CN119464454A 一种核酸标记的编码微球及其制备方法与应用 （天津中合基因科技有限公司）

一种核酸标记的编码微球及其制备方法与本发明公开了一种核酸标记的编码微球及2所述区段1为长度是4_100bp的单链2_2_dCTP和TdT酶；3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述区段2和所述区段3的长度为12_809.权利要求8所述的核酸标记的编码微球在单细胞测序或空或，权利要求8所述的核酸标记的编码微球在制备单细胞测序或空间组学测序的产品34究基因表达和其他基因组特性。单细胞测序技术的发展极大地推动了我们对细胞异质性、[0004]编码微球包含条形码序列（barcode）、唯一分子标签（uniquemolecular[0005]在常规的编码微球生产过程中，通常需要将核酸条形码分为多个片段进行合成。5所述区段1为长度是4_100bp的单链2_2_dCTP和TdT酶；[0014]在一些具体实施方案中，所述区段1的第7位脱氧核糖核苷酸和第8位脱氧核糖核67述离心的条件可为10000rpm离心[0052]所述酶促DNA合成反应体系5中的3_ONH2_dATP、3_ONH2_dTTP、3_ONH2_dGTP、3_8[0066]上述任一所述磷酸盐Buffer的溶剂为水，溶质及其浓度为50mMKH2PO[0067]按照上述任一所述方法制备得到的核酸标记的编码微球也属于本发明的保护范[0070]本发明还提供了核酸标记的编码微球在制备单细胞测序或空间组学测序的产品[0071]为了实现上述目的，本发明最后还提供了一种单细胞测序或空间组学测序的方[0072]本发明提供的单细胞测序或空间组学测序的方法中使用的编码微球为上述核酸9本发明的核酸标记的编码微球的结构示意图如图1所示。其中微球材质包括但不[0081]本发明提供的核酸标记的编码微球的制备方法的流程图如图2所示。本发明以50[0116]2、向步骤1中的EP管中加入表5所示的反应体系，65℃酶切30min，98℃反应2道3和泳道4的N+4表示步骤二中添加4bp的产物，泳道5和泳道6的N+8表示步骤二中添加8本实施例以10XGenomics公司单细胞转录组检测试剂盒（试剂盒名称为将人类红白血病细胞系K562复苏后培养于直径为6cm的培养皿中，采用含有10%[0127]注：表6中的组分均来源于ChromiumNextGEMSingleCell3,ReagentKits反应溶液。单细胞反应溶液由40μL编码微球/10×genomics的beads和280μL段2的微球10×genomics的beads来自ChromiumNextGEMSingleCell3,Reagent[0137]注：表8中的组分均来源于ChromiumNextGEMSingleCell3,ReagentKits[0145]注：表9中的组分均来源于ChromiumNextGEMSingleCell3,ReagentKits[0149]注：表10中的组分均来源于ChromiumNextGEMSingleCell3,ReagentKits按照10XGenomics公司单细胞转录组检测试剂盒中的3,GeneExpressionDualIndexLibraryConstructi×Genomics公司产品达到同等效果。目前，10×Genomics制备微球采用多步