从靶点发现到机制验证肿瘤免疫治疗研究为什么离不开高质量抗体

从靶点发现到机制验证，肿瘤免疫治疗研究为什么离不开高质量抗体？肿瘤免疫治疗研究中，一个候选靶点从基因组学数据到药物开发，至少要回答四个问题：靶点蛋白真实表达水平？由哪些细胞表达？药物能否触达靶点？干预后是否发生抗肿瘤作用？解答这些问题需要抗体工具。抗体可以把分子信息落实在蛋白、细胞和组织水平，用于识别靶蛋白、作用机制、区分细胞和研究功能变化。这类检测抗体主要用于流式细胞术、免疫组化、免疫荧光等免疫学实验。阻断型抗体、激动型抗体或细胞清除抗体直接用于靶点功能验证。总之，抗体贯穿靶点发现、成药性评估和机制验证的整个周期。义翘神州提供覆盖多种肿瘤免疫相关靶点的抗体产品，包括免疫检查点、肿瘤抗原、细胞因子、免疫细胞标志物、信号通路相关分子等，满足免疫检测、机制探究、靶点验证与免疫治疗药物研发等多重应用需求。应用一：靶点作用机制研究天然产物是新药研发的重要来源，过去40年FDA批准的药物中有41.8%源于此或受其启发，特别是在肿瘤和传染病领域。但天然产物结构复杂，其作用机制解析与靶点鉴定是药物研发法瓶颈。澳门大学的研究团队开发了一种热蛋白质组图谱-热邻近共聚集（TPP-TPCA）整合策略，用于鉴定化合物的作用机制。黎芦胺（VAM）既往报道具有降压、抗增殖活性，且在三阴性乳腺癌（TNBC）中表现出抗肿瘤作用，但其具体分子靶点与作用机制尚不明确。ATP6V1C1在多种肿瘤中表达上调。通过TPP-TPCA技术，发现藜芦胺直接结合ATP6V1C1，抑制V-ATP酶的催化活性并阻断溶酶体酸化，破坏肿瘤细胞存活所必需的自噬-溶酶体通路。VAM直接结合ATP6V1C1并抑制V-ATP酶活性（抗体用于WB实验，源自文献：doi:10.7150/ijbs.106843）在靶点发现和作用机制研究中，研究人员需要通过抗体完成靶蛋白的验证。比如WB可确认蛋白是否表达及表达量，IHC和IF用于确定蛋白在肿瘤、间质及不同细胞亚群中的分布，流式细胞术可分析蛋白是否位于细胞表面并比较阳性细胞比例。应用二：评估靶点能否被药物触达BingZhu等人在筛选胆管癌ADC治疗新靶点研究中，确定ICAM1为合适靶点。研究人员利用流式细胞术以6种人胆管癌（CCA）细胞系为样本，选择72种抗体筛选肿瘤相关表面抗原，其中ICAM1不仅在全部6种CCA细胞中高表达，并且在正常293T细胞中不表达。免疫荧光证实ICAM1定位于胆管癌细胞膜。对78例肿瘤组织样本进行IHC检测，约37.2%组织ICAM1阳性，癌旁正常胆管或肝脏组织几乎不表达。仅仅肿瘤高表达还不足以成为ADC靶点，还需要抗原结合抗体后能高效内吞进入肿瘤细胞。研究人员通过共聚焦免疫荧光和流式细胞术进一步研究，结果发现PE标记的ICAM1抗体结合CCA细胞后，随时间快速内吞进入胞内。在240min时，HuCCT1细胞的内化接近60%，SK-ChA-1和QBC939均超过40%，说明ICAM1有效介导抗体内吞，具备ADC靶点的重要功能。ICAM1抗体用于共聚焦免疫荧光和流式细胞术（源自文献：doi:10.1038/s41698-023-00447-z）应用三：预测靶点与药物相互作用机制抗体可作为药效学和机制研究工具，验证抗肿瘤药物能否有效结合并占据靶点，同时明确结合作用是否可以进一步阻断受体-配体或蛋白-蛋白互作。Niu等人在开发靶向SIRPα的抗体ES004-B5研究中，通过一系列抗体依赖实验验证靶点结合、相互作用阻断及抗肿瘤机制，比如流式细胞术结合实验、ELISA竞争实验、FACS竞争实验等。研究结果显示，ES004-B5抗体可识别SIRPα不同亚型，亲和力达到纳摩尔级，可阻断CD47-SIRPα相互作用。ROA检测发现阻断可以抑制下游的SHP-1募集。巨噬细胞吞噬实验证实，ES004-B5可增强PD-L1、CD20、EGFR等抗体处理后肿瘤细胞的吞噬。在小鼠肿瘤模型中，ES004-B5与CLDN18.2、PD-L1抗体联合均增强肿瘤抑制作用。CD8α抗体的CD8+T细胞耗竭实验和IFNγ抗体进行的阻断实验，证实CD8+T细胞和IFNγ与抗肿瘤机制相关。用于验证ES004-B5是阻断剂的抗体相关实验（源自文献：doi:10.1093/abt/tbae022）高质量抗体，源自应用验证抗体已应用于肿瘤免疫疗法研究的各个环节，从早期探索到走向临床转化，贯穿药物研发全流程。高质量抗体应具有高特异性、高灵敏度和高批间一致性，经过WB、IHC、ELISA、FCM等免疫应用验证。比如用于IHC或IF的抗体需要有相关靶点的阳性和阴性验证结果，用于流式细胞术的抗体需要具有稳定的信噪比、荧光偶联表现等。✦义翘神州肿瘤免疫学抗体产品义翘神州提供的肿瘤免疫靶点相关抗体产品，经过WB、IHC、IF、FCM或ELISA等应用验证，可用于肿瘤免疫机制研究、靶点筛选和创新免疫疗法开发。【参考文献】1.ShuangZhang,etal.Integratedthermalproteomeandthermalproximityco-aggregationprofilingidentifiesATP6V1C1asanovelanti-cancerdrugtarget.Int.J.Biol.Sci.2025.doi:10.7150/ijbs.1068432.BingZhu,etal.DevelopmentofpotentantibodydrugconjugatesagainstICAM1+cancercellsinpreclinicalmodelsofcholangiocarcinoma.npjPrecisionOncology,2023./10.1038/s41698-023-00447-z3.XiaofengNiu,etal.Apan-allelichumanSIRPα-blockingantibody,ES004-B5,promotestumorkillingbyenhanc