而胰岛素基因在人体所有细胞中都存在，但只有在胰岛细胞中才会表达，所以多能干细胞在诱导分化的过程中不会突然发生基因突变获得胰岛素基因，B错误；胰岛B细胞受到较高的血糖浓度的刺激分泌胰岛素，胰岛素降低血糖浓度，所以衍生的胰岛B细胞需在葡萄糖的诱导下成功表达胰岛素，以确保衍生的胰岛B细胞能够正常发挥功能，才可用于移植治疗糖尿病，C正确；细胞凋亡的实质就是一种由遗传机制决定的细胞的程序性死亡，衍生的胰岛B细胞中凋亡基因的正常表达会导致衍生的胰岛B细胞发生程序性死亡，D正确。4.

★（2025·青海西宁模拟）图示科研人员利用多能干细胞（iPS细胞）培

养多种细胞的相关流程。下列叙述正确的是（

）A.

重编辑过程提高了体细胞的分化程

度和分裂能力B.

过程①中需5％CO2促进iPS细胞的

呼吸C.

过程②中需导入不同的基因诱导分化形成不同的组织D.

使用iPS细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题√解析：重编辑过程是将分化体细胞重编程为iPS细胞，iPS细胞具有多能性，该过程降低了体细胞的分化程度，使其具有更强的分裂和分化能力，而不是提高了体细胞的分化程度，A错误；过程①培养iPS细胞时，5％CO2的作用是维持培养液的pH，而不是促进iPS细胞的呼吸，B错误；过程②是iPS细胞分化形成不同的体细胞，由于不同组织细胞的形成是基因选择性表达的结果，所以需导入不同的诱导分化因子诱导iPS细胞分化形成不同的组织，C错误；iPS细胞可以分化形成各种组织和器官，使用iPS细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题，D正确。考点二动物细胞融合技术与单克隆抗体1.

动物细胞融合技术教材拾遗：〔选择性必修3

P48“相关信息”〕灭活病毒诱导细胞融合的原

理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，

使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打

开，细胞发生融合。2.

单克隆抗体及其应用（1）传统抗体的获得①方法②缺点：产量低、

低、

差。纯度

特异性

（2）单克隆抗体的制备（3）单克隆抗体的特点和应用

1.

利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合。（2025·河北卷）

（

√

）2.

研究者制备单克隆抗体过程要筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞。

（2023·北京卷）

（

×

）提示：单个杂交瘤细胞仅能分泌一种抗体。3.

有的病毒经灭活处理后，可用于细胞工程中介导动物细胞的融合。

（2020·浙江卷）

（

√

）√×√

1.

在合成核苷酸的两个途径中，物质A可以阻断其中的全合成途径（如

图）。B淋巴细胞中含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，但B淋巴细

胞一般不分裂增殖，在培养基中仅能存活5～7天。制备单克隆抗体选用的

骨髓瘤细胞缺乏转化酶。用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛

选杂交瘤细胞的原理是什么？提示：骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行图中两个途径而在HAT培

养基上不能增殖，B淋巴细胞因存活时间有限，故无需筛选；杂交瘤细胞

由于可以进行补救合成途径，能在HAT培养基上大量增殖2.

癌症的治疗过程会出现各种副作用，为降低肺癌治疗药物的副作用，科

研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），

过程如图1所示。（1）已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在体外融合时需要诱导，与诱导植

物原生质体融合不同的是图中还可用

法诱导融合。灭活病毒诱导

（2）单克隆抗体是ADC中的

（填“a”或“b”）部分。（3）“第1次筛选”用特定的选择培养基筛选出来的细胞具有

⁠

的特点。a

既能产生

抗体，又能无限增殖

（4）研究发现，ADC在患者体内的作用如图2所示。①ADC进入肺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终

作用于

，可导致癌细胞凋亡。细胞核

②ADC能降低肺癌治疗药物的副作用，是因为

⁠

⁠

⁠

⁠。ADC中单克隆抗体能精确

的定位癌细胞，让药物作用于肺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低肺

癌细胞治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应。且

单克隆抗体具有灵敏度高的特征，小剂量使用药物就可以有效地治疗疾病

动物细胞融合技术与单克隆抗体1.

（2024·福建高考1题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原为

靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列叙

述错误的是（

）A.

该试剂盒的研制过程应用了动物细

胞融合技术B.

该试剂盒的检测原理为抗原抗体的

特异性结合C.

该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤D.

该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测√解析：该试剂盒的研制属于单克隆抗体在临床上的应用，单克隆抗体的制备过程需要应用动物细胞融合技术获得杂交瘤细胞，A正确；该试剂盒利用了单克隆抗体特异性强的优点，其能与特定抗原发生特异性结合，B正确；该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，采集尿液样本不会对受检者造成创伤，C正确；单克隆抗体特异性强，不可用于其他类型病毒性肝炎的检测，D错误。2.

（2022·辽宁高考25题节选）N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图。（1）用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用

⁠

酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的

⁠

中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。胰蛋

白酶或胶原蛋白

CO2培

养箱

解析：进行动物细胞培养时，需要取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，制成细胞悬液，置于含有95％空气和5％的CO2混合气体的CO2培养箱中培养。（2）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其

接种到96孔板，进行

培养。用

⁠技术检测每

孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂

交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集

，提取单克隆抗体。解析：用选择培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测。用抗原—抗体杂交技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集细胞培养液，提取单克隆抗体。克隆化

抗原—抗体杂交

细胞培养液

（3）利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成

⁠

，实现特异性治疗。解析：利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成抗体—药物偶联物（ADC），实现特异性治疗。抗体—药物偶联物

（ADC）

考点三动物体细胞核移植技术与克隆动物1.

概念、原理及类型2.

体细胞核移植的过程提醒：（1）动物细胞核移植技术，体现了动物细胞核的全能性而非细胞

的全能性。（2）克隆属于无性繁殖，产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本

一致。（3）核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因：a.克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵母细胞；b.性状受环境的影响；c.在个体发育过程中有可能发生基因突变。（4）受体细胞选用卵母细胞的原因是卵母细胞体积大，易操作；去核时易于同时吸走第一极体；卵母细胞中含有激发细胞核全能性的物质。教材拾遗：（1）〔选择性必修3

P52“相关信息”〕减数分裂Ⅱ中期卵母细

胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物。（2）〔选择性必修3

P54“相关信息”〕目前动物细胞核移植技术中普遍

使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射

和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下

去核或使其中的DNA变性。3.

体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题

细胞工程的各种技术手段及其原理总结

动物体细胞核移植技术和克隆动物1.

（2025·山东高考14题）利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过

程如图所示，下列说法错误的是（

）A.

对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多

的卵母细胞B.

卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行C.

培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液D.

可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛√解析：对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移植操作，A正确；卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误；在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C正确；PCR技术可以扩增特定的DNA片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA片段，就可以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。2.

（2025·黑吉辽蒙高考9题）研究显示，约70％的小鼠体细胞核移植胚胎

未能成功发育至囊胚期，且仅有约2％的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发

育。下列叙述错误的是（

）A.

体细胞核进入去核的M

Ⅱ期卵母细胞形成重构胚B.

移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功

能状态C.

胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内

孵化D.

为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植√解析：移植前胚胎发育率低，一方面可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，另一方面可能是对动物胚胎进行操作的技术尚不完善，B正确；早期胚胎是在透明带内进行孵化的，C错误；动物胚胎细胞分化程度低，胚胎细胞核全能性较体细胞核更高，为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。高考真题感悟一、命题角度练角度一以动物细胞培养或干细胞为情境，考查生命观念、科学思维与科

学探究1.

（2025·湖北高考6题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感疫

苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于生

产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获得

一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞——

XF06。下列叙述错误的是（

）A.XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率B.

细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染C.

可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒D.

采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染√解析：根据题意，与贴壁生长的细胞培养相比，XF06悬浮培养能更充分利用空间，提高细胞密度，从而提升生产流感疫苗的效率，A正确；细胞贴壁生长特性的改变可能是遗传物质发生改变导致的，不是流感病毒感染导致的，B错误；细胞裂解液中，流感病毒和其他细胞裂解物的密度、质量等性质不同，可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒，C正确；根据题意可知，无成瘤性MDCK细胞经多代培养不会发生癌变，采用无成瘤性细胞生产疫苗，能避免疫苗中有致瘤DNA的污染，D

正确。2.

（2022·福建高考3题）我国科研人员在航天器微重力环境下对多能干细

胞的分化进行了研究，发现与正常重力相比，多能干细胞在微重力环境下

加速分化为功能健全的心肌细胞。下列叙述错误的是（

）A.

微重力环境下多能干细胞和心肌细胞具有相同的细胞周期B.

微重力环境下进行人体细胞的体外培养需定期更换培养液C.

多能干细胞在分化过程中蛋白质种类和数量发生了改变D.

该研究有助于了解微重力对细胞生命活动的影响√解析：

连续分裂的细胞才有细胞周期，心肌细胞已经高度分化，不能

再分裂，没有细胞周期，A错误；进行细胞的体外培养需定期更换培养

液，避免代谢废物对细胞的毒害作用，B正确；分化过程的本质是基因的

选择性表达，故多能干细胞在分化过程中蛋白质种类和数量发生了改变，

C正确；由题意可知，多能干细胞在微重力环境下能加速分化，所以该研

究有助于了解微重力对细胞生命活动的影响，D正确。3.

（2025·甘肃高考16题）肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如图。下列叙述正确的是（

）角度二以细胞融合或单克隆抗体制备，核移植为情境，考查科学探究与

社会责任A.

①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞B.

②含未融合细胞、同种核及异种核融合

细胞C.

③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞D.

④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测√解析：骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；B细胞和骨髓瘤细胞的融合是随机的，可能有些细胞不发生融合，有些两两融合，有些多个融合，有同种核融合细胞，也有异种核融合细胞，B正确；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的杂交瘤细胞，C错误；④过程需在96孔培养板中进行克隆化培养和抗体检测，D错误。二、长句表达练4.

（2023·湖北卷22题节选，教材P48“相关信息”）添加脂溶性物质PEG

可促进细胞融合，该过程中PEG对细胞膜的作用是

⁠

⁠。使细胞接触处的磷脂

分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合

课时跟踪检测1.

（2025·北京高考14题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时，

调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是

（

）A.

必需氨基酸B.

抗生素C.

酸碱指示剂D.

血清解析：根据题中信息可知，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色，说明培养基颜色变化是由pH变化引起的，推断使培养基呈淡红色的是酸碱指示剂，C符合题意。12345678910√2.

（2025·河北高考13题）生物工程在社会生产中的应用日益广泛，下列

相关技术和方法错误的是（

）A.

利用组织培养技术实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持B.

在没有CO2的有氧环境中进行胚胎干细胞培养C.

利用灭活病毒诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合D.

对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵用于胚胎制备√12345678910解析：利用植物组织培养技术（无性繁殖）可实现兰花的快速繁殖和优良性状的保持，A正确；胚胎干细胞的培养需要CO2维持培养液的pH（动物细胞培养的气体环境为含有95％空气和5％CO2的混合气体），B错误；诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，C正确；应用促性腺激素可使供体母牛超数排卵，以获得更多的卵母细胞用于胚胎制备，D正确。123456789103.

（2025·安徽高考14题）细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域

得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（

）A.

从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞B.

将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞C.

将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗

体的细胞D.

采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细

胞未发生分化√12345678910解析：从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为原代细胞，A错误；将特定基因或将特定蛋白导入已分化的T细胞可诱导其形成iPS细胞，B正确；将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后形成的细胞不一定是能分泌所需抗体的细胞，如骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合形成的细胞，C错误；囊胚期的细胞已开始分化，D错误。123456789104.

（2025·湖北名校联考）诱导多能干细胞（iPSC）可分化成类似间充质

干细胞（iMSC）。iMSC能合成和分泌V蛋白，用于治疗骨关节炎等疾

病。下列叙述错误的是（

）A.

可用病毒作为载体将某些基因转入小鼠成纤维细胞以诱导产生iPSCB.iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSCC.

利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细胞，并添加

V蛋白D.iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、pH、渗透压和气体环境等

条件√12345678910解析：科学家已尝试采用多种方法来制备iPSC，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPSC，因此可用病毒作为载体将某些基因转入小鼠成纤维细胞以诱导产生iPSC，A正确；诱导细胞分化需要培养过程中加入添加特定的物质（分化诱导因子）才能使其发生分化，因此iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC，B正确；利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细胞，通过抗原—抗体杂交法检测，但是不需要添加V蛋白，C错误；根据动物细胞培养的条件，iMSC培养液需定期更换，以便清除代谢物，防止代谢物的积累对细胞造成危害，并维持适宜温度、pH、渗透压和气体环境等条件，以维持细胞正常的生存和代谢，D正确。123456789105.

（2025·辽宁沈阳三模）精准爆破肿瘤细胞的“生物导弹”即抗体—药

物偶联物（ADC）能对肿瘤细胞进行选择性杀伤，该物质由抗体、药物

（如细胞毒素）和接头三部分组成，其作用机制如图所示。下列叙述错误

的是（

）A.ADC通过主动运输进入肿瘤细胞，

需要消耗细胞代谢产生的ATPB.ADC中抗体的制备过程运用了动物

细胞培养和动物细胞融合等技术手段C.ADC中的抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合D.ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡，从而杀伤肿瘤细胞√12345678910解析：ADC通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，需要消耗细胞代谢产生的ATP，A错误；ADC中抗体的制备过程运用了动物细胞培养（动物细胞工程的基础）和动物细胞融合（涉及B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合）等技术手段，B正确；ADC中的抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合，因而抗体—药物偶联物（ADC）对正常细胞的损害较小，对机体的副作用较小，C正确；由图可知，药物在肿瘤细胞内被释放并起作用，加速肿瘤细胞的凋亡，从而杀伤肿瘤细胞，D正确。123456789106.

（2022·山东高考15题）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克

隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。

下列说法错误的是（

）A.

双抗可同时与2种抗原结合B.

利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.

筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使

用的2种抗原D.

同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞√12345678910解析：双抗同时含有抗体1和抗体2的部分结构，可同时与2种抗原结合，A正确；根据抗体与抗原特异性结合的特点，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，B正确；筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原，才能刺激B细胞产生两种抗体，C正确；双抗是在体外解偶联后重新偶联获得的，同时注射2种抗原可刺激B细胞分化产生抗体1和抗体2的浆细胞，但不能产生双抗的浆细胞，D错误。123456789107.

（2025·辽宁辽阳模拟）科研人员在制备杂交瘤细胞的过程中，获得了

能够产生双特异性抗体（简称双抗）的双杂交瘤细胞，双抗可以同时结合

两种抗原。如图是抗EGFR/CD3双特异性抗体作用结果的示意图，该双抗

既能与肿瘤细胞表面的受体EGFR结合，也能与T细胞表面的抗原CD3结

合。已知颗粒酶、穿孔素是T细胞分泌的细胞因子，能促进肿瘤细胞的凋

亡。下列说法正确的是（

）12345678910A.

将两种抗原分别注射到小鼠体内产生细胞免疫以制备双抗B.T细胞分泌颗粒酶和穿孔素促进肿瘤细胞的凋亡，体现了免疫监视功能C.

分离出两种T细胞并与瘤细胞结合，能获得可产生双抗的双杂交瘤细胞D.

抗EGFR/CD3双特异性抗体能同时与两种细胞结合，说明抗体不具有专

一性√12345678910解析：

为了制备抗EGFR/CD3双特异性抗体，科研人员需要将抗原CD3

注射到小鼠体内产生B淋巴细胞，制备产生抗CD3抗体的杂交瘤细胞，将

抗原EGFR注射到小鼠体内产生B淋巴细胞，制备产生抗EGFR抗体的杂交

瘤细胞，然后通过一定的方法诱导两种杂交瘤细胞融合，从而得到双杂交

瘤细胞，该过程涉及体液免疫，A、C错误；免疫监视是指机体识别和清除

突变的细胞，防止肿瘤发生的功能，所以T细胞分泌颗粒酶和穿孔素促进

肿瘤细胞的凋亡，体现了免疫监视功能，B正确；抗EGFR/CD3双特异性抗

体能与肿瘤细胞表面的受体EGFR结合，同时又能与T细胞表面的抗原CD3

结合，该抗体仍然具有专一性，D错误。12345678910

8.

（2025·山东泰安模拟）双抗体夹心法是医学上常用的检测抗原含量的方法，流程如图所示。其中固相抗体是经由固相载体连接后的单克隆抗体，酶标抗体是一种具酶活性的抗体，二者可与抗原的不同部位特异性结合。下列有关分析错误的是（

）A.

固相抗体的使用量应明显多于待测抗原的数量B.

酶标抗体作用是与待测抗原结合并催化其分解C.

制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术D.

若不洗去游离的酶标抗体会导致测量结果偏高√12345678910解析：固相载体连接后的单克隆抗体，具有特异性，故其使用量应明显多于待测抗原的数量才能识别并结合更多的抗原，A正确；酶标抗体可与抗原特异性结合，并催化指示底物分解，B错误；制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术，C正确；若不洗去游离的酶标抗体，酶标抗体持续催化底物分解，会导致测量结果偏高，D正确。123456789109.

（2025·黑吉辽蒙高考19题）如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（

）A.

步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞B.

步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液C.

步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性D.

步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞√12345678910解析：本实验的目的为制备抗IL-6单克隆抗体。步骤①：用IL-6对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误；步骤②：在脾组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，制成单细胞悬液；胃蛋白酶的适宜pH为1.5，而动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，在此环境下胃蛋白酶会失活，B错误；步骤③：诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，可以用灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性，C正确；步骤④：目的是筛选出杂交瘤细胞，应通过特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才会生长；步骤⑤：经过克隆化培养和抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞，D错误。1234567891010.

（2025·湖北宜昌模拟）“中中”和“华华”克隆猴的成功培育标志着

我国非人灵长类疾病动物模型研究处于国际领先水平。“中中”和“华

华”的克隆流程如图1所示，请回答：（1）图1中从卵巢中采集的细胞a需在体外培养至

⁠期才能用于体细胞核移植等；目前使用的去核方法除了显微操作去核法，还有梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等，与前者比较，后面的这些方法所具有的特点是