生物安全实验室管理指南(试行)

生物安全实验室管理指南(试行)1总则1.1编制依据本指南依据《中华人民共和国生物安全法》《病原微生物实验室生物安全管理条例》《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）《生物安全实验室建筑技术规范》（GB50346-2011）《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》等法律法规及国家强制标准编制，适用于各级各类从事病原微生物实验操作、样本检测、菌毒种保藏等活动的生物安全实验室（以下简称“实验室”），包括BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4四个等级的民用、医用、科研类实验室。1.2管理目标以“预防为主、分级负责、全员参与、全程管控”为核心原则，全链条防控实验室生物安全风险，防止病原微生物泄漏、扩散，保障实验人员、公众健康及生态环境安全，杜绝重大及以上生物安全事件发生。1.3责任体系实验室设立单位是生物安全第一责任主体，实验室主要负责人是本实验室生物安全第一责任人，需指定专职生物安全管理员负责日常管理工作，其中BSL-3、BSL-4级实验室需配备不少于2名具备5年以上生物安全管理经验的专职管理员，所有从业人员按“谁操作谁负责”的要求承担对应岗位的生物安全责任。2分级准入管理2.1实验活动范围限定2.1.1BSL-1级实验室仅可开展已知不会导致健康成人致病的病原微生物操作，包括非致病性大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、灭活疫苗效力检测等无感染风险的实验活动，无需特殊生物安全审批。2.1.2BSL-2级实验室可开展中等个体风险、有限群体风险的病原微生物操作，包括沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、流感病毒减毒株、新冠病毒灭活样本核酸检测、结核分枝杆菌灭活样本检测等活动，涉及活病原操作的项目需经本单位生物安全委员会审批后开展，禁止从事高致病性病原微生物活株操作。2.1.3BSL-3级实验室可开展高个体风险、低群体风险的病原微生物操作，包括结核分枝杆菌活株、新冠病毒活病毒、高致病性禽流感病毒、布鲁氏菌等高致病性病原的分离培养、动物实验、毒株保藏等活动，实验室需取得省级以上卫生健康或农业农村主管部门颁发的生物安全资质，所有实验活动需提前报属地生物安全主管部门备案。2.1.4BSL-4级实验室可开展高个体风险、高群体风险、无有效预防治疗手段的病原微生物操作，包括埃博拉病毒、拉沙热病毒、马尔堡病毒等四级病原实验活动，实验室需取得国家卫生健康委员会颁发的生物安全资质，所有实验活动需提前报国家生物安全主管部门审批。2.2超范围活动禁令严禁低等级实验室开展高等级病原微生物实验活动，严禁无资质实验室从事高致病性病原相关操作，严禁未经审批开展新型病原微生物的增益功能研究。3人员管理3.1准入要求3.1.1所有进入实验室的人员需完成不少于40学时的生物安全基础培训，经理论+实操考核合格（满分100分，合格线80分）后取得对应等级实验室准入资格，考核成绩存档不少于3年。3.1.2BSL-3级及以上实验室从业人员需具备不少于1年的BSL-2级实验室操作经验，经过对应等级实验室专项实操培训，完成不少于3次的个人防护装备穿脱、应急处置模拟演练，考核合格后方可上岗，上岗前需完成基础健康检查，建立个人健康档案，每年至少开展1次职业健康体检，患有免疫缺陷疾病、呼吸道慢性疾病、开放性伤口的人员禁止进入高等级实验室，孕妇、未成年人禁止进入BSL-3级及以上实验室。3.1.3外来人员进入实验室需提前提交申请，明确出入事由、活动范围、停留时间，经实验室主要负责人批准后，由本实验室在岗人员全程陪同，禁止外来人员独立开展实验操作。3.2人员培训3.2.1实验室每年组织不少于16学时的生物安全继续教育，其中实操培训占比不低于60%，培训内容涵盖最新法律法规、风险评估方法、个人防护规范、菌毒种管理要求、泄漏事件处置、应急救援流程等，所有从业人员年度培训覆盖率100%，考核通过率100%，未完成培训或考核不合格的人员暂停上岗资格。3.2.2引入新的实验技术、接触新的病原微生物前，需针对相关风险开展专项培训，考核合格后方可开展相关操作。3.3出入管控所有人员出入实验室需实名登记，记录姓名、单位、出入时间、从事活动、陪同人员信息，BSL-3级及以上实验室实行双人准入制度，严禁单人进入核心实验区，门禁权限仅限本人使用，禁止转借、冒用他人门禁卡。4设施设备管理4.1日常运维要求4.1.1BSL-1、BSL-2级实验室每周至少开展1次设施设备巡查，BSL-3、BSL-4级实验室每日开展巡查，重点检查生物安全柜、高压灭菌器、负压通风系统、门禁系统、应急喷淋、洗眼器、温湿度监控设备运行状态，其中BSL-2级实验室通风系统换气次数不低于6次/小时，BSL-3级实验室核心区换气次数不低于12次/小时，核心区相对于缓冲区负压差不低于10Pa，相对于外界大气压不低于-30Pa，负压参数24小时连续监控，监控记录存档不少于1年。4.1.2洗眼器、应急喷淋装置每月启动测试1次，确保出水正常，水压符合要求，应急照明设备每月测试1次，续航能力不低于90分钟。4.2校准检定要求4.2.1生物安全柜每年委托具备CMA资质的机构开展1次性能校准，重点检测气流速度、气流模式、气密性、过滤效率，校准合格后方可继续使用，使用前需开启紫外灯消毒30分钟，风机运行10分钟后再开展操作，使用后用1000mg/L含氯消毒剂擦拭台面，开启紫外灯消毒30分钟，使用记录存档不少于1年。4.2.2高压灭菌器每半年委托市场监管部门开展1次强制检定，每次灭菌操作需放置嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂进行生物验证，灭菌合格率需达到100%，灭菌参数为121℃、103kPa、作用时长不少于30分钟，灭菌记录存档不少于3年。4.2.3移液器每3个月校准1次，误差范围不超过±0.5%，储存菌毒种的医用低温冰箱（-70℃）温度控制在-70±5℃，普通低温冰箱（-20℃）温度控制在-20±2℃，冷藏冰箱（2-8℃）温度波动不超过±1℃，每日至少记录2次温度数据，温度异常时需第一时间转移样本并排查故障。4.3报废处置要求接触过病原微生物的设备报废前需完成彻底消毒灭菌，生物安全柜报废需采用甲醛+高锰酸钾熏蒸消毒24小时，采样检测无存活病原后方可拆除，高压灭菌器报废需对腔体、管路、密封圈进行全面消毒，残留污物按感染性废弃物处置，消毒记录存档不少于3年。5实验活动管理5.1事前审批与风险评估开展病原相关实验活动前需提交实验方案、风险评估报告，明确病原种类、操作流程、风险点、防控措施、应急处置预案，BSL-2级实验活动由生物安全管理员审批，BSL-3级及以上实验活动由实验室负责人组织不少于3名生物安全专家评审通过后审批，涉及高致病性病原的实验活动需提前报属地生物安全主管部门备案。风险评估需覆盖病原传播途径、致病力、操作环节气溶胶产生风险、人员防护能力、设施设备保障能力，风险等级与实验室防护等级不匹配的项目不得开展。5.2操作过程管控所有可能产生气溶胶的操作（离心、吹打、研磨、混匀、开管、动物解剖）必须在生物安全柜内开展，离心操作需使用密封离心桶，离心结束后静置不少于10分钟再打开离心机盖，若发生离心管破裂需立即关闭离心机，静置30分钟后按泄漏处置流程处理。实验过程中所有样本、试剂、菌液需标注清晰名称、浓度、制备日期、危害等级，无标识或标识模糊的物品一律按感染性废弃物处置，严禁在实验区进食、饮水、化妆、存放个人物品，实验产生的所有物品未经消毒不得带出实验区。5.3记录管理所有实验活动需实时记录，内容包括实验时间、操作人员、病原名称、操作内容、设备编号、废弃物处置情况、异常事件及处理措施，记录需清晰可追溯，不得涂改、伪造，普通实验记录存档不少于5年，高致病性病原相关实验记录永久存档。6菌毒种及生物样本管理6.1保藏管理菌毒种及阳性生物样本实行专人保藏、双人双锁管理，保藏场所安装24小时视频监控、入侵报警系统，监控记录存档不少于90天。建立菌毒种台账，内容包括编号、名称、来源、分离时间、代次、数量、储存位置、领用/归还记录，账实相符率需达到100%。BSL-1、BSL-2级实验室仅可保藏对应危害等级的菌毒种，严禁保藏高致病性病原微生物菌毒种，高致病性菌毒种需由国家级或省级指定保藏中心统一保藏。6.2领发与运输管理领用菌毒种需提交申请，明确用途、使用量、使用地点，经实验室主要负责人审批后双人领取、双人签字确认，领用量不得超过1个月的使用量，剩余菌毒种需及时退回保藏库，严禁私自留存、转送、赠与其他单位或个人。跨区域运输高致病性菌毒种需取得省级以上生物安全主管部门颁发的准运证，使用符合UN2814/UN3373标准的运输包装，由2名以上专业人员押运，全程监控温度、位置，运输记录存档不少于3年。6.3销毁管理废弃菌毒种、阳性样本需经121℃高压灭菌30分钟，采用生物指示剂验证灭菌合格后，按感染性废弃物处置，销毁过程需2人在场，记录销毁时间、种类、数量、处理方式、操作人员，记录存档不少于10年，严禁未经消毒销毁感染性样本及菌毒种。7生物安全废弃物管理7.1分类收集实验室废弃物按感染性、损伤性、化学性、病理性四类分类收集，感染性废弃物放入带有生物安全标识的黄色专用垃圾袋，装量不超过容器的3/4，采用鹅颈结封口后表面喷洒1000mg/L含氯消毒剂消毒；损伤性废弃物放入防穿刺的黄色锐器盒，装量不超过3/4后密封，严禁重复使用锐器盒；化学性废液单独收集，标注成分、浓度、产生时间，严禁与感染性废液混合。7.2暂存与转运实验室设置专用废弃物暂存区，配备温控、监控、消毒设施，温度控制在2-8℃，感染性废弃物暂存时间不超过48小时，暂存区每日用1000mg/L含氯消毒剂消毒2次，消毒记录存档不少于1年。内部转运采用密封专用转运箱，转运路线避开人员密集区域，转运人员穿戴防护服、手套、N95口罩，外部转运需委托具备医疗废弃物处置资质的机构开展，转移联单存档不少于3年。7.3废液处置感染性废液需加入含氯消毒剂至总浓度不低于5000mg/L，作用不少于2小时，经检测无存活病原后可排入市政污水处理系统，化学性废液、有机试剂废液需委托具备危废处置资质的机构处理，严禁直接排放。8应急管理8.1预案与演练实验室需制定生物安全事件专项应急预案，覆盖病原泄漏、人员感染、设施故障、自然灾害四类场景，明确处置流程、责任分工、上报渠道，BSL-1、BSL-2级实验室每年至少开展1次应急演练，BSL-3、BSL-4级实验室每半年至少开展1次应急演练，演练后开展效果评估，及时修订预案，演练记录存档不少于5年。8.2事件分级与处置8.2.1一般事件：BSL-1、BSL-2级实验室发生少量非致病性或中等致病性病原泄漏，未造成人员感染的，第一发现人立即停止操作，做好个人防护，用5000mg/L含氯消毒剂对泄漏区域消毒30分钟，24小时内上报本单位生物安全委员会。8.2.2较大事件：BSL-2级实验室发生高致病性病原泄漏、或BSL-3/4级实验室发生少量病原泄漏，可能造成人员感染的，第一发现人立即关闭实验区，控制现场，10分钟内上报生物安全管理员和实验室负责人，对接触人员开展对应病原潜伏期的医学观察，2小时内上报属地卫生健康、生态环境主管部门。8.2.3重大事件：发生高致病性病原泄漏、出现人员感染症状、或存在病原扩散至社区风险的，第一发现人立即上报实验室负责人，1小时内上报属地卫生健康、公安、生态环境主管部门，配合开展流行病学调查、环境消杀、人员救治工作，严禁迟报、瞒报、漏报。8.3应急物资储备实验室配备不少于30天使用量的个人防护装备、消毒药剂、应急药品、通讯设备、急救物资，每月盘点1次，及时补充过期、不足的物资，确保应急状态下可随时调用。9监督考核与持续改进9.1日常监督生物安全管理员每日开展日常巡查，每周开展1次全面检查，重点排查人员操作不规范、设备运行异常、废弃物处置不达标、记录缺失等隐患，发现问题立即下达整改通知书，明确整改时限、责任人，整改完成后逐一验收，隐患整改闭环率需达到100%，检查及整改记录存档不少于3年。9.2考核问责每年开展1次生物安全管理专项考核，考