2026中级卫生职称-主管技师-微生物检验技术(中级)代码：384历年参考题库含答案详解

2026中级卫生职称-主管技师-微生物检验技术(中级)［代码：384］历年参考题库含答案详解一、选择题从给出的选项中选择正确答案（共100题）1、采集疑似败血症患者的血液标本进行细菌培养时，下列哪项操作最为恰当？A.在患者发热前采集血液2mlB.仅采集1次血液标本即可C.在抗生素治疗前多次采血培养D.采集后室温放置过夜再送检E.只取外周静脉血，不取骨髓2、关于革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁结构的比较，下列描述正确的是：A.革兰阳性菌肽聚糖层薄，含有磷壁酸B.革兰阴性菌肽聚糖层厚，不含脂质双层C.革兰阳性菌有外膜结构，含脂多糖D.革兰阴性菌肽聚糖层薄，有外膜和脂多糖E.两者均含大量脂蛋白和脂多糖3、下列哪种培养基常用于分离培养脑膜炎奈瑟菌？A.普通琼脂平板B.巧克力色培养基C.吕氏血清斜面D.血琼脂平板E.SS培养基4、关于流感病毒的生物学特性，下列叙述错误的是：A.属于正黏病毒科B.病毒颗粒呈球形或丝状C.分节段的单股负链RNA基因组D.血凝素（H5、检测乙肝病毒标志物时，HBsAg阳性而抗-HBs阴性提示：A.既往感染已恢复B.现症感染，具有传染性C.疫苗接种后产生免疫力D.窗口期，尚未产生抗体E.假阳性反应6、下列哪种细菌属于条件致病菌？A.霍乱弧菌B.金黄色葡萄球菌C.结核分枝杆菌D.炭疽芽孢杆菌E.布鲁菌7、关于白喉棒状杆菌的鉴定，下列哪项最有价值？A.革兰染色见革兰阳性棒状杆菌B.吕氏培养基上生长迅速C.锡卡尔染色可见异染颗粒D.琼脂平板上不生长E.触酶试验阳性8、大肠埃希菌O157:H7引起的典型临床表现是：A.急性胃肠炎伴高热B.出血性肠炎并发溶血尿毒综合征C.细菌性痢疾样改变D.泌尿系统感染E.脑膜炎9、关于真菌的培养特性，下列叙述正确的是：A.真菌最适生长温度为37℃B.真菌在沙保弱培养基上生长迅速C.真菌培养需要高渗透压环境D.真菌菌落呈酵母型或丝状E.所有真菌均为专性寄生10、检测病毒的方法中，下列哪项属于分子生物学检测技术？A.细胞培养分离病毒B.血凝试验检测病毒C.PCR技术检测病毒核酸D.免疫荧光检测病毒抗原E.电子显微镜观察病毒11、关于肺炎链球菌的鉴别诊断，下列哪项特征最具价值？A.革兰阳性双球菌，呈矛头状B.胆汁溶菌试验阳性C.菌落中央凹陷呈脐状D..optochin敏感试验阳性E.以上均正确12、在医院感染监测中，下列哪种病原体最易引起交叉感染？A.破伤风梭菌B.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌C.肉毒梭菌D.炭疽芽孢杆菌E.产气荚膜梭菌13、关于结核分枝杆菌的培养特性，下列描述正确的是：A.在罗氏培养基上生长迅速，24小时可见菌落B.专性需氧，在CO₂环境中生长更好C.培养温度适宜37℃，但生长缓慢D.在液体培养基中呈均匀混浊生长E.对pH值要求不严，6.0-8.5均可生长14、下列哪种方法可用于鉴定细菌的抗生素敏感性？A.革兰染色法B.K-B纸片扩散法C.暗视野显微镜检查D.肥达试验E.外斐试验15、关于HIV的检测策略，下列哪项叙述是正确的？A.初筛试验阳性即可确诊艾滋病B.HIV抗体阳性即可确诊HIV感染C.HIV核酸检测可用于早期诊断D.HIV抗原检测窗口期较长E.只有ELISA法可用于HIV筛查16、下列哪种细菌可产生芽孢？A.大肠埃希菌B.金黄色葡萄球菌C.破伤风梭菌D.淋病奈瑟菌E.流感嗜血杆菌17、关于乙型肝炎病毒的生物学特性，下列叙述错误的是：A.属于嗜肝DNA病毒科B.病毒颗粒呈球形，直径约42nmC.Dane颗粒是完整的病毒颗粒D.HBcAg在血清中极易检测到E.病毒具有较强的抵抗力18、下列哪种培养基可用于志贺菌的分离培养？A.chocolate培养基B.SS培养基C.吕氏培养基D.罗氏培养基E.碱性蛋白胨水19、关于真菌毒素的产生，下列叙述正确的是：A.所有真菌都能产生毒素B.黄曲霉毒素主要由黄曲霉产生C.真菌毒素只在高温下产生D.真菌毒素仅存在于活的菌体中E.真菌毒素对热不稳定20、下列哪种方法可用于快速鉴定金黄色葡萄球菌？A.氧化酶试验B.触酶试验和凝固酶试验C.硝酸盐还原试验D.吲哚试验E.甲基红试验21、关于革兰染色法，下列哪项叙述是正确的？A.革兰阳性菌呈红色，革兰阴性菌呈紫色B.结晶紫为初染剂，碘液为媒染剂C.95%乙醇为复染剂D.沙门菌经革兰染色后呈阳性22、分离培养脑膜炎奈瑟菌时，应选用的培养基是：A.血琼脂平板B.SS琼脂平板C.巧克力色培养基D.吕氏血清斜面23、关于细菌L型，下列哪项描述是错误的：A.细胞壁缺陷型细菌B.在高渗环境中容易形成C.革兰染色多为阳性D.菌落呈油煎蛋样24、流感病毒的分型依据是：A.血凝素B.神经氨酸酶C.核蛋白和M蛋白D.包膜糖蛋白25、关于乙型肝炎血清学标志物检测，下列说法正确的是：A.HBsAg阳性提示急性感染期B.HBeAg阳性表示病毒复制活跃C.抗-HBs阳性见于慢性携带者D.抗-HBc-IgG阳性仅见于恢复期26、鉴别肠道致病菌与非致病菌常用的试验是：A.糖发酵试验B.IMViC试验C.枸橼酸盐利用试验D.氧化酶试验27、结核分枝杆菌培养最适宜的温度是：A.25℃B.30℃C.37℃D.42℃28、关于HPV病毒感染，下列哪项叙述正确：A.HPV主要感染血液系统B.HPV可引起尖锐湿疣和宫颈癌C.HPV是有包膜的DNA病毒D.PCR检测不能用于HPV分型29、脑脊液标本采集后送检，最长的放置时间不应超过：A.15分钟B.30分钟C.1小时D.2小时30、关于凝固酶试验，下列叙述正确的是：A.金黄色葡萄球菌凝固酶阴性B.该试验用于鉴别凝固酶阳性葡萄球菌C.玻片法检测结合酶，试管法检测游离酶D.凝固酶阳性是葡萄球菌最重要的鉴定指标31、检测HIV感染的金标准是：A.ELISA法检测抗体B.快速检测试纸条C.Westernblot确证试验D.核酸检测32、关于真菌培养，下列哪项操作是正确的：A.培养温度均为37℃B.沙保琼脂培养基pH应调至7.2～7.4C.培养时间一般2～4周D.所有真菌均需厌氧培养33、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别试验是：A.杆菌肽试验B.Optochin试验C.CAMP试验D.胆汁溶菌试验34、关于医院获得性肺炎最常见的致病菌是：A.肺炎链球菌B.流感嗜血杆菌C.铜绿假单胞菌D.肺炎支原体35、关于乙型肝炎e抗原(HBeAg)的临床意义，下列说法正确的是：A.HBeAg阳性提示病情稳定B.HBeAg消失意味着完全治愈C.HBeAg阳性表示体内病毒复制活跃D.HBeAg存在于病毒衣壳表面36、鉴定白念珠菌常用的试验是：A.脲酶试验B.芽管形成试验C.接触酶试验D.氧化酶试验37、关于病毒包涵体的叙述，正确的是：A.包涵体仅存在于细胞质中B.包涵体是病毒感染的特异性诊断依据C.包涵体是病毒在细胞内增殖形成的嗜酸性或嗜碱性团块D.所有病毒感染均可形成包涵体38、关于结核分枝杆菌的染色特性，错误的是：A.抗酸染色呈红色B.革兰染色呈阳性C.镀银染色呈黑色D.美蓝染色呈淡蓝色39、关于轮状病毒肠炎的特点，下列哪项是错误的：A.多见于6～24个月婴幼儿B.粪便呈蛋花汤样或清水样C.大便镜检有大量白细胞D.秋冬季高发40、关于炭疽杆菌的特征，下列叙述正确的是：A.革兰染色呈阴性B.有荚膜但有鞭毛C.在固体培养基上呈卷发状菌落D.产生外毒素和肠毒素41、革兰染色的关键在于哪一步操作A.结晶紫初染时间长短B.碘液媒染时间C.酒精脱色程度D.复红复染时间42、我国最早报道的肠道病原菌是A.伤寒沙门菌B.福氏志贺菌C.霍乱弧菌D.痢疾杆菌43、关于破伤风梭菌的生物学特性，下列哪项是正确的A.有荚膜B.有鞭毛C.产生内毒素D.专性需氧44、脑膜炎奈瑟菌的传染源是A.流行性脑脊髓炎患者B.带菌者C.蚊虫D.鼠类45、培养汉坦病毒最常用的细胞是A.Vero-E6细胞B.Hela细胞C.MDCK细胞D.RK13细胞46、关于军团菌的培养特性，下列哪项正确A.普通琼脂培养基可生长B.需CO2环境C.含L-半胱氨酸的培养基D.严格厌氧47、肥达试验所用抗原不包括A.O抗原B.H抗原C.A抗原D.Vi抗原48、关于真菌的抵抗力，下列哪项是错误的A.对干燥抵抗力强B.对紫外线敏感C.对抗生素敏感D.对制霉菌素敏感49、检测HIV感染最常用的初筛方法是A.P24抗原检测B.ELISA法检测HIV抗体C.HIV核酸检测D.免疫荧光法50、关于白喉棒状杆菌的致病物质，下列哪项是正确的A.内毒素B.外毒素C.侵袭性酶D.荚膜51、标本采集送检过程中，下列哪项是错误的A.标本应新鲜采集B.容器必须无菌C.室温下长时间存放D.尽快送检52、关于乙型溶血性链球菌的鉴别试验，下列哪项正确A.杆菌肽敏感B.Optochin敏感C.胆汁溶菌试验阳性D.OPT试验阳性53、引起医院感染的常见革兰阴性杆菌是A.大肠埃希菌B.金黄色葡萄球菌C.肺炎链球菌D.乙型溶血性链球菌54、关于军团菌病的实验室诊断，下列哪项不正确A.尿抗原检测B.血清学检测C.痰培养于BCYE培养基D.革兰染色直接镜检55、关于螺旋体的特征，下列哪项是正确的A.属于细菌B.有鞭毛C.对抗生素不敏感D.不能在人工培养基上生长56、关于结核分枝杆菌的培养特性，下列哪项正确A.生长速度快B.需O2C.可发酵糖类D.在罗氏培养基上不生长57、关于铜绿假单胞菌的色素，下列哪项正确A.产生黄色色素B.产生绿色色素C.产生红色色素D.不产色素58、关于诺如病毒的传播途径，下列哪项正确A.虫媒传播B.粪-口途径C.空气传播D.血液传播59、关于细菌鉴定中的API系统，下列哪项正确A.只能鉴定革兰阳性菌B.不能鉴定厌氧菌C.基于生化反应原理D.只适用于临床标本60、关于流感病毒的变异，下列哪项是正确的A.只发生抗原漂移B.只发生抗原转换C.两者均可发生D.不发生变异61、革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁的主要区别在于A.肽聚糖的层次和含量不同B.是否含有磷壁酸C.是否含有脂多糖D.以上都是62、鉴别肠道致病菌与非致病菌常用的生化试验是A.甘露醇发酵试验B.葡萄糖发酵试验C.乳糖发酵试验D.尿素分解试验63、关于细菌鞭毛的说法，错误的是A.是细菌的运动器官B.化学成分主要是蛋白质C.可用鞭毛染色法观察D.是所有细菌都具有的结构64、培养基配制时，调pH值的顺序应为A.先溶化成分，再调pH，最后分装灭菌B.先调pH，再溶化成分，最后灭菌C.溶化、调pD.灭菌顺序可任意E.先灭菌，再调pH65、革兰染色中脱色时间过长会导致A.革兰阳性菌呈紫色B.革兰阳性菌呈红色C.革兰阴性菌呈紫色D.结果不受影响66、弧形菌属中，兼性厌氧、能耐受高盐环境的菌种是A.霍乱弧菌B.副溶血性弧菌C.古菌弧菌D.河弧菌67、芽胞的特点是A.是细菌的繁殖方式B.对热、干燥、化学消毒剂抵抗力强C.在适宜条件下可萌发成繁殖体D.B和C均正确68、鉴别沙门菌与志贺菌的常用试验是A.动力试验B.尿素酶试验C.甘露醇发酵试验D.以上都是69、流感病毒包膜表面的两种糖蛋白刺突分别是A.HA和NAB.M1和M2C.NP和PB1D.NS1和PA70、血琼脂平板上呈现β溶血的细菌是A.肺炎链球菌B.化脓性链球菌C.流感嗜血杆菌D.脑膜炎奈瑟菌71、检测细菌是否产生靛基质（吲哚）的试验原理是检测细菌能否分解A.葡萄糖B.尿素C.色氨酸D.枸橼酸盐72、β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制是细菌产生A.乙酰化酶B.转移酶C.β-内酰胺酶D.磷酸化酶73、病毒的血凝试验是利用某些病毒能凝集A.白细胞B.红细胞C.血小板D.淋巴细胞74、梅毒螺旋体感染后，患者血清中最早出现的抗体是A.特异性抗体B.非特异性抗体C.IgM抗体D.IgG抗体75、立克次体的培养特点为A.可在人工培养基上生长B.只能在活的真核细胞内生长C.专性需氧D.兼性厌氧76、肠道病毒鉴定的常用方法是A.血凝试验B.红细胞吸附试验C.补体结合试验D.中和试验77、乙脑病毒的主要传播媒介和储存宿主分别是A.蚊和猪B.蚊和人C.蜱和鼠D.蚊和鸟78、抗酸染色中，抗酸杆菌呈A.红色B.蓝色C.紫色D.绿色79、白喉棒状杆菌在吕氏血清斜面培养基上生长的菌落特征为A.灰白色、扁平、边缘不整齐B.金黄色、圆形、凸起C.黑色、有金属光泽D.灰白色、表面粗糙、颗粒状80、志贺菌属引起的疾病为A.细菌性痢疾B.伤寒C.副伤寒D.霍乱81、革兰染色法中，脱色是关键步骤，常用的脱色剂是A.生理盐水B.95%乙醇C.甲醇D.丙酮E.蒸馏水82、用于分离肠道致病菌的选择性培养基是A.血琼脂平板B.麦康凯琼脂C.巧克力琼脂D.吕氏血清斜面E.疱肉培养基83、细菌生长繁殖最快的时期是A.迟缓期B.对数生长期C.稳定期D.衰退期E.平台期84、压力蒸汽灭菌法通常采用的温度和时间为A.100℃，30分钟B.115℃，20分钟C.121℃，15～30分钟D.132℃，5分钟E.160℃，2小时85、判断细菌动力常用的培养基是A.半固体培养基B.固体培养基C.液体培养基D.鉴别培养基E.选择培养基86、K-B纸片扩散法测定细菌药物敏感性时，纸片与边缘的最小距离应为A.6mmB.10mmC.15mmD.20mmE.25mm87、检测细菌产生的凝固酶常用的试验是A.血浆凝固酶试验B.氧化酶试验C.触酶试验D.枸橼酸盐利用试验E.吲哚试验88、病毒在宿主细胞内增殖的指标不包括A.细胞病变效应B.红细胞吸附C.干扰现象D.溶血现象E.代谢改变89、关于细菌L型，下列描述错误的是A.缺乏细胞壁B.呈多形性C.革兰染色阳性D.在高渗培养基上生长E.可恢复为原菌90、检测HIV抗体最常用的初筛方法是A.ELISA法B.免疫荧光法C.WesternblotD.胶乳凝集法E.血凝抑制试验91、关于细菌荚膜的功能，下列描述错误的是A.抗吞噬作用B.黏附作用C.抵抗溶菌酶D.鉴别细菌的依据E.产生毒素92、分离培养脑膜炎奈瑟菌常用的培养基是A.巧克力琼脂B.血琼脂平板C.SS琼脂D.罗氏培养基E.庖肉培养基93、关于消毒与灭菌的概念，下列说法正确的是A.消毒可杀灭所有微生物B.灭菌可杀灭所有微生物包括芽孢C.防腐是指杀死微生物D.抑菌是指抑制微生物生长繁殖E.无菌是指没有活的微生物94、鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌最常用的试验是A.葡萄糖发酵试验B.甲基红试验C.尿素酶试验D.氧化酶试验E.吲哚试验95、关于细菌菌落特点，下列描述正确的是A.真菌菌落较小B.细菌菌落呈绒毛状C.放线菌菌落干燥疏松D.酵母型菌落表面光滑湿润E.丝状菌落表面光滑96、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌鉴别的主要依据是A.溶血类型B..optochin敏感性C.胆汁溶菌试验D.荚膜肿胀试验E.B和C97、采集细菌培养标本时，下列哪项操作是错误的A.无菌操作采集B.在使用抗菌药物前采集C.采集后立即送检D.污染标本可稀释后接种E.避免混入消毒剂98、关于内毒素与外毒素的区别，下列描述错误的是A.内毒素是革兰阴性菌细胞壁成分B.外毒素主要由革兰阳性菌产生C.内毒素耐热D.外毒素毒性强于内毒素E.两者均可制成类毒素99、用于分离诺沃克样病毒最适宜的方法是A.细胞培养B.动物接种C.原代肾细胞培养D.免疫电镜检测E.组织培养加动物接种100、细菌人工培养基中最基本的碳氮源是A.蛋白胨B.葡萄糖C.氯化钠D.酵母浸膏E.牛肉膏

参考答案及解析1.【参考答案】C【解析】败血症患者细菌培养应在抗生素使用前提取多次血培养，提高阳性率。采血量一般成人5-10ml/瓶，儿童1-3ml/瓶，需同时抽取多瓶以增加检出率。标本采集后应尽快送检，不能长时间室温放置。骨髓培养阳性率高于外周血，可作为辅助手段。发热高峰期采血阳性率较高，但并非必须等待发热后才采集。2.【参考答案】D【解析】革兰阳性菌细胞壁肽聚糖层厚（20-80nm），含磷壁酸，无外膜结构；革兰阴性菌肽聚糖层薄（2-7nm），有外膜结构，外膜含脂多糖（LPS）、脂蛋白和磷脂。脂多糖是革兰阴性菌的内毒素主要成分，其脂质A部分具有毒性活性。两种细菌均含肽聚糖，但含量和层次结构差异显著，这是革兰染色差异的结构基础。3.【参考答案】B【解析】脑膜炎奈瑟菌营养要求高，需要在含有血液或血清的培养基上生长。巧克力色培养基是将血液加热溶解后制成的培养基，其中的X因子和V因子释放，适合奈瑟菌属生长。普通琼脂平板无法满足其营养需求。吕氏血清斜面主要用于白喉棒状杆菌。血琼脂平板可用于初步分离，但巧克力色培养基效果更好。SS培养基用于沙门菌和志贺菌分离。4.【参考答案】A【解析】流感病毒属于正黏病毒科，而非副黏病毒科。病毒颗粒呈球形或丝状，分节段的单股负链RNA基因组是其重要特征。血凝素（HA）具有凝集红细胞的作用，能与宿主细胞表面受体结合介导病毒入侵。神经氨酸酶（NA）可裂解唾液酸，促进成熟病毒颗粒从宿主细胞释放。理解这些糖蛋白的功能对疫苗设计和抗病毒药物开发有重要意义。5.【参考答案】B【解析】HBsAg是乙肝病毒感染的标志物，阳性提示现症感染，机体处于病毒复制状态，具有传染性。抗-HBs是保护性抗体，阳性表示已产生免疫力，常见于疫苗接种后或感染恢复期。HBsAg阳性同时抗-HBs阴性，说明患者尚未产生保护性抗体，处于感染状态。窗口期是指HBsAg已消失但抗-HBs尚未出现的阶段，此时抗-HBcIgM可能阳性。6.【参考答案】B【解析】条件致病菌是指在正常情况下不致病，但在机体免疫力下降或菌群失调等条件下可致病的微生物。金黄色葡萄球菌广泛存在于人体皮肤和黏膜表面，属于正常菌群的一部分，当机体抵抗力降低时可引起化脓性感染。霍乱弧菌、结核分枝杆菌、炭疽芽孢杆菌和布鲁菌均为严格的致病菌，正常情况下即可引起疾病。7.【参考答案】C【解析】白喉棒状杆菌经锡卡尔染色可见明显的异染颗粒，这是其重要的形态学特征，对鉴定有较大价值。虽然革兰染色可见革兰阳性棒状杆菌，但该形态也可见于其他棒状杆菌。吕氏培养基适用于白喉棒状杆菌的快速生长，但不是特异性鉴定方法。白喉棒状杆菌在琼脂平板上可以生长，形成灰白色小菌落。触酶试验阳性不是特异性鉴定指标。8.【参考答案】B【解析】大肠埃希菌O157:H7属于肠出血性大肠埃希菌（EHEC），主要产生志贺样毒素（Shiga毒素），可引起出血性肠炎，严重者可并发溶血尿毒综合征（HUS），表现为溶血性贫血、血小板减少和急性肾衰竭。该菌不常引起高热，与侵袭性肠炎不同。虽然某些大肠埃希菌可引起泌尿系统感染和脑膜炎，但O157:H7血清型以肠道致病性著称。9.【参考答案】D【解析】真菌菌落可分为酵母型和丝状型两类。酵母型菌落呈乳白色、光滑湿润，类似细菌菌落；丝状菌落呈绒毛状、絮状或粉末状。真菌最适生长温度为22-28℃，而非37℃。沙保弱培养基是常用的真菌培养基，但真菌生长较慢，一般需培养1-4周。真菌多为低渗环境适应，不需要高渗透压。真菌多数为腐生，仅少数为专性寄生。10.【参考答案】C【解析】PCR（聚合酶链式反应）技术是分子生物学检测技术，通过体外扩增病毒核酸片段来检测病毒存在，具有灵敏度高、特异性强的特点。细胞培养是病毒分离的经典方法，不属于分子生物学技术。血凝试验是基于病毒血凝素与红细胞受体结合的原理。免疫荧光是利用抗体-抗原反应检测病毒抗原。电子显微镜是直接观察病毒形态的理化方法。11.【参考答案】E【解析】肺炎链球菌的鉴别特征包括：革兰阳性双球菌，矛头状排列，钝端相对尖端向外；胆汁溶菌试验阳性，可溶解于胆汁；菌落呈脐状凹陷；optochin敏感试验阳性。这些特征可与甲型溶血性链球菌和肺炎克雷伯菌相鉴别。其中胆汁溶菌试验和optochin试验是临床常用的快速鉴定方法，具有高度特异性。12.【参考答案】B【解析】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是医院感染最常见的病原体之一，易通过接触传播引起交叉感染。其多重耐药特性使得治疗困难，容易在医院环境中传播。破伤风梭菌、肉毒梭菌、炭疽芽孢杆菌和产气荚膜梭菌多为条件致病菌或外来感染，在医院内交叉传播的风险相对较低。MRSA的防控是医院感染管理的重要内容。13.【参考答案】C【解析】结核分枝杆菌培养需要特殊培养基，如罗氏培养基，生长缓慢，一般需2-8周才能见到菌落，而非24小时。该菌为专性需氧菌，但在5-10%CO₂环境中生长更佳。培养温度适宜37℃。在液体培养基中呈索状生长，菌落堆积在管壁形成皱褶薄膜，而非均匀混浊。结核分枝杆菌prefersslightlyacidicpH6.5-6.8，对pH有一定要求。14.【参考答案】B【解析】K-B纸片扩散法（Kirby-Bauer法）是常用的细菌抗生素敏感性检测方法。将含有一定浓度抗生素的纸片贴在接种了测试细菌的琼脂平板上，培养后测量抑菌圈直径，判断细菌对该抗生素的敏感、中介或耐药状态。革兰染色用于细菌形态鉴定。暗视野显微镜用于螺旋体观察。肥达试验用于伤寒诊断。外斐试验用于立克次体病诊断。15.【参考答案】C【解析】HIV核酸检测（如PCR检测病毒RNA）可在感染早期（窗口期内）检测到病毒核酸，用于早期诊断。初筛试验阳性需经确证试验（如Westernblot）确认后方可诊断。HIV抗体阳性需排除假阳性后才能诊断感染。HIVp24抗原检测窗口期较短，可在抗体出现前检测到。ELISA是常用初筛方法，但并非唯一方法，还有免疫荧光法等。16.【参考答案】C【解析】破伤风梭菌属于梭菌属，可产生芽孢。芽孢是某些细菌在不利环境下形成的休眠体，具有极强的抵抗力。产芽孢的细菌主要包括芽孢杆菌属和梭菌属。大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌均不产生芽孢。芽孢的形成和耐热性是这些细菌在自然界广泛分布和难以灭活的重要原因。17.【参考答案】D【解析】HBcAg（乙型肝炎核心抗原）主要存在于感染肝细胞的细胞核内，在血清中通常检测不到游离的HBcAg，因此临床常规检测项目中不包括HBcAg。HBsAg（表面抗原）和HBeAg（e抗原）可在血清中检测到。乙型肝炎病毒属于嗜肝DNA病毒科，Dane颗粒是完整的病毒颗粒，直径约42nm，具有强抵抗力。理解各抗原的分布和检测意义对临床诊断很重要。18.【参考答案】B【解析】SS培养基（Salmonella-Shigellaagar）是选择性培养基，含有胆盐和煌绿等抑制剂，可抑制大肠埃希菌等杂菌生长，有利于沙门菌和志贺菌的分离。志贺菌在SS培养基上形成无色透明菌落，可与形成红色菌落的发酵菌区分。巧克力培养基用于流感嗜血杆菌等苛养菌。吕氏培养基用于白喉棒状杆菌。罗氏培养基用于结核分枝杆菌。碱性蛋白胨水用于霍乱弧菌enrichment。19.【参考答案】B【解析】黄曲霉毒素主要由黄曲霉和寄生曲霉产生，是最常见的真菌毒素之一，具有强致癌性。并非所有真菌都能产生毒素，只有部分真菌株系具有产毒能力。真菌毒素的产生受温度、湿度、基质等多种因素影响，并非只在高温下产生。真菌毒素可存在于污染的粮食、饲料等产品中，不仅限于活的菌体。大多数真菌毒素对热稳定，普通烹饪温度不易破坏。20.【参考答案】B【解析】金黄色葡萄球菌的鉴定可通过触酶试验阳性（区别于链球菌）和凝固酶试验阳性（区别于表皮葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌）来确定。凝固酶试验是鉴定金黄色葡萄球菌的金标准方法。氧化酶试验用于区分球菌和肠杆菌科细菌。硝酸盐还原试验、吲哚试验和甲基红试验主要用于肠杆菌科的鉴定。凝固酶试验包括试管法和玻片法，后者更为快速。21.【参考答案】B【解析】革兰染色法中，结晶紫为初染剂使细菌着色，碘液作为媒染剂形成不溶性复合物，95%乙醇为脱色剂而非复染剂，番红或复红为复染剂使脱色的革兰阴性菌呈红色。革兰阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色。沙门菌属于革兰阴性杆菌，故D错误。22.【参考答案】C【解析】脑膜炎奈瑟菌营养要求较高，需含血液或血清的培养基，巧克力色培养基加热溶血后释放营养物质且去除了抑制因子，最适合该菌生长。血琼脂平板适用于多数细菌，SS琼脂用于肠道致病菌分离，吕氏血清斜面主要用于白喉棒状杆菌的分离培养。23.【参考答案】C【解析】细菌L型是细胞壁缺陷型，在高渗低琼脂含血清培养基中生长，革兰染色多为阴性。某些L型可呈革兰阳性但不稳定。典型的L型菌落小而密集，中央凸起似油煎蛋样。细胞壁缺陷导致形态多形性，穿刺培养时呈倒树状生长。24.【参考答案】C【解析】流感病毒根据核蛋白(NP)和基质蛋白(M)的抗原性不同分为甲、乙、丙三型。血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)是包膜上的糖蛋白刺突，用于分亚型而非分型。甲型流感病毒HA和NA变异频繁，是引起大流行的主要原因。25.【参考答案】B【解析】HBeAg阳性反映HBV复制活跃，传染性强。HBsAg阳性可见于急慢性感染及无症状携带者，不能仅凭此判断急性期。抗-HBs阳性表示已产生保护性抗体，见于康复者或疫苗接种后。抗-HBc-IgG阳性可持续多年，不仅限于恢复期。26.【参考答案】A【解析】肠道致病菌与非致病菌在糖发酵能力上存在差异，如致病性大肠埃希菌与产气肠杆菌的区分。IMViC试验主要用于区分大肠菌群不同来源，枸橼酸盐试验用于肠杆菌科鉴定，氧化酶试验主要用于区分假单胞菌与肠杆菌科细菌。27.【参考答案】C【解析】结核分枝杆菌为需氧菌，最适生长温度为37℃，培养时间长达2～8周方可看到菌落。25℃适合霉菌生长，30℃适合部分环境菌，42℃为嗜热细菌培养温度。该菌细胞壁含大量脂质，生长缓慢，需用罗氏培养基或MGIT培养基。28.【参考答案】B【解析】HPV是人乳头瘤病毒，属于无包膜的双链DNA病毒，主要感染皮肤和黏膜上皮细胞。低危型HPV6、11可引起尖锐湿疣，高危型HPV16、18与宫颈癌密切相关。PCR技术结合探针杂交可实现HPV准确分型，是临床常用检测方法。29.【参考答案】B【解析】脑脊液标本采集后应尽快送检，最好在30分钟内送达实验室。放置过久会导致细菌死亡或繁殖、细胞破坏及化学成分改变，影响检测结果。若暂时无法检测，可在2～8℃保存，但最长不超过2小时。疑似结核或真菌感染时应更及时送检。30.【参考答案】B【解析】凝固酶试验主要用于鉴别金黄色葡萄球菌(阳性)与其他葡萄球菌(阴性)。试管法检测游离凝固酶，玻片法检测结合凝固酶。虽然凝固酶是重要指标，但并非唯一鉴定依据，还需结合其他生化反应和耐药性试验综合判断。31.【参考答案】C【解析】HIV抗体检测初筛用ELISA或快速试验，Westernblot确证试验是传统金标准，可区分p24、gp41、gp120等特异性条带。核酸检测可早期发现病毒RNA，用于窗口期检测和婴幼儿诊断。目前部分国家已将核酸检测纳入诊断标准，但确证仍需蛋白印迹法。32.【参考答案】C【解析】真菌培养常用沙保琼脂培养基，pH宜偏酸性约5.6～6.0以抑制细菌生长。大多数真菌适宜25～28℃培养，仅双相真菌在37℃转为酵母相。培养时间通常为2～4周，部分生长缓慢的真菌需更长时间。真菌多为需氧菌，无需厌氧培养。33.【参考答案】B【解析】肺炎链球菌和甲型溶血性链球菌均形成草绿色溶血环，需用Optochin试验鉴别。肺炎链球菌对Optochin敏感(抑菌圈≥14mm)，甲型链球菌耐药。胆汁溶菌试验也可鉴别，肺炎链球菌可被胆汁溶菌而甲型链球菌不被溶解。两者均为呼吸道常见病原菌。34.【参考答案】C【解析】铜绿假单胞菌是医院获得性肺炎尤其是呼吸机相关肺炎的常见致病菌，因其具有较强的环境适应能力和多重耐药性。肺炎链球菌和社区获得性肺炎更相关。流感嗜血杆菌多见于慢性阻塞性肺疾病患者。肺炎支原体主要引起非典型肺炎，在社区中传播。35.【参考答案】C【解析】HBeAg阳性表明HBV复制活跃，传染性较强，是抗病毒治疗的重要指征之一。HBeAg转阴并出现抗-HBe称为血清学转换，提示病情好转但并非完全治愈。HBeAg是分泌型蛋白，存在于血清中，主要反映病毒复制状态而非直接定位于病毒颗粒表面。36.【参考答案】B【解析】白念珠菌在血清或吐温40培养基37℃培养2～3小时后形成芽管，这是鉴别白念珠菌与其他念珠菌的快速可靠方法。脲酶试验主要用于鉴别隐球菌，接触酶和氧化酶试验主要用于细菌鉴定。芽管试验简便快捷，是临床实验室常规鉴定手段。37.【参考答案】C【解析】包涵体是病毒在感染细胞内增殖过程中形成的圆形或椭圆形嗜酸性或嗜碱性团块，可位于细胞核内、细胞质内或两者均有。包涵体对某些病毒有提示意义但非特异性确诊依据。并非所有病毒感染均形成可见包涵体，需结合其他检测方法综合诊断。38.【参考答案】B【解析】结核分枝杆菌细胞壁含大量分枝菌酸，革兰染色不易着色，通常描述为革兰阳性但不易染上。抗酸染色是其最重要染色方法，经石炭酸复红加温染色后能抵抗盐酸酒精脱色而呈红色。美蓝染色呈淡蓝色，镀银染色可使菌体呈黑色，便于观察。39.【参考答案】C【解析】轮状病毒肠炎多见于6～24个月婴幼儿，秋冬季为高发季节，大便呈蛋花汤样或清水样，量多次数频。大便镜检通常无或仅有少量白细胞，这是与细菌性肠炎的重要鉴别点。轮状病毒主要侵犯小肠绒毛顶端的肠上皮细胞，导致吸收不良和分泌增加。40.【参考答案】C【解析】炭疽杆菌为革兰阳性大杆菌，有荚膜但无鞭毛，不形成芽孢条件培养下呈典型的卷发状菌落。该菌产生由保护性抗原、水肿因子和致死因子组成的外毒素，但不产生肠毒素。炭疽杆菌在含碳酸氢钠的血琼脂平板上37℃培养24～48小时可见典型菌落。41.【参考答案】C【解析】革兰染色中脱色是关键步骤。酒精脱色时间过短，革兰阳性菌可被误染为阴性；脱色过度则阴性菌可呈阳性。熟练掌握脱色程度是获得准确结果的核心。初染、媒染和复染时间为常规步骤，对结果判定影响相对较小。因此正确答案为C。42.【参考答案】C【解析】霍乱弧菌引起的霍乱是我国最早报道的肠道传染病之一。1820年清朝文献已有霍乱流行记载，1864年全球大流行波及我国。该病属甲类传染病，以剧烈腹泻、呕吐和脱水为主要临床表现。了解这一历史背景有助于在考试中准确作答。43.【参考答案】B【解析】破伤风梭菌为革兰阳性杆菌，周身鞭毛，无荚膜，专性厌氧。其致病物质主要是破伤风痉挛毒素，属于外毒素而非内毒素。该菌在厌氧条件下形成芽胞，芽胞呈鼓槌状为其典型形态特征。选项中只有B项描述正确。44.【参考答案】B【解析】脑膜炎奈瑟菌的传染源主要是带菌者和患者，其中带菌者在流行病学上更为重要。该菌仅感染人类，通过飞沫传播。蚊虫和鼠类不是其传播媒介。因此正确答案为B，这是流行病学的重要知识点。45.【参考答案】A【解析】Vero-E6细胞是培养汉坦病毒的首选细胞系，该细胞来源于非洲绿猴肾，对多种病毒易感。Hela细胞常用于狂犬病病毒培养，MDCK细胞适用于流感病毒分离，RK13细胞为兔肾细胞系。掌握不同病毒的培养细胞对应关系是考点。46.【参考答案】C【解析】军团菌营养要求苛刻，普通培养基不能生长。需添加L-半胱氨酸和铁离子的BCYE琼脂培养基才能使其生长。该菌为兼性厌氧菌，不需CO2环境。L-半胱氨酸是其生长的必需因子，这是军团菌培养的重要特点。47.【参考答案】C【解析】肥达试验是用已知伤寒杆菌O抗原、H抗原和甲、乙型副伤寒杆菌H抗原检测患者血清中相应抗体浓度的凝集试验。Vi抗原是伤寒杆菌表面抗原，不用于肥达试验。此题考查肥达试验抗原组成知识点。48.【参考答案】C【解析】真菌对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂有较强的抵抗力，但对温度敏感，60℃1小时可被杀灭。抗生素对真菌无效，因为抗生素作用靶点是细菌细胞壁，而真菌无肽聚糖。制霉菌素是多烯类抗真菌药物，对真菌有效。49.【参考答案】B【解析】ELISA法检测HIV抗体是目前最常用的HIV感染初筛方法，具有灵敏度高、特异性好、操作简便等优点。P24抗原检测可用于早期诊断，核酸检测用于确诊和病毒载量监测。ELISA法检测抗体阳性后需用免疫印迹法确认。50.【参考答案】B【解析】白喉棒状杆菌的主要致病物质是白喉毒素，属于外毒素。该毒素由携带β棒状杆菌噬菌体的溶原性菌株产生，能抑制宿主细胞蛋白质合成，导致局部假膜形成和全身中毒症状。该菌无内毒素、侵袭性酶和荚膜。51.【参考答案】C【解析】微生物标本采集后应尽快送检，不可在室温下长时间存放，以免杂菌过度繁殖或病原菌死亡。标本应新鲜采集，使用无菌容器，采集后尽快送检以保证检测结果的准确性。这是标本采集的基本原则。52.【参考答案】A【解析】乙型溶血性链球菌对杆菌肽敏感，可用杆菌肽试验进行初步鉴定。Optochin敏感和胆汁溶菌试验阳性用于肺炎链球菌与草绿色链球菌的鉴别，OPT试验也用于肺炎链球菌的鉴定。掌握链球菌的鉴别试验要点是考试重点。53.【参考答案】A【解析】大肠埃希菌是医院感染最常见的革兰阴性杆菌，可引起尿路感染、呼吸道感染、血流感染等多种医院获得性感染。金黄色葡萄球菌和链球菌均为革兰阳性菌。医院感染病原菌以革兰阴性杆菌为主，大肠埃希菌位居首位。54.【参考答案】D【解析】军团菌革兰染色着色不良，难以通过革兰染色直接镜检诊断。尿抗原检测快速简便，血清学检测可检测抗体，痰培养于BCYE培养基是确诊方法。军团菌染色特性差，临床上不依靠革兰染色进行诊断。55.【参考答案】A【解析】螺旋体是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状的运动细菌，属于细菌范畴。其运动器官为轴丝而非鞭毛，对抗生素敏感，梅毒螺旋体不能在人工培养基上生长，但钩端螺旋体和回归热螺旋体可在人工培养基上生长。梅毒螺旋体是唯一不能在人工培养基上生长的螺旋体。56.【参考答案】B【解析】结核分枝杆菌为专性需氧菌，生长缓慢，分裂一代约18小时。它不能发酵糖类，在罗氏培养基上可生长，需2至8周才能形成菌落。结核分枝杆菌的培养特性是其鉴定和诊断的重要依据，需氧特性决定了其好发于氧分压高的肺尖部。57.【参考答案】B【解析】铜绿假单胞菌可产生多种色素，其中以绿脓素（绿色）和荧光素（黄绿色）最为常见。这些色素可溶于培养基和培养液，使菌落呈绿色。这是铜绿假单胞菌的重要鉴别特征之一，在临床微生物检验中具有识别意义。58.【参考答案】B【解析】诺如病毒主要通过粪-口途径传播，包括食用被污染的食物和水、接触被污染的物品表面以及人与人之间的接触传播。也可通过呕吐物气溶胶传播。该病毒是引起急性胃肠炎最常见的病原体，具有传播快、范围广的特点。59.【参考答案】C【解析】API系统是一套微型化、标准化的细菌鉴定系统，基于生化反应原理设计。API20E用于肠杆菌科，API20Strep用于链球菌，API50CH用于需氧菌等。该系统可用于临床标本分离株的鉴定，也可用于环境标本中的细菌鉴定，并非仅限于临床标本。60.【参考答案】C【解析】流感病毒既可发生抗原漂移，也可发生抗原转换。抗原漂移是小幅度变异，常引起季节性流行；抗原转换是大幅度变异，可产生新的亚型，引起大流行或暴发流行。流感病毒的高度变异性是其难以控制的主要原因，也是疫苗需要每年更新的依据。61.【参考答案】D【解析】革兰阳性菌肽聚糖含量高、层次多，含磷壁酸，不含脂多糖；革兰阴性菌肽聚糖含量低、层次少，含脂多糖，一般不含磷壁酸。两者在上述结构成分上均存在显著差异，因此选D。62.【参考答案】C【解析】肠道致病菌多数不发酵乳糖，而非致病菌如大肠埃希菌能发酵乳糖产酸产气。因此乳糖发酵试验是鉴别肠道致病菌与非致病菌的经典方法，可初步区分大肠菌群与沙门菌、志贺菌等。63.【参考答案】D【解析】鞭毛是某些细菌的运动器官，化学成分为鞭毛蛋白，需用特殊鞭毛染色才能在光学显微镜下观察。并非所有细菌都有鞭毛，周生鞭毛、丛生鞭毛和无鞭毛的细菌均存在，故D错误。64.【参考答案】A【解析】配制培养基时应先将各成分充分溶解混合，待溶质完全溶化后再调节pH值至所需范围，然后分装并进行灭菌。若先调pH再溶化可能导致pH偏差，先灭菌则无法调整pH。65.【参考答案】B【解析】脱色是用95%乙醇使革兰阳性菌保留结晶紫-碘复合物，而革兰阴性菌被脱色。若脱色时间过长，革兰阳性菌也可被脱色，复染后呈红色，造成假阴性结果。66.【参考答案】B【解析】副溶血性弧菌为兼性厌氧菌，能在含3.5%氯化钠的培养基中生长，具有嗜盐性，是引起食物中毒的常见病原菌。霍乱弧菌不耐高盐，古菌弧菌和河弧菌的临床意义相对较小。67.【参考答案】D【解析】芽胞是某些革兰阳性菌在不利环境下形成的休眠体，具有极强的抵抗力，对热力、干燥、辐射和化学消毒剂均有较强耐受性。当环境适宜时，芽胞可萌发成繁殖体，但芽胞本身不是繁殖方式。68.【参考答案】D【解析】沙门菌有周身鞭毛、有动力，尿素酶阴性；志贺菌无鞭毛、无动力，尿素酶亦阴性。甘露醇发酵方面，沙门菌多数不发酵甘露醇，而部分志贺菌可迟缓发酵。动力试验、尿素酶试验和甘露醇发酵试验均可辅助鉴别这两种菌。69.【参考答案】A【解析】流感病毒包膜表面的两种主要糖蛋白刺突是血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）。HA介导病毒吸附和侵入宿主细胞，NA参与病毒释放。M1、M2为膜蛋白，NP为核蛋白，PB1和PA为聚合酶蛋白，NS1为非结构蛋白。70.【参考答案】B【解析】β溶血是指红细胞完全溶解，在菌落周围形成透明的溶血环。化脓性链球菌（A群链球菌）在血琼脂平板上表现为典型的β溶血。肺炎链球菌呈α溶血（草绿色溶血环），流感嗜血杆菌呈卫星现象，脑膜炎奈瑟菌不溶血。71.【参考答案】C【解析】靛基质试验用于检测细菌是否能分解色氨酸产生吲哚。吲哚与试剂中对二甲氨基苯甲醛反应生成红色化合物。大肠埃希菌靛基质阳性，志贺菌阴性，此试验常用于肠道杆菌的鉴别。72.【参考答案】C【解析】细菌产生β-内酰胺酶是耐药的最主要机制，该酶能水解β-内酰胺环，使青霉素类和头孢菌素类失去抗菌活性。乙酰化酶、转移酶和磷酸化酶主要参与氨基糖苷类药物的灭活修饰。73.【参考答案】B【解析】血凝试验基于某些病毒（如流感病毒、新城疫病毒）表面的血凝素能与红细胞表面受体结合，使红细胞发生凝集。该试验可用于病毒的定性、定量鉴定及血凝抑制试验检测特异性抗体。74.【参考答案】B【解析】梅毒螺旋体感染后，患者血清中首先出现的是反应素（非特异性抗体），属于IgM类，可用VDRL或RPR试验检测。随后才出现特异性抗体（IgG），可用TPPA或FTA-ABS检测。75.【参考答案】B【解析】立克次体是一类专性细胞内寄生的原核微生物，不能在无生命的培养基上生长，常用鸡胚卵黄囊接种或细胞培养进行分离。它们为兼性厌氧，但必须在活的真核细胞内才能完成生命活动。76.【参考答案】D【解析】肠道病毒的种型和血清型鉴定主要依靠中和试验，利用特异性抗血清与病毒作用后中和其致细胞病变作用。红细胞吸附试验主要用于呼吸道合胞病毒的检测，血凝试验不适用于肠道病毒。77.【参考答案】A【解析】乙型脑炎病毒通过蚊虫（主要是三带喙库蚊）叮咬传播，猪是主要的中间宿主和扩增宿主，病毒在猪体内大量复制后通过蚊传播给人类。人感染后病毒量低，不是主要传染源。78.【参考答案】A【解析】抗酸染色采用石炭酸复红加温染色，抗酸杆菌（如结核分枝杆菌）因细胞壁含大量脂质不易脱色，保留红色；非抗酸菌及背景被亚甲基蓝复染成蓝色。此方法是结核分枝杆菌检测的经典手段。79.【参考答案】D【解析】白喉棒状杆菌在吕氏培养基上生长迅速，菌落呈灰白色、表面粗糙、干燥且呈颗粒状，镜检可见异染颗粒。此培养基富含胱氨酸和血清，能促进白喉棒状杆菌的快速生长。80.【参考答案】A【解析】志贺菌属是细菌性痢疾的病原体，通过粪-口途径传播，引起结肠黏膜的炎症和溃疡，临床表现为发热、腹痛、腹泻、黏液脓血便。伤寒和副伤寒由沙门菌引起，霍乱由霍乱弧菌引起。81.【参考答案】B【解析】革兰染色法中，脱色步骤使用95%乙醇作为脱色剂。乙醇能够溶解革兰阳性菌细胞壁中的脂类成分，使结晶紫-碘复合物不易透出而保留紫色；而革兰阴性菌细胞壁脂类含量高，乙醇使其通透性增加，染料被洗脱后呈无色，最后被复染液染成红色。其他选项均不作为革兰染色脱色剂使用。82.【参考答案】B【解析】麦康凯琼脂是一种选择性培养基，含有胆盐和结晶紫，可抑制革兰阳性菌生长，同时乳糖发酵菌落呈红色，不发酵菌落呈无色，常用于分离肠道致病菌如沙门菌、志贺菌等。血琼脂平板为营养培养基，巧克力琼脂用于流感嗜血杆菌，吕氏斜面用于白喉棒状杆菌，疱肉培养基用于厌氧菌。83.【参考答案】B【解析】细菌生长曲线分为迟缓期、对数生长期、稳定期和衰退期四个阶段。对数生长期细菌以恒定的速率快速分裂增殖，数量呈指数增长，此期细菌形态、染色性和生理活性典型，对抗生素等作用敏感，是研究细菌生物学性状的最佳时期。迟缓期为适应阶段，稳定期营养消耗、代谢产物积累，衰退期细菌死亡数超过活菌数。84.【参考答案】C【解析】压力蒸汽灭菌法是最可靠的灭菌方法，通常在121℃、103.4kPa压力下维持15～30分钟可杀灭一切微生物包括芽孢。115℃需更长时间且不能保证杀灭所有芽孢；132℃预真空压力蒸汽灭菌可用于器械但时间不同；160℃干热灭菌需2小时。100℃煮沸消毒不能杀灭所有芽孢。85.【参考答案】A【解析】半固体培养基柔软度适中，穿刺接种后可根据细菌是否沿穿刺线扩散生长来判断细菌是否有鞭毛及动力。有动力的细菌呈模糊的生长云向周围扩散，无动力的细菌仅沿穿刺线生长，界限清晰。固体培养基用于分离纯化，液体培养基用于增菌，鉴别和选择性培养基用于不同目的。86.【参考答案】C【解析】K-B纸片扩散法操作时，纸片中心距平板边缘应至少15mm，纸片中心间距不小于24mm，以确保抑菌圈之间不重叠，保证测量准确。距离过近会导致抑菌圈相互影响，影响结果判读。直径90mm的标准平板放置6个纸片为宜。87.【参考答案】A【解析】血浆凝固酶试验是鉴定