生物多样性保护技术指南（试行）

生物多样性保护技术指南（试行）1总则1.1编制目的为规范全国生物多样性保护的技术流程，统一技术标准，提升保护行动的科学性与效能，落实《昆明-蒙特利尔全球生物多样性框架》2030年全球保护目标，遏制本土生物多样性下降趋势，保障生态安全，特制定本指南。1.2适用范围本指南适用于各级生态环境、林业和草原、农业农村、自然资源等主管部门开展的生物多样性调查、保护、修复、监测类项目，也可供科研机构、社会组织、企业开展的生物多样性相关公益项目、可持续经营项目参考使用。1.3基本原则坚持科学性优先，所有技术措施需经过同行验证或野外试点确认有效性；坚持系统性保护，统筹生态系统、物种、遗传多样性三个层次的保护需求；坚持本土物种优先，优先采用本土种质资源，严格管控外来物种引入风险；坚持多方协同，建立政府、科研机构、社区、公众共同参与的保护机制；坚持风险防控，所有保护行动需预先开展环境影响评估，避免次生生态破坏。2本底调查与评估技术2.1类群调查技术2.1.1维管植物调查：森林生态系统样方设置为20m×20m，灌丛生态系统为10m×10m，草原、草甸、荒漠生态系统为1m×1m，湿地水生植物样方为0.5m×0.5m，每个群落类型至少设置3个重复样方，样方间距不小于样方边长的5倍。调查内容包括物种名称、多度、盖度、高度、频度、生活型，针对国家重点保护野生植物、极小种群野生植物，需额外记录种群个体数量、年龄结构、生境特征、受威胁情况，采集凭证标本存入具备国家资质的标本馆，同步采集叶片组织样本存入-80℃超低温种质资源库，每个物种至少采集10份不同种群的遗传样本。2.1.2陆生脊椎动物调查：兽类调查采用红外相机触发监测法，林区布设密度为每1-2km²1台，草原、湿地布设密度为每3-5km²1台，山地、峡谷等异质性高的区域可适当加密至每0.5km²1台，相机安装高度距地面0.5-1.2m，避开直射阳光与人为活动频繁区域，连续布设时长不少于3个月，全年累计监测时长不少于180天。鸟类调查采用样线法与样点法结合，样线长度设置为1-3km，调查宽度为单侧25-50m，行进速度控制在1-2km/h，每季度调查1次，繁殖期（3-7月）额外增加1次繁殖种群调查，调查时间为日出后3小时内或日落前2小时内。两栖爬行类调查采用样带踏查法，繁殖期（4-9月）以夜间调查为主，样带长度1-2km，宽度为两侧各5m，记录物种种类、数量、生境类型，调查过程中避免对物种造成损伤。2.1.3水生生物调查：鱼类调查采用刺网、地笼、电捕法（仅限非禁捕区）结合，捕捞后需对物种进行识别计数，非科研采样需立即原地放归，损伤率控制在5%以下；大型底栖生物采用0.05m²采泥器采样，每个采样点设置3个重复，采集后用0.5mm筛网冲洗，固定后鉴定；环境DNA（eDNA）调查可作为补充技术，每位点采集1L表层水样，经0.45μm微孔滤膜过滤后提取DNA，扩增COI、16SrRNA等标准基因片段，与本土物种基因库比对，可实现区域内物种快速检测，检测效率较传统方法提升60%以上。2.1.4微生物调查：土壤微生物调查采用混合采样法，每100m²范围内设置5个采样点，采集0-20cm表层土壤，混合后取1kg样品，4℃低温保存，采用16SrRNA（细菌）、ITS（真菌）高通量测序技术检测群落结构；水体微生物每位点采集500ml水样，过滤后同法检测。2.2多样性评估技术2.2.1物种濒危等级评估采用IUCN红色名录评估标准（3.1版），结合《国家重点保护野生动植物名录》《中国生物多样性红色名录》开展评估，种群规模小于1000个成熟个体的野生植物、小于500个成熟个体的野生动物，纳入极小种群保护名录。2.2.2遗传多样性评估采用SSR、SNP分子标记技术，针对极小种群物种，每种群至少检测30个个体的10个以上SSR位点或1000个以上SNP位点，期望杂合度低于0.3的种群列为最高遗传风险等级，优先开展遗传拯救。2.2.3生态系统质量评估采用InVEST模型、景观格局指数法，评估指标包括生态系统面积、连通性、服务功能价值，连通性采用斑块连通度指数（CONNECT）、生态廊道连接度衡量，CONNECT指数低于0.2的生态系统列为高破碎化等级，优先开展连通性修复。2.2.4适生区评估采用MaxEnt最大熵模型，纳入气候、地形、植被、人类活动等15个以上环境变量，测试集AUC值不低于0.75方可采用，评估结果用于保护地规划、物种回归地选择。2.3威胁因子评估技术2.3.1栖息地破坏威胁评估采用土地利用变化监测数据，近5年栖息地面积减少超过30%的列为极高威胁等级。2.3.2外来入侵物种威胁评估采用发生面积、危害率、扩散速率三个指标，危害率超过30%、年扩散速率超过10km的列为极高风险等级，优先开展防除。2.3.3人为活动威胁评估采用人类足迹指数（HFI），HFI高于0.6的区域列为高人为干扰区域，优先开展管控。3就地保护技术3.1保护地体系优化技术3.1.1按照“30×30”保护目标要求，至2030年至少将30%的陆地、内陆水域、海洋区域纳入自然保护地体系，保护地布局需覆盖90%以上的国家重点保护野生动植物物种、典型生态系统类型。3.1.2生态廊道构建技术：针对大型兽类（如大熊猫、亚洲象、虎等）的生态廊道宽度不低于1km，廊道范围内保留原生植被，禁止商业性开发、道路修建等人为活动；针对中小型兽类、两栖爬行类的生态廊道宽度不低于50m，廊道内设置倒木、石块、临时水坑等隐蔽与补给设施；针对洄游鱼类的生态廊道（鱼道）坡度不超过5%，设置不同流速的洄游通道，过鱼效率不低于70%。3.1.3保护地分区管控：核心保护区严格禁止任何人为活动，除经批准的科研监测活动外，不得进入；缓冲区仅可开展非破坏性的科研监测、标本采集活动；实验区可开展不破坏生境的生态体验、生态产业活动，人为活动强度控制在生态承载力的80%以下。3.2极小种群物种就地保护技术针对极小种群物种建立专门保护小区，保护小区面积需覆盖物种核心生境的120%以上，减少边缘效应影响；每个保护小区设置至少2名专职管护人员，每月巡查不少于4次，针对盗采盗猎、生境破坏等威胁开展常态化管控；针对种群规模小于100个成熟个体的物种，定期开展野外种群动态监测，每季度记录种群数量、繁殖情况，必要时开展人工辅助授粉、幼体抚育等干预措施，提升种群自然增长率。3.3栖息地改良与管控技术3.3.1食草动物栖息地改良：补播本土草本、灌木物种，每公顷补播量控制在3-5kg，优先选择物种原生食谱范围内的植物，禁止引入外来物种，补播后3年植被盖度不低于60%。3.3.2鸟类栖息地改良：针对洞巢鸟类搭建人工巢箱，阔叶林每公顷设置2-3个，针叶林每公顷设置1-2个，巢箱距地面高度3-5m，朝向避开冬季主风向，每年繁殖期前清理1次巢箱；针对湿地鸟类构建水深梯度在0.5-2m的浅滩区域，种植本土水生植物，为鸟类提供觅食、繁殖生境。3.3.3外来入侵物种防除：针对紫茎泽兰、豚草、红火蚁、福寿螺等极高风险入侵物种，采用物理、化学、生物结合的综合防除技术，化学农药选择低毒、易降解类型，避免对本土物种造成伤害，防除后采用本土物种替代种植，防除效率不低于85%，一年内复发率不高于10%。3.3.4人兽冲突管控：针对野猪、亚洲象等致害物种种群密度超过每平方公里2只的区域，依法开展种群调控，同时采用预警系统、防护栏、驱避剂等措施减少人兽接触，致害保险覆盖率达到100%，保障群众合法权益。4迁地保护技术4.1种质资源收集保存4.1.1植物种质资源保存：正常型种子收集需覆盖物种分布范围内的5个以上种群，每个种群采集不少于50个无亲缘关系单株的种子，种子含水量调整至3%-7%，存入-18℃长期种质库可保存50年以上，存入-20℃中期种质库可保存20年以上；顽拗性种子（如热带、亚热带物种种子）采用超低温液氮保存，温度控制在-196℃，可实现长期保存；组织培养材料采用-80℃超低温冻存，每2年复苏1次检测活性。4.1.2动物种质资源保存：珍稀濒危野生动物采集精液、胚胎、组织样本，存入-196℃液氮种质库，每个物种至少保存20份以上不同个体的遗传资源；人工繁育种群建立完整谱系档案，近交系数控制在0.1以下，每2-3年开展不同繁育机构间的个体交换，维持种群遗传多样性，避免近交衰退。4.1.3微生物种质资源保存：采用甘油管-80℃保存或冻干管4℃保存，每份种质至少备份2份，存入不同地点的种质资源库，保存期限不少于10年。4.2人工扩繁技术4.2.1珍稀濒危植物扩繁采用播种、扦插、组织培养结合的技术，组织培养外植体采用75%酒精消毒30秒、0.1%升汞消毒10-15分钟，诱导培养基添加适当浓度的细胞分裂素与生长素，生根率不低于70%、炼苗存活率不低于80%方可开展野外回归。4.2.2珍稀濒危动物扩繁严格遵循遗传谱系选配，避免近亲繁殖，人工育幼的个体需逐步减少人为接触，避免产生印痕行为，为后续野化放归奠定基础。4.3野化放归技术4.3.1放归地选择标准：为物种历史分布区，生境相似度与原生境不低于80%，无威胁因子，食物资源充足，不存在种间竞争压力。4.3.2野化训练：食肉动物开展捕食、天敌识别训练，食草动物开展觅食、避敌训练，野化训练时长不少于6个月，具备独立生存能力后方可放归。4.3.3放归种群规模：单次放归个体数量不少于50个，其中育龄个体占比不低于60%，雌雄比例接近1:1，保证种群具备自我繁殖能力。4.3.4放归后监测：为放归个体佩戴卫星项圈或RFID标识，定期监测活动范围、存活情况、繁殖情况，放归后第一年存活率不低于60%、3年内存活率不低于40%视为放归成功。5受损生态系统修复技术5.1近自然修复技术5.1.1修复工程优先采用本土物种，乡土物种占比不低于90%，禁止使用外来入侵物种、高风险外来观赏物种，构建乔灌草结合的复层植被结构，避免单一物种纯林。5.1.2修复过程中尽量减少对原生植被、土壤的扰动，采用免耕、点播等低干扰施工方式，表土剥离后单独保存，施工后回填，减少土壤微生物群落破坏。5.2典型生态系统修复技术5.2.1森林生态系统修复：针对次生林、退化林，采用抚育间伐、补植本土阔叶树种的方式，修复后3年郁闭度不低于0.4，10年郁闭度不低于0.7，本土物种丰富度提升30%以上。5.2.2草原生态系统修复：针对退化草原采用免耕补播、围栏封育、鼠虫害防控的方式，补播本土牧草，每公顷补播量3-5kg，修复后3年植被盖度不低于60%，草群高度不低于15cm。5.2.3湿地生态系统修复：构建宽度不少于30m的河岸带缓冲带，种植芦苇、香蒲、荻等本土湿生植物，氮磷拦截效率不低于40%；红树林修复选用秋茄、桐花树、白骨壤等本土红树物种，种植密度为每平方米1-2株，3年存活率不低于80%。5.2.4海洋生态系统修复：珊瑚礁修复采用珊瑚断枝无性繁殖技术，每平方米种植10-15株珊瑚断枝，修复后3年珊瑚覆盖率不低于30%；海草床修复采用种子法或植株移栽法，每平方米种植5-8株，修复后2年盖度不低于40%。5.2.5矿山生态系统修复：首先开展土壤改良，每公顷施用有机肥不少于15吨，搭配种植耐贫瘠的本土灌木、草本物种，保留石缝、水坑等微生境，为两栖爬行类、昆虫提供栖息地，修复后5年植被覆盖率不低于70%。5.3连通性修复技术针对道路、水利设施等人为阻隔，建设动物下穿通道、上跨绿桥，绿桥上方覆盖不少于30cm的土层，种植原生植被，两侧设置高2.5m以上的防护网引导动物通行，通行效率不低于70%；针对农田、城镇等景观阻隔，构建宽度不少于10m的生态缓冲带，连接破碎化的自然斑块，提升景观连通性。6监测与预警技术6.1天地空一体化监测网络6.1.1卫星遥感监测采用30m分辨率的Landsat、哨兵系列数据，每季度开展1次土地利用、生态系统变化监测，重点区域采用亚米级高分辨率卫星数据，每月监测1次。6.1.2无人机监测采用分辨率10cm以下的可见光、多光谱相机，每月开展1次重点保护区域、生态修复区域的人为活动、植被变化监测，及时发现盗采盗猎、非法建设等破坏行为。6.1.3地面监测：每个县级行政区域至少设置10个固定监测样地，每季度开展1次植被、物种种群动态监测；针对国家一级保护野生动植物每半年开展1次专项调查，国家二级保护野生动植物每年开展1次专项调查。6.1.4外来入侵物种监测：在边境口岸、交通干线、物流节点设置监测点，每10km设置1个监测点，每月开展1次巡查，采用eDNA技术辅助快速检测，发现新入侵物种后24小时内上报属地生态环境主管部门，72小时内开展风险评估。6.2风险预警技术6.2.1物种灭绝风险预警：纳入种群规模、年下降率、生境减少速率、人为干扰强度等参数构建预警模型，种群年下降率超过10%、生境5年减少超过30%的物种发布红色预警，立即启动应急保护措施。6.2.2气候变化影响预警：采用CMIP6全球气候模式，预测2050年、2100年物种适生区变化，适生区减少超过50%的物种列入优先迁地保护名录，提前开展辅助迁移、种质资源保存。6.2.3生物安全预警：针对转基因生物、动物病原微生物、外来物种扩散风险，每季度开展1次eDNA监测，发现异常立即启动管控措施，防止生态危害扩散。7公众参与与可持续利用技术7.1公民科学参与技术7.1.1建立统一的生物多样性观测公众上报平台，公民可通过小程序上传物种观测照片、位置信息，经专家审核后纳入全国生物多样性本底数据库，每年对贡献突出的公民给予奖励与证书，公众上报数据占年度调查数据的比例不低于10%。7.1.2开展生物多样性保护科普宣传，每年至少开展4次进社区、进校园、进企业的科普活动，公众生物多样性保护知晓率每年提升不低于5%。7.2社区共管技术在保护地周边建立社区共管委员会，社区代表占比不低于50%，共同制定保护管理方案；优先吸纳社区居民参与保护巡护、生态修复等工作，社区居民参与保护相