河北省保定市部分学校2026-2027学年高二上学期9月考试生物试题（含解析）

绝密★启用前高二生物注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级和考号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1.下列有关传统发酵技术的说法，错误的是（）A.过早取食腌制的泡菜可能会摄入较多的亚硝酸盐，存在健康风险B.加盐腌制的目的不只是调味，还有抑制杂菌生长，防止腐败等作用C.在氧气充足的条件下，果酒在醋酸菌的作用下能进一步发酵成果醋D.腐乳发酵中微生物会把大分子有机物分解为小分子有机物，有机物种类一般减少【答案】D【解析】【详解】A、泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量先升高后降低，过早取食时亚硝酸盐含量较高，摄入过多存在健康风险，A正确；B、腌制过程中加入食盐，高浓度盐溶液可使杂菌渗透失水死亡，起到抑制杂菌生长、防止腐败的作用，同时也能调节风味，B正确；C、醋酸菌为好氧微生物，在氧气充足、糖源不足时可将果酒中的乙醇转化为乙酸，进而发酵得到果醋，C正确；D、腐乳发酵过程中，微生物产生的蛋白酶、脂肪酶等会将蛋白质、脂肪等大分子有机物分解为多肽、氨基酸、甘油、脂肪酸等多种小分子有机物，有机物种类会增加而非减少，D错误。2.研究人员筛选出了一种石油降解菌。下列叙述错误的是（）A.制备石油降解菌的培养基时，应先灭菌再调节pHB.配制选择培养基时应以石油为唯一碳源C.接种时，接种环在使用前后均需灼烧灭菌D.倒平板时，培养基温度一般控制在50℃左右【答案】A【解析】【详解】A、制备培养基的正确操作顺序为计算、称量、溶化、调节pH、灭菌、倒平板，若先灭菌再调节pH，调节过程会引入杂菌污染已灭菌的培养基，A错误；B、筛选石油降解菌的选择培养基需以石油为唯一碳源，仅能利用石油的微生物可存活，可起到筛选目的，B正确；C、接种环接种前灼烧可杀灭表面杂菌，避免污染待接种的菌种；接种后灼烧可杀灭残留的菌种，避免污染环境、感染操作者，因此使用前后均需灼烧灭菌，C正确；D、倒平板时培养基温度控制在50℃左右，既可以避免温度过高烫伤操作者，也可以避免温度过低琼脂凝固无法顺利倒平板，D正确。3.发酵工程广泛应用于工农业领域，在解决粮食、环境、能源等重大问题上贡献巨大。下列相关叙述正确的是（）A.利用基因工程菌生产胰岛素不属于发酵工程的应用B.传统发酵都利用天然菌种，发酵工程只能用改造的菌种C.发酵工程生产的单细胞蛋白需要通过提取、分离等技术获得D.在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等【答案】D【解析】【详解】A、利用基因工程菌生产胰岛素时，需要通过发酵工程大规模培养工程菌以获得产物，属于发酵工程的应用范畴，A错误；B、发酵工程的菌种既可以是经人工改造的工程菌，也可以是天然筛选得到的野生菌种，并非只能使用改造的菌种，B错误；C、单细胞蛋白本质是发酵获得的微生物菌体本身，仅需过滤、干燥等简单处理即可得到，不需要额外的产物提取、分离操作，C错误；D、发酵过程中需要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等参数，以此监控发酵进程，及时调整发酵条件，保障发酵效率和产物产量，D正确。4.下图表示三类生物技术的包含关系。下列叙述错误的是（）A.若③为微生物培养，②为培养基制备技术，①为琼脂固体培养基配制，则符合图示关系B.若③为植物细胞工程，②为植物体细胞杂交技术，①为原生质体融合，则符合图示关系C.若③为动物细胞工程，②为动物体细胞核移植技术，①为单克隆抗体制备，则符合图示关系D.若③为发酵工程，②为菌种选育技术，①为诱变育种，则符合图示关系【答案】C【解析】【详解】A、微生物培养（③）的核心环节包含培养基制备技术（②），培养基制备包括琼脂固体培养基配制（①）、液体培养基配制等，A正确；B、植物细胞工程（③）包含植物体细胞杂交、植物组织培养等技术，植物体细胞杂交技术（②）的步骤包含原生质体制备、原生质体融合（①）、杂种细胞筛选和植物组织培养等，B正确；C、动物细胞工程（③）包含动物细胞培养、动物细胞融合、动物体细胞核移植、单克隆抗体制备等技术，单克隆抗体制备（①）基于动物细胞融合技术，和动物体细胞核移植技术（②）是并列关系，不存在从属关系，C错误；D、发酵工程（③）的流程包含菌种选育、扩大培养、发酵、产物分离提纯等环节，菌种选育技术（②）包含诱变育种（①）、基因工程育种等选育方法，D正确。5.研究人员利用植物组织培养技术，选取草莓茎尖作为外植体培育脱毒苗。下列说法错误的是（）A.选取茎尖作为外植体培育脱毒苗，原因是茎尖病毒极少甚至无病毒B.该过程需先后经过脱分化和再分化两个核心阶段C.培养基中生长素与细胞分裂素的比例会影响愈伤组织的分化方向D.培育获得的脱毒苗遗传物质与原草莓植株不相同【答案】D【解析】【详解】A、植物茎尖属于分生区，细胞分裂速度快，病毒极少甚至无病毒，因此选取茎尖作为外植体可培育脱毒苗，A正确；B、植物组织培养的核心阶段为脱分化和再分化，培育脱毒苗的过程需先后经过这两个阶段，B正确；C、培养基中生长素与细胞分裂素的比例会调控愈伤组织的分化方向：比例较高时利于根的分化，比例较低时利于芽的分化，比例适中时利于愈伤组织的形成，C正确；D、植物组织培养属于无性繁殖，培育过程中细胞仅进行有丝分裂，遗传物质不发生改变，因此获得的脱毒苗遗传物质与原草莓植株相同，D错误。6.花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性，为获得具有抗病性状的花椰菜新品种，研究人员利用植物体细胞杂交技术进行培育，如图1所示。图2是利用蛋白质电泳技术分析了植株中某些特异性蛋白。下列有关说法正确的是（）A.过程①需用胰蛋白酶处理花椰菜和紫罗兰细胞，获得原生质体B.过程②诱导原生质体融合的方法中，离心法属于化学诱导法C.过程②获得的融合细胞染色体数目均为32条D.植株4、5同时含两种植物的特有蛋白，是符合育种目标的杂种植株【答案】D【解析】【详解】A、过程①是去除植物细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此需要用纤维素酶和果胶酶处理，A错误；B、诱导原生质体融合的方法中，离心属于物理诱导法，B错误；C、原生质体融合时，会得到多种融合细胞：同种原生质体融合也会发生，只有花椰菜和紫罗兰的异源融合细胞染色体数才是18+14=32条，同种花椰菜融合细胞染色体数为36条，同种紫罗兰融合细胞染色体数为28条，C错误；D、由图2可知，I花椰菜特有花椰菜的两条蛋白条带，Ⅱ紫罗兰特有紫罗兰的一条蛋白条带；植株4、5同时存在两种植物的特有蛋白条带，说明是同时含有两者遗传物质的杂种植株，能获得紫罗兰的抗病性状，符合育种目标，D正确。7.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养过程中不需要考虑渗透压这一环境参数B.动物细胞培养时，培养液要进行严格灭菌，培养用具消毒即可C.为防止动物细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量抗生素D.动物细胞培养时，添加CO2的主要作用是维持培养液的pH和刺激细胞呼吸【答案】C【解析】【详解】A、动物细胞培养过程中需要维持适宜的渗透压，避免细胞失水皱缩或吸水涨破，渗透压是重要的培养环境参数，A错误；B、动物细胞培养时，培养液和培养用具都需要进行严格灭菌，防止杂菌污染，仅对培养用具消毒无法彻底消灭芽孢等休眠体，会造成污染，B错误；C、抗生素可抑制细菌的生长繁殖，向培养液中加入适量抗生素能有效防止动物细胞培养过程中的细菌污染，C正确；D、动物细胞培养时添加CO₂的主要作用是维持培养液的pH，并不具备刺激细胞呼吸的功能，D错误。8.干细胞是动物体内具有分裂和分化能力的细胞，在医学和生物学研究中具有重要价值。下列关于干细胞的叙述，错误的是（）A.将成纤维细胞诱导形成iPS细胞的过程属于细胞分化B.成体干细胞具有分裂和分化能力，可用于组织损伤的修复C.已分化的T细胞、B细胞等体细胞，都可以被诱导成为iPS细胞D.造血干细胞是发现最早的一类成体干细胞，主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中【答案】A【解析】【详解】A、细胞分化是细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程，方向是细胞趋于功能专门化；将已经分化的成纤维细胞诱导为具有分裂分化能力的iPS细胞的过程属于脱分化，不属于细胞分化，A错误；B、成体干细胞保留有分裂和分化为特定功能组织细胞的能力，可分化出对应细胞修复损伤的组织，B正确；C、已分化的动物体细胞都可以通过导入诱导因子等方式被诱导脱分化为iPS细胞，T细胞、B细胞等体细胞都可作为诱导iPS细胞的原料，C正确；D、造血干细胞是最早被发现的成体干细胞，可分化为各类血细胞，主要存在于成体的骨髓、外周血和脐带血中，D正确。9.科学家利用灭活的仙台病毒可诱导动物细胞融合，该技术广泛应用于单克隆抗体制备等领域。下列关于动物细胞融合的叙述，错误的是（）A.病毒诱导融合的原理是使病毒失去抗原性B.仙台病毒可与细胞膜发生作用，使细胞紧密凝集直至融合C.融合形成的杂交瘤细胞必须经过筛选才能用于生产单克隆抗体D.与融合前相比，融合细胞的遗传物质发生了改变【答案】A【解析】【详解】A、灭活仙台病毒诱导融合时，灭活处理仅使病毒失去感染、致病能力，并不会让病毒失去抗原性；病毒诱导融合的原理是：灭活病毒表面的糖蛋白仍可与细胞膜相互作用，诱导细胞膜融合，A错误；B、灭活仙台病毒可与细胞膜发生作用，使细胞紧密凝集，进而促使细胞膜融合，B正确；C、细胞融合后会得到未融合细胞、同种细胞融合细胞、杂交瘤细胞等多种类型，必须经过筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，才能用于生产单克隆抗体，C正确；D、融合细胞整合了两个来源细胞的遗传物质，和融合前的单个细胞相比，融合细胞的遗传物质发生了改变，D正确。10.我国特有的珍稀物种长江江豚已被列为极危物种，科研团队为了拯救这一物种，正探索利用体细胞核移植技术进行克隆保护。下列关于该技术的应用，叙述正确的是（）A.可直接将供体细胞核移植到去核的精子中，以获得重构胚B.克隆后代的遗传物质与核供体完全一致，能有效提升种群的遗传多样性C.体细胞核移植技术需要借助动物细胞培养技术才能完成D.体细胞核移植技术体现了动物体细胞的全能性【答案】C【解析】【详解】A、体细胞核移植的受体细胞是去核的MⅡ期卵母细胞，而非去核精子，精子无法为重构胚发育提供充足的营养和发育调控物质，A错误；B、克隆后代的核遗传物质与核供体一致，但细胞质遗传物质来自受体卵母细胞，遗传物质并非完全一致；克隆属于无性繁殖，无法产生更多基因型的个体，不能提升种群的遗传多样性，B错误；C、体细胞核移植过程中需要对供体细胞进行培养，获得重构胚后也需要进行早期胚胎培养，上述过程均需要借助动物细胞培养技术才能完成，C正确；D、体细胞核移植技术仅体现了动物体细胞的细胞核具有全能性，高度分化的动物体细胞目前无法直接发育为完整个体，不能体现动物体细胞的全能性，D错误。11.克隆羊多莉的培育属于克隆技术，以下四项中繁殖方式与其不同的是（）A.采用植物体细胞杂交技术获得的完整植株B.为治疗线粒体疾病而诞生的“三亲婴儿”的培育C.通过植物组织培养获得人工种子并发育成植株D.利用转基因动物的体细胞通过核移植技术繁育个体【答案】B【解析】【详解】克隆羊多莉的培育属于无性生殖，未经过两性生殖细胞的结合，子代遗传物质主要来自供核亲本。A、植物体细胞杂交技术先诱导不同植物体细胞融合，再经植物组织培养获得植株，无两性生殖细胞结合过程，属于无性生殖，与多莉繁殖方式相同，A不符合题意；B、“三亲婴儿”培育过程中存在精子与卵细胞的受精步骤，属于有性生殖，与多莉的无性生殖方式不同，B符合题意；C、植物组织培养利用植物细胞的全能性，由亲本体细胞直接发育为新个体，无两性生殖细胞结合过程，属于无性生殖，与多莉繁殖方式相同，C不符合题意；D、体细胞核移植技术繁育个体未经过两性生殖细胞结合，属于无性生殖，与多莉繁殖方式相同，D不符合题意。12.我国传统中药材人参中含有人参皂苷等多种药用次生代谢物，具有极高的经济和药用价值。科研人员利用植物细胞培养技术，建立了人参皂苷的工业化生产流程（如下图），以替代传统的人工栽培。下列相关叙述正确的是（）A.人参皂苷等次生代谢物是人参细胞生长和繁殖所必需的物质B.图中a过程为脱分化，此过程需要用纤维素酶和果胶酶去除外植体的细胞壁C.经b过程培养转基因细胞系获得的培养体系1，还需进行筛选D.培养体系3利用根的培养生产人参皂苷，体现了植物细胞的全能性【答案】C【解析】【详解】A、次生代谢物不是植物细胞生长和繁殖所必需的物质，初生代谢产物才是细胞生命活动必需的，A错误；B、a过程为脱分化，植物组织培养的脱分化过程不需要去除细胞壁，去除细胞壁是原生质体融合技术的操作，B错误；C、转基因操作的转化率较低，且需筛选出人参皂苷产量高的细胞株，因此经b过程获得培养体系1后还需进行筛选，C正确；D、细胞全能性是指已分化的细胞发育为完整个体的潜能，培养体系3仅获得根这一器官，没有得到完整植株，未体现植物细胞的全能性，D错误。13.胚胎工程技术为现代畜牧业提供了快速繁育优良品种的途径。下列关于哺乳动物胚胎工程的叙述，错误的是（）A.体外受精时，需将获能处理的精子与MⅡ期的卵母细胞进行受精B.高等动物早期胚胎发育顺序为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚C.早期胚胎发育的卵裂期，细胞数量增加但胚胎总体积并不增加D.进行胚胎分割时，可选择发育正常的桑葚胚并将其内细胞团均等分割【答案】D【解析】【详解】A、体外受精时，精子需经过获能处理才具备受精能力，卵母细胞需培养到减数第二次分裂（MⅡ）期才具备受精能力，二者可在该阶段完成受精，A正确；B、高等动物早期胚胎发育的顺序为受精卵经卵裂过程依次形成桑葚胚、囊胚、原肠胚，B正确；C、卵裂期细胞通过有丝分裂增殖，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，甚至略有缩小，C正确；D、内细胞团是囊胚阶段才分化出的结构，桑葚胚阶段尚未出现细胞分化、无内细胞团；只有对囊胚进行胚胎分割时，才需要将内细胞团均等分割，D错误。二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。14.科研人员为获得高产乳糖酶的酵母菌，从牧区奶酪中进行菌种的分离和纯化，流程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述正确的是（）A.培养基甲和乙均属于液体培养基，其主要作用是扩大培养目的菌株B.将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法C.菌落的蓝色深浅可反映酵母菌产生乳糖酶的量或活性，蓝色越深说明乳糖酶的产量或活性越高D.含X-gal的培养基属于选择培养基，可筛选出能产生乳糖酶的酵母菌【答案】BC【解析】【详解】A、培养基甲为液体培养基，作用是扩大培养目的菌株；培养基乙为固体培养基，用于分离纯化获得单菌落，不属于液体培养基，A错误；B、接种前先对菌液进行梯度稀释，再取菌液接种到固体培养基乙上获得单菌落，符合稀释涂布平板法的操作特征，B正确；C、X-gal被乳糖酶分解后会产生蓝色产物，菌落蓝色越深，说明被分解的X-gal越多，对应酵母菌的乳糖酶产量越高或活性越强，C正确；D、含X-gal的培养基通过菌落颜色鉴别菌株是否产乳糖酶，属于鉴别培养基，并非选择培养基（选择培养基的功能是允许特定微生物生长、抑制其他微生物生长，该培养基无此功能），D错误。15.为解决珍稀植物繁育困难、新型药物研发效率低等问题，科研团队依托植物细胞工程技术开展研究，为生物资源保护和医药产业发展提供核心技术支持。下列关于植物细胞工程的叙述错误的是（）A.利用植物体细胞杂交技术培育新品种时仅体现了细胞膜的流动性B.植物微型繁殖技术既能实现种苗的大量繁殖，也能保持优良品种的遗传特性C.紫草宁的工厂化生产主要是通过提高细胞数量来提高紫草宁产量的D.单倍体育种中通过花药离体培养获得的植株都能保持亲本优良品质的遗传特性【答案】AD【解析】【详解】A、植物体细胞杂交技术中，原生质体融合过程体现细胞膜的流动性，而将杂种细胞培育为完整杂种植株的过程还体现了植物细胞的全能性，并非仅体现细胞膜的流动性，A错误；B、植物微型繁殖的技术基础是植物组织培养，属于无性繁殖，既可以实现种苗的快速大量繁殖，也能保持优良品种的遗传特性，B正确；C、紫草宁是植物细胞的代谢产物，工厂化生产时通过大规模培养愈伤组织、提高细胞总数来提升紫草宁的总产量，C正确；D、花药离体培养获得的是单倍体植株，单倍体由减数分裂产生的配子发育而来，已经发生基因重组，不一定携带亲本的优良基因，且单倍体植株弱小、高度不育，无法保持亲本优良品质的遗传特性，D错误。16.“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（）A.在胚胎移植前，进行性别鉴定属于筛选操作B.利用以尿素为唯一氮源的选择培养基可筛选出分解尿素的细菌C.动物细胞培养时，可通过传代培养筛选出无限增殖的细胞D.植物组织培养过程中，可通过筛选获得脱毒苗、抗逆性强的新品种【答案】D【解析】【详解】A、胚胎移植前进行性别鉴定，目的是筛选出符合需求性别的胚胎，属于筛选操作，A正确；B、以尿素为唯一氮源的选择培养基中，只有能分解尿素的细菌可利用尿素作为氮源生长，其他微生物因缺乏可利用的氮源无法生长，因此可筛选出分解尿素的细菌，B正确；C、正常动物细胞的传代增殖次数存在上限，只有发生突变获得无限增殖能力的细胞才能在传代培养过程中持续存活，因此可通过传代培养筛选出无限增殖的细胞，C正确；D、脱毒苗是利用植物茎尖、根尖等几乎不含病毒的分生区组织直接进行组织培养获得的，不需要经过筛选；且常规植物组织培养属于无性繁殖，仅能保持亲本的遗传性状，无法直接筛选得到抗逆性强的新品种，D错误。17.CTLA-4和PD-1为T细胞表面受体，二者与相应分子结合后，可抑制T细胞激活或诱导T细胞凋亡，使肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4、抗PD-1单克隆抗体均有抗肿瘤效果。研究人员通过细胞融合获得双杂交瘤细胞，该细胞可在液体培养基中悬浮增殖，并分泌抗CTLA-4和抗PD-1的双克隆抗体，其疗效更佳，如图所示。下列说法正确的是（）A.双克隆抗体可同时结合CTLA-4和PD-1，解除对T细胞的抑制B.双克隆抗体的疗效更佳，是因为其能直接裂解肿瘤细胞C.抑制CTLA-4和PD-1的表达，T细胞可能会过度激活从而导致自身免疫病的发生D.双杂交瘤细胞能产生抗CTLA-4和抗PD-1抗体的根本原因是基因的选择性表达【答案】AC【解析】【详解】A、双克隆抗体可同时结合CTLA-4和

PD-1，可避免二者与相应分子结合后，解除对

T细胞的抑制，A正确；B、双克隆抗体能通过解除对T细胞的抑制实现对肿瘤细胞的裂解，而不是直接裂解肿瘤细胞，B错误；C、抑制CTLA-4和

PD-1的表达，T细胞可能不会被抑制而表现为过度激活从而导致自身免疫病的发生，C正确；D、双杂交瘤细胞能产生抗

CTLA-4和抗

PD-1抗体的根本原因是融合后的杂交瘤细胞同时携带了编码两种抗体的基因，并进行了表达，D错误。18.细胞工程作为现代生物技术的核心分支，在农牧生产、医疗卫生等方面发挥了重要作用。下列叙述错误的是（）A.植物体细胞杂交过程中，杂种细胞形成的标志是形成新的细胞壁B.植物组织培养时，愈伤组织的形成和再分化过程均需在光照条件下进行C.体外培养的动物细胞都需用胰蛋白酶处理后才能用于传代培养D.用96孔板筛选杂交瘤细胞时，每个孔可接种多个细胞以快速获得大量抗体【答案】BCD【解析】【详解】A、植物体细胞杂交过程中，杂种细胞形成的标志是形成新的细胞壁，此后经过植物组织培养过程获得杂种植株，A正确；B、植物组织培养时，愈伤组织的形成过程不需要光照，而再分化过程中诱导生芽阶段需要光照条件，B错误；C、体外培养的动物细胞可以分为两大类：悬浮培养的细胞和贴壁生长的细胞；对于悬浮培养的细胞，原代培养和传代培养都不会出现细胞贴壁；对于贴壁生长的细胞，原代培养和传代培养时都会出现细胞贴壁，且原代培养初期细胞自然贴壁过程中无需使用胰蛋白酶，而传代培养的细胞需要定期用胰蛋白酶处理，C错误；D、用96孔板筛选杂交瘤细胞时，需通过有限稀释法使每个孔内至多接种一个细胞，以确保获得的抗体来自单克隆细胞，D错误。三、非选择题：本题共5题，共59分。19.普洱茶是中国传统名茶，其核心活性成分——茶褐素具有降脂、抗氧化、增强免疫力等多种生理功能。在普洱熟茶的固体发酵过程中，科研人员分离出优势菌株——塔宾曲霉（好氧微生物），该菌可在绿茶浸提液（富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白质、咖啡碱、矿物质和维生素等）中生长繁殖，通过降解茶多酚促进茶褐素生成。不同发酵温度下塔宾曲霉促进生成的茶褐素的浓度如图所示。回答下列问题：（1）获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术主要包括消毒和灭菌。消毒是指______________________________________________________。实验室常用的灭菌方法包括______________________________________________________（写出三种），其主要目的是______________________________________________________。（2）从发酵茶样中分离塔宾曲霉时，样品在接种前____________（填“需要”或“不需要”）消毒，理由是______________________________________________________。（3）绿茶浸提液可为塔宾曲霉生长提供的营养物质有__________________________________________。塔宾曲霉为好氧微生物，富集培养时需摇瓶振荡，振荡的主要目的是_____________________________________________________________________。（4）为检测发酵1天时塔宾曲霉的数量，将发酵液稀释103倍后，分别取0.1mL稀释液均匀涂布于3个平板上，培养后菌落数量分别为57、52和53个，则每毫升发酵液中塔宾曲霉活菌数量为____________个。（5）结合生产效率与成本分析，由图可知一般在第____________天结束发酵即可获得较高浓度的茶褐素。为探索生产茶褐素的最适温度，需设计下一步实验，请写出实验思路：______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。【答案】（1）①.使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物②.湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌③.杀灭所有微生物（包括芽孢和孢子），防止杂菌污染（2）①.不需要②.消毒会杀死样品中目标菌株塔宾曲霉，导致分离筛选失败（3）①.碳源、氮源、水、无机盐②.增加培养液溶氧量，同时使菌株与营养物质充分接触，提高增殖和代谢效率（4）5.4×105（5）①.6②.在30℃～42℃之间设置一系列温度梯度，用同样的方式培养塔宾曲霉，并检测不同发酵温度下塔宾曲霉生成茶褐素的浓度，找到茶褐素浓度最高时所对应的温度即为生产茶褐素的最适温度【解析】【小问1详解】消毒是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）。实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，灭菌的主要目的是杀灭所有微生物（包括芽孢和孢子），防止杂菌污染。【小问2详解】从发酵茶样中分离塔宾曲霉时，样品在接种前不需要消毒，理由是发酵茶样本身就是目的菌株塔宾曲霉的来源，消毒会杀死样品中目标菌株塔宾曲霉，导致分离筛选失败。【小问3详解】绿茶浸提液中富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白质、矿物质和维生素等，可为塔宾曲霉生长提供的营养物质有碳源、氮源、水和无机盐。塔宾曲霉为好氧微生物，富集培养时摇瓶振荡的主要目的是增加培养液中的溶氧量，同时使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。【小问4详解】首先计算3个平板的平均菌落数：(57+52+53)/3=54个，根据稀释涂布平板法的计算公式，每毫升发酵液中塔宾曲霉活菌数量为：54÷0.1×103=5.4×105个。【小问5详解】结合生产效率与成本分析，由图可知，第6天时30℃、37℃、42℃三组的茶褐素浓度均已达到较高水平，后续增长幅度极小，因此一般在第6天结束发酵即可。要探索生产茶褐素的最适温度，实验思路为：在30℃～42℃之间设置更小的温度梯度，将等量的塔宾曲霉分别接种到等量的绿茶浸提液中，在相同且适宜的条件下发酵相同时间，检测各组茶褐素的浓度，茶褐素浓度最高组对应的温度即为最适温度。20.红酸汤是我国黔南地区的特色发酵食品，其发酵过程中乳酸菌起关键作用。研究人员从黔南三县市红酸汤中分离出布氏乳杆菌，并对其进行研究。回答下列问题：（1）将稀释到一定浓度的酸汤样品，取0.1mL涂布于MRS琼脂培养基（最常用的乳酸菌培养基），37℃培养48h，利用平板划线法纯化获得菌株，从功能上分析，所用的MRS琼脂培养基属于____________培养基。进行图1所示接种时，接种环需灼烧___________次，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是__________________。（2）若需对布氏乳杆菌进行计数，可采用的接种方法是________________，该方法计数结果通常比实际值_______（填“偏大”或“偏小”），其原因是__________________________。除上述计数方法外，还可利用____________________测定微生物数量。（3）研究人员筛选出SD-1、DY-1、DS-1三株较好的布氏乳杆菌的菌株，探究其相关特性，部分实验结果如图2~图4所示，图2、图3分别为三种菌株的生长曲线和产酸曲线。注：吸光度值越大说明菌体浓度越高，菌株生长能力越强。①测定菌株的吸光度时，需先将待测溶液__________，以防止菌体沉淀导致测量结果不准确，据图2、图3分析，相同培养条件下，繁殖速度快、产酸能力强的菌株是_____________，判断依据是_________________。②研究人员还测定了三株布氏乳杆菌的发酵上清液对大肠杆菌等5种指示菌生长的抑制情况，结果如图4所示。由图可知，三株布氏乳杆菌对5种指示菌均有抑菌效果，其中_______________菌分别对水弧球菌和金黄色葡萄球菌的抑菌能力最好。（4）研究人员结合其他相关实验，最终得出DY-1菌株可作为发酵食品开发的菌株选择。若将该菌应用到工业上发酵制作泡菜时，需先进行菌种的_______________，发酵的中心环节是_____________，后续经过相关工艺获得成品泡菜。【答案】（1）①.选择②.6③.逐步稀释样品中的微生物，使聚集的菌体逐步分散，最终获得单个菌落（2）①.稀释涂布平板法②.偏小③.当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落④.显微镜直接计数法（3）①.振荡摇匀②.DY-1③.DY-1的吸光度上升最快且最终值高，pH下降最快且最终值低④.SD-1、SD-1和DY-1（4）①.扩大培养②.发酵罐内发酵【解析】【小问1详解】MRS琼脂培养基是专门用于培养乳酸菌的，从功能上属于选择培养基（它可以选择性地让乳酸菌生长，抑制其他微生物）。图1是平板划线法，整个过程中接种环需要灼烧6次（第一次是划线前，之后每次划线前都要灼烧，最后一次划线结束后还要灼烧一次）。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始，目的是逐步稀释微生物，使聚集的菌种逐步分散，最终获得单个菌落。【小问2详解】需对布氏乳杆菌进行计数，可采用的接种方法是稀释涂布平板法。该方法计数结果通常比实际值偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致计数结果偏低。除上述计数方法外，还可利用显微镜直接计数法测定微生物数量。【小问3详解】①菌体沉淀会导致测量结果不准确。因此，在测量前需要将菌液摇匀或振荡，使菌体均匀悬浮在液体中。图2中DY-1的吸光度值上升最快且最终值较高，说明其繁殖速度快；图3中DY-1的pH下降最快且最终值最低，说明其产酸能力强。②由图4可知，三株布氏乳杆菌对5种指示菌均有抑菌效果，其中SD-1、SD-1和DY-1对水弧球菌、金黄色葡萄球菌的抑菌能力最好。【小问4详解】若将DY-1菌株应用到工业上发酵制作泡菜时，需先进行菌种的扩大培养，发酵的中心环节是发酵（主要是乳酸菌发酵产生乳酸），后续经过相关工艺获得成品泡菜。21.柑橘是我国南方重要的经济果树，长期无性繁殖导致病毒在植株体内累积，引发树势衰退、果实变小、品质下降等问题。科研人员利用植物组织培养技术，以柑橘茎尖作为外植体，成功培育出无病毒柑橘种苗，实现了优质种苗的工厂化生产，技术流程如下图所示。请结合所学知识，回答下列问题：（1）在进行过程①之前，需对茎尖进行严格的___________处理，该处理的核心目的是________________。（2）过程②为_________，过程③和④共同完成了愈伤组织的_________。过程③（生芽）和过程④（生根）所需培养基的激素配比不同，过程③所需培养基中植物激素的具体配比特点是_________。（3）该技术的理论基础是________________。与传统扦插、分株等无性繁殖方式相比，利用该技术培育柑橘脱毒苗的优势是________________（写出两点）。若要利用此技术大规模生产柑橘精油等次生代谢产物，可对图中___________进行液体悬浮培养。（4）实验后期，需将培育的柑橘脱毒苗进行炼苗处理后再移栽到田间，炼苗的目的是_________________。【答案】（1）①.消毒②.防止杂菌污染（2）①.脱分化②.再分化③.细胞分裂素和生长素的比例偏大

（3）①.植物细胞的全能性②.繁殖速度快，可快速大量获得保持亲本优良性状的优质种苗，同时该生产过程不受季节、环境的限制③.愈伤组织（4）使试管苗逐步适应外界自然环境，提高抗逆性，提高移栽成活率【解析】【小问1详解】在进行过程①之前，需对茎尖进行严格的消毒处理，该处理的核心目的是防止杂菌污染，且不会对外植体活性造成影响。【小问2详解】过程②为脱分化过程，获得愈伤组织，过程③和④共同完成了愈伤组织的再分化过程。过程③（生芽）和过程④（生根）所需培养基的激素配比不同，过程③所需培养基中植物激素的具体配比特点是细胞分裂素和生长素的比例较高而后者中该比例较低。【小问3详解】该技术的理论基础是植物细胞的全能性。与传统扦插、分株等无性繁殖方式相比，利用该技术培育柑橘脱毒苗的优势是获得无病毒植株，提升柑橘产量与品质；繁殖速度快，可快速大量获得保持亲本优良性状的优质种苗，同时该生产过程不受季节、环境的限制。若要利用此技术大规模生产柑橘精油等次生代谢产物，可对图中愈伤组织进行液体悬浮培养，而后对获得的大量细胞进行诱导培养获得柑橘精油等次生代谢产物。【小问4详解】脱毒苗长期生长在无菌、恒温恒湿的人工培养环境，对自然环境适应力差，炼苗的目的是使试管苗逐步适应外界自然环境，提高抗逆性，提高移栽成活率。22.人感染埃博拉病毒（EV）会引起致命的出血热，该病毒表面的糖蛋白（EV-GP）是主要的抗原，能诱导机体产生特异性免疫反应。为寻找治疗EV病的有效方法，研究人员开展了系列研究，回答下列问题：（1）科学家采集了多年前感染EV并已康复的甲、乙两人的血液，检测抗EV-GP抗体的水平，结果如图1所示，据此分析，应选取_______的血液分离记忆B细胞用以制备单克隆抗体，理由是_________________。（2）利用小鼠制备抗EV-GP单克隆抗体时，可将分离的记忆B细胞与_______细胞融合，融合过程中可采用的诱导方法有______________________（至少写出两种）；融合后需用特定的选择培养基筛选，目的是获得________________细胞，该细胞的特点是_______________；筛选出的细胞还需要进行_____________和________________，最终获得能分泌特异性抗EV-GP抗体的细胞株；将该细胞株注射到小鼠腹腔中，可从腹水中提取大量单抗。单克隆抗体制备过程运用了_____________________（写出两种）等技术手段。（3）研究人员将制备的多种单抗分别与病毒混合，获得两种抑制效果较好的单克隆抗体A和B.研究人员用分子结构成像技术证实了A、B与EV-GP结合的位点不同，若将A和B进行如图2所示的实验，一组加未标记抗体A和荧光标记抗体B，二组加未标记抗体B和荧光标记抗体B，则两组荧光强度相比结果是________________。（4）抗EV-GP单抗可用于治疗EV感染，与传统的血清抗体治疗相比，单克隆抗体治疗的优势是________________。【答案】（1）①.甲②.甲组血浆中抗体的浓度明显大于对照组和乙组，且乙组血浆中的抗体浓度与对照组无明显差异（2）①.骨髓瘤②.PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法（任选两种）③.杂交瘤④.既能无限增殖，又能产生特异性抗体⑤.克隆化培养⑥.抗体检测⑦.动物细胞融合、动物细胞培养（3）一组的荧光强度高于二组（4）特异性强、灵敏度高、可大量制备【解析】【小问1详解】由图1可知随着血浆稀释度的增大，抗体浓度逐渐下降，但甲组血浆中抗体的浓度明显大于对照组和乙组，且乙组血浆中的抗体浓度与对照组无明显差异，因此选用甲的血液分离记忆B细胞用以制备单克隆抗体（单抗）。【小问2详解】骨髓瘤细胞的特点是能无限增殖，和记忆B细胞融合后可以让杂交细胞既保留抗体产生能力，又能无限分裂。诱导动物细胞融合的方法有PEG（聚乙二醇）融合法、电融