医院感染控制和微生物学监测

医院感染控制与微生物学监测

建始县人民医院检验科---于拥军医院感染控制和微生物学监测1/31伴随当代医疗技术进步和社会人群组成老龄化,免疫功效低下者日益增多,感染宿主由健康人群逐步转向免疫功效低下人群,条件致病微生物逐步替换了毒力强病原微生物而成为主要病原体,感染主流已倾向于医院感染。医院感染严重威胁住院患者身心健康和预后,直接关系到医疗质量与患者安危及医疗费用,当前已成为国际医学界极为关注主要问题,控制医院感染是当代化医院质量管理主要目标之一。医院感染控制主要性医院感染控制和微生物学监测2/31第一节、医院感染定义及特点一、医院感染定义医院感染又称医院内取得性感染,指患者在入院时既不存在,亦不处于潜伏期,而在医院内发生感染,包含在医院取得而于出院后发病感染。医院感染控制和微生物学监测3/31二、医院感染分类(1)外源性感染又称交叉感染，病原体来自患者体外，即来自其它住院患者、医务人员、陪护家眷和医院环境等。(2)内源性感染又称本身感染，病原体来自患者本身贮菌库（皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道、肠道)正常菌群或外来已定植菌。医院感染控制和微生物学监测4/31三、医院感染对象医院感染可发生于与医院相关人群,如门诊和住院患者、医务人员、陪护家眷、探视者等均可发生医院感染。医院感染控制和微生物学监测5/31四、传输方式1.呼吸道传输2.消化道传输3.接触传输(1)直接接触(2)间接接触(3)血液和体液传输(4)垂直传输医院感染控制和微生物学监测6/31五、流行特征医院感染含有平时散发与严重时暴发医院流行病学特点。医院感染多为免疫功效低下宿主机会性感染,且以内源性感染为主,传染性较小,普通可在病区内针对其传输方式进行隔离。当医院消毒灭菌和隔离办法发生失误时可引发暴发感染。医院感染控制和微生物学监测7/31第二节医院感染常见病原菌及变迁引发医院感染病原微生物中，90%为条件致病菌。当前我国以革兰阴性菌为主，其次为革兰阳性菌，真菌占第三位。革兰阴性菌中以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肠杆菌属和克雷伯菌属为主；革兰阳性菌中主要是葡萄球菌，且以金黄色葡萄球菌最多见；真菌中白色念珠菌感染占首位。医院感染控制和微生物学监测8/31大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌占据医院感染病原菌前三位。以上为总分布特点,不一样医院可能略有差异。医院感染控制和微生物学监测9/31第三节医院感染微生物学监测检测项目及方法医院感染控制和微生物学监测10/31医院感染监控中惯用检测方法1、空气微生物学监测2、物体表面微生物学监测3、医务人员手微生物学监测4、使用中消毒剂和无菌器械保留液微生物学监测5.血液净化系统微生物学检测6、内窥镜消毒灭菌效果微生物学检测7、医疗用具微生物学监测医院感染控制和微生物学监测11/31

采样及检验标准:

采样后必须尽快对样品进行对应指标检测。医院感染控制和微生物学监测12/311．空气微生物学监测

（1)采样方法：沉降法、固体撞冲法（撞击式、离心式)、液体冲击法和滤过法。

（2)采样时间：选择消毒处理后与进行医疗活动之前期间采样。

（3)采样高度：与地面垂直高度80～150cm。

（4)布点方法：室内面积≤30m2，设一条对角线上取3点，即中心一点、两端各距墙1m处取一点；室内面积>30m2，设东、西、南、北、中5点，其中东、西、南、北点均距墙1m。采样方法：

用90mm直径普通营养琼脂平板在采样点暴露5min后送检培养。医院感染控制和微生物学监测13/31（5)细菌菌落总数检验：将平板置37℃温箱内培养24h计数菌落。空气细菌菌落总数（cfu/m3)=50000N/AT式中：A—平板面积（cm2)T—平板暴露时间（min)N—平均菌落数（cfu/平板)（6)判断标准：见表6-3-1。医院感染控制和微生物学监测14/316cm7.5cm9cm5min35422615710min1771137915min118765230min593826环境空气监测结果计算（自然沉降法)医院感染控制和微生物学监测15/312．物体表面微生物学监测(1)采样方法：棉拭子采样法、压印法及破坏法。（2)采样时间：消毒处理后4h内采样。（3)采样面积：被采表面<100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。（4)采样方法：用5cm×5cm标准灭菌规格板，放在被检物体表面，用浸有灭菌9g/L氯化钠溶液棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样式1～4个规格板面积，剪去手接触部分，将棉拭子入装10ml采样液试管内送检。门把手等小型物体则采取棉拭子直接涂抹物体方法采样。医院感染控制和微生物学监测16/31（5)细菌菌落总数检验：1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。物体表面细菌菌落总数（cfu/cm2)=

平板上菌落数×采样液稀释倍数————————————————

采样面积（cm2)（6)判断标准：见表6-3-1。医院感染控制和微生物学监测17/313．医务人员手微生物学监测（1)采样时间：在接触患者或从事医疗活动前进行采样。（2)采样面积及方法：被检人五指并拢，将浸有没有菌9g/L氯化钠溶液棉拭子一支在双手曲面从指根到指端往返涂擦各两次（一只手涂擦面积约30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子放入装有10ml采样液试管内送检。采样面积按平方厘米(cm2)计算。医院感染控制和微生物学监测18/31（3)细菌菌落总数检验：1ml采样液放入灭菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，放35℃温箱内培养24~48h计数菌落。手细菌菌落总数（cfu/cm2)=

平板上菌落数×采样液稀释倍数———————————————30×2（cm2)（4)判断标准：见表6-3-1。医院感染控制和微生物学监测19/314．使用中消毒剂和无菌器械保留液微生物学监测

（1)采样时间：采取更换前使用中消毒剂与无菌器械保留液。（2)采样方法：涂抹法:

用无菌吸管吸收消毒液1.0ml,加入9.0ml含有对应中和剂采样管内混匀,用无菌吸管吸收上述溶液0.2ml,滴于干燥普通琼脂平板,每份样品同时做2个平行样,一平板置200C培养7天,观察霉菌生长情况,另一个平板置350C温箱培养72h,记数菌落数,同时检测致病菌

消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数×50医院感染控制和微生物学监测20/31倾注法:用无菌吸管吸收消毒液1.0ml,加入到9.0ml含有对应中和剂无菌生理盐水采样管内混匀,分别取0.5ml放入2只灭菌平皿内,加入已溶化45～480C营养琼脂15～18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,一平板置200C培养7天,观察霉菌生长情况,另一个平板置36±10C温箱培养72h,记数菌落数,同时检测致病菌

消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上菌落数×20医院感染控制和微生物学监测21/31

（3)判断标准：使用中消毒剂，细菌菌落总数≤100cfu/ml，病原微生物不得检出；无菌器械保留液必须无菌。（4)注意事项：采样后1小时内检测。医院感染控制和微生物学监测22/31惯用消毒液对应中和剂消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)消毒剂（浓度％)医院感染控制和微生物学监测23/31采样时间:

血液净化系统监测应在透析用水和透析液制做好后即将进行透析前。采样方法:

用灭菌注射器吸收透析用水或透析液2～5ml,放入无菌管中送检。5血液净化系统微生物监测医院感染控制和微生物学监测24/31检测方法用无菌吸管吸收1.0ml待检样品接种于灭菌平皿,每一样本接种2个平皿,内加入已溶化45～48℃营养琼脂15～18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置36±1℃温箱培养48h,计数菌落数。结果计算透析用水/透析液细菌总数(CFU/ml)=2个平板上菌落总数×稀释倍数。卫生标准透析用水细菌数≤200CFU/ml,每个月监测1次,结果超出范围时,应再复查,当怀疑或确定患者在透析过程中有热原反应、菌血症状时应随时进行监测。医院感染控制和微生物学监测25/31透析液细菌数≤CFU/ml,每个月监测1次,当怀疑有透析液污染或发生严重感染病例时,应增加采样点。如原水口、反渗水出口、储水箱出口、透析液配比机和浓缩透析液等。医院感染控制和微生物学监测26/316内窥镜消毒灭菌效果微生物监测

采样时间:在消毒灭菌后、使用前进行采样。采样方法:用沾有含对应中和剂无菌生理盐水棉拭子，在被检内窥镜上从镜头至镜身重复涂擦，剪去手接触部位，将棉拭子投入到5ml含对应中和剂生理盐水采样管中，马上送检。结果判定:灭菌后内窥镜，未检出任何微生物为合格。消毒后内窥镜，细菌总数＜20cfu/件，并未检出致病菌为合格。医院感染控制和微生物学监测27/317．压力蒸汽灭菌器灭菌效果监测（1)采样时间：与被消毒或灭菌物品同时监测。（2)布点方法：小型灭菌器选1个包装物品放入指示剂，置最底层中央；中型灭菌器选3个包装物品放入指示剂，上层中央放一个，下层前后各一个；大型灭菌器选5个包装物品放入指示剂，上、中层中央各放1个，下层前、中、后部各放1个。（3)监测方法：采取卫生部同意化学指示剂和嗜热脂肪芽胞杆菌（ATCC7953，ATCC12980)作为生物指示剂。医院感染控制和微生物学监测28/31各类环境空气、物体表面、医护人员手细菌

菌落总数卫生标准

表6-3-1环境类别

范围细菌菌落总数

空气物体表面医护人员手(cfu/m3)(cfu/cm2)(cfu/cm2)Ⅰ类层流洁净手术室、层流洁净病房≤10≤5≤5Ⅱ类普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、

普通保护性隔离室、供给室无菌区、烧伤

病房、重症监护病房≤200≤5≤5Ⅲ类儿科病房、妇产科检验室、注射室、≤500≤1