DBXM088-2022 实验牛 微生物学等级及监测

DB22/***—20**

实验牛微生物学等级及监测

1范围

本文件规定了实验用牛的微生物等级分类、检测要求、检测程序、检测方法、检测规则、结果判定、

结论。

本文件适用于实验牛的微生物检测。

2规范性引用文件

本标准引用了如下规范性文件。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不

注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T14926.46实验动物钩端螺旋体检测方法

GB/T18089蓝舌病病毒分离、鉴定及血清中和抗体检测技术

GB/T18637牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术

GB/T18645动物结核病诊断技术

GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术

GB/T18653胎儿弯曲杆菌的分离鉴定方法

GB/T18935口蹄疫诊断技术

GB/T22915口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测方法

GB/T27528口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法

GB/T27637副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法

GB/T27639结核病病原菌实时荧光PCR检测方法

GB/T27981牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法

GB/T39602牛结节性皮肤病诊断技术

GB/T44613牛羊副流感病毒3型诊断技术

NY/T539副结核病诊断技术

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

NY/T561动物炭疽诊断技术

NY/T562动物衣原体病诊断技术

NY/T574地方流行性牛白血病琼脂凝胶免疫扩散试验方法

NY/T575牛传染性鼻气管炎诊断技术

SN/T1086牛生殖道弯曲杆菌病检疫技术规范

SN/T1087Q热检疫技术规范

SN/T1088布氏杆菌检疫技术规范

SN/T1129牛病毒性腹泻/黏膜病检疫技术规范

SN/T1315牛地方流行性白血病检疫技术规范

SN/T1693牛流行性热微量血清中和试验操作规程

1

T/SDAA0045多杀性巴氏杆菌的检测PCR法

T/CVMA88牛轮状病毒微滴式数字RT-PCR检测方法

T/CVMA145牛呼吸道合胞体病毒实时荧光RT-PCR检测方法

《中华人民共和国动物防疫法》（2021版）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

3.1实验用牛experimentalcattle

经人工饲育，对其携带的微生物实行控制，来源清楚，用于科学研究、教学、生产和检定以及其

他科学实验的牛。

3.2普通级牛conventional(CV)cattle

不携带重要的人兽共患病病原和牛烈性传染病病原的实验牛，简称普通级牛。

3.3无特定病原体级牛specificpathogenfree(SPF)cattle

无特定病原体级牛，除符合前款各项规定外，还应无特别规定的特异性病原和抗体，并符合特别规

定的有关要求。

4等级分类

根据对微生物控制的程度，实验牛分为普通级、无特定病原体级两个等级。

5检测要求

5.1外观检查

对待检实验用牛的精神状态、动静姿态、被毛、天然孔分泌物等进行外观检查，无异常。

5.2微生物检测项目

各等级实验牛病原菌监测项目见表1。

各等级实验牛病毒监测项目见表2。

表1实验牛病原菌检测项目

动物等级病原菌检测要求

无必须检测

布鲁氏菌Brucella

特可免疫

普

定

通牛分枝杆菌Mycobacteriumbovis必须检测

病

动

原炭疽芽胞杆菌Bacillusanthracis

物必要时

体钩端螺旋体Leptospira

检测

动伯氏疏螺旋体Borreliaburgdorferi

2

DB22/***—20**

物贝氏柯克斯体（Coxiellaburnetii）

胎儿弯曲杆菌Campylobacterfetus

衣原体Chlamydia

副结核分枝杆菌MycobacteriumaviumSubsp.paratuberculosis

牛荚膜A、B型多杀性巴氏杆菌Bovinepasteurellamultocidacapsular

typeAandtypeB

牛支原体Mycoplasmabovis

表2实验牛病毒检测项目

动物等级病毒检测要求

普

通必须检测

口蹄疫病毒Food-and-mouthdiseasevirus

动可免疫

无物

特牛传染性鼻气管炎病毒Infectiousbovinerhinotracheitisvirus

定牛病毒性腹泻/粘膜病毒Bovineviraldiarrheavirus/mucosaldisease

病virus

原牛副流感病毒3型Bovineparainfluenzavirustype3

体牛呼吸道合胞体病毒Bovinerespiratorysyncytialvirus

必须检测

动牛轮状病毒Bovinerotavirus

物牛流行性出血热病毒Bovineephemeralfevervirus

牛白血病病毒Bovineleukemiavirus

蓝舌病病毒Bluetonguevirus

牛结节性皮肤病病毒Lumpyskindiseasevirus

5.3检测项目分类

5.3.1必须检测项目：在进行实验牛质量评价时必须检测的项目。普通级可免疫项目，无特定病原体

级不能免疫普通级可免疫的项目。

5.3.2必要时检测项目：申请生产许可证、从省外或国外引进实验牛、疑有该病原体感染和实验特殊

需要时应检测的项目。普通牛规定的必要时检测项目，在无特定病原体牛中为必须检测项目。

6检测程序

6.1对被检实验牛编号，临床观察健康情况，符合采样要求。

6.2受检实验牛应当日按病毒、细菌、真菌检测要求联合采样，应符合图1的检测程序。

3

图1检测程序

7检测方法

7.1检测方法见表3。

根据所鉴定实验牛的微生物等级选择相应的微生物鉴定方法，鉴定方法见表2.

表3实验牛微生物检测方法

检测方法

微生物检测标准适用范围

GB/T18935抗原检测（食道—喉部分泌物）

核酸检测（组织）

口蹄疫病毒GB/T22915核酸检测(血样、咽喉拭子)

GB/T27528核酸检测（水泡液）

GB/T18646抗体检测（血清或奶样）

布鲁氏菌SN/T1088核酸检测（阴道拭子、奶样、组织）

GB/T18645皮内变态反应试验、抗原检测（血样、奶样、粪便或病料）

牛分枝杆菌GB/T27639核酸检测（血样、奶样、粪便或病料）

抗原检测（血液、病变部位的水肿液或渗出液）

炭疽芽胞杆菌NY/T561核酸检测（血液、病变部位的水肿液或渗出液）

GB/T14926.46抗体检测

钩端螺旋体SN/T3741.1抗原检测（血液、尿液、组织）

4

DB22/***—20**

伯氏疏螺旋体SN/T3392抗体检测、抗原检测（血样或蜱3）、核酸检测（血样或蜱）

抗体检测

贝氏柯克斯体SN/T1087抗原检测（阴道分泌物、奶样、粪便、动物组织或流产胎儿）

牛传染性鼻气管炎病GB/T27981核酸检测（血样、结膜/黏膜拭子、精液及动物组织）

毒NY/T575抗体检测、抗原检测（鼻拭子、阴道拭子、精液及组织）

牛病毒性腹泻-粘膜GB/T18637抗体检测、抗原检测（血样、鼻拭子、精液或动物组织）

病病毒SN/T1129核酸检测（血样、鼻拭子、精液或动物组织）

牛副流感病毒3型GB/T44613核酸检测（鼻拭子、肺组织）

牛荚膜A、B型多杀T/SDAA0045核酸检测（鼻拭子、肺组织）

性巴氏杆菌

副结核分枝杆菌GB/T27637核酸检测（血样、奶样、粪便或病料）

NY/T539抗体检测（血清或奶样）、抗原检测（粪便、病料）、皮内变态

反应

胎儿弯曲杆菌GB/T18653抗原检测（阴道粘液、包皮液、精液）

SN/T1086核酸检测（阴道粘液、包皮液、精液、流产胎儿或胎盘）

牛呼吸道合胞体病毒T/CVMA145核酸检测（鼻拭子、肺组织）

牛轮状病毒T/CVMA88核酸检测（肛拭子、新鲜粪便）

牛流行性出血热病毒NT/T543抗体检测

牛白血病病毒NY/T574抗体检测

SN/T1315抗原检测（血样）

SN/T1917核酸检测（血样、动物组织）

蓝舌病病毒GB/T18089抗体检测、抗原检测（血样、精液、动物组织或库蠓4）

核酸检测（血样、精液、动物组织或库蠓）

衣原体NY/T562抗体检测、抗原检测、核酸检测（流产胎儿或病料）

注1：如无注明，用于抗体检测的样本均为血清。

注2：抗原检测、核酸检测后“（）”中注明的是可用于检测的样本来源。

注3：蜱是伯氏疏螺旋体的传播媒介。

注4：库蠓是蓝舌病病毒的传播媒介。

8检测规则

8.1检测频率

普通级牛群每三个月至少检测一次、无特定病原体级生产牛群每三个月至少检测一次，实验牛

群每六个月至少检查一次。

8.2抽样

选择六月龄及以上的实验牛用于检测（也可根据需求抽样），随机抽样。

5

根据实验牛群体大小，抽样数量见表4。

表4抽样数量

群体大小抽样数量

小于20头不少于5头

21～100头不少于10头

101～500头不少于20头

大于500头不少于30头

8.3方法

可按病毒、细菌、真菌检测要求联合采样。

釆集血液及毛发、皮屑、鼻拭子、咽拭子、肛拭子（或新鲜粪便）的方法参照NY/T541进行。

检测结果存疑，需要进一步确诊时，应结合临床症状和前期检测结果，按照表2中的要求采集动物

组织或特定样本，以做进一步检测。

8.4样本要求

样本要有明显标识，写明检品名称、品系、等级、数量及检测项目等内容，安全送达实验室。涉及

疑似人畜共患病的病料，按照中华人民共和国动物防疫法规定执行。

9结果判定

9.1抗体检测

免疫项目，群体免疫合格率大于等于70%，判为合格。非免疫项目，血清样品全部阴性判为合格。

9.2病原和核酸检测

未见阳性结果为合格。

10判定结论

所有项目的检测结果均合格，判为符合相应的等级标准。否则，判为不符合相应的等级标准。

6

ICS

DB22

吉林省地方标准

DB22—

实验牛微生物学等级及监测

Experimentalcattle-Microbiologicalstandarsandmonitoring

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

吉林省市场监督管理厅发布

DB22/***—20**

实验牛微生物学等级及监测

1范围

本文件规定了实验用牛的微生物等级分类、检测要求、检测程序、检测方法、检测规则、结果判定、

结论。

本文件适用于实验牛的微生物检测。

2规范性引用文件

本标准引用了如下规范性文件。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不

注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T14926.46实验动物钩端螺旋体检测方法

GB/T18089蓝舌病病毒分离、鉴定及血清中和抗体检测技术

GB/T18637牛病毒性腹泻/粘膜病诊断技术

GB/T18645动物结核病诊断技术

GB/T18646动物布鲁氏菌病诊断技术

GB/T18653胎儿弯曲杆菌的分离鉴定方法

GB/T18935口蹄疫诊断技术

GB/T22915口蹄疫病毒荧光RT-PCR检测方法

GB/T27528口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法

GB/T27637副结核分枝杆菌实时荧光PCR检测方法

GB/T27639结核病病原菌实时荧光PCR检测方法

GB/T27981牛传染性鼻气管炎病毒实时荧光PCR检测方法

GB/T39602牛结节性皮肤病诊断技术

GB/T44613牛羊副流感病毒3型诊断技术

NY/T539副结核病诊断技术

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

NY/T561动物炭疽诊断技术

NY/T562动物衣原体病诊断技术

NY/T574地方流行性牛白血病琼脂凝胶免疫扩散试验方法

NY/T575牛传染性鼻气管炎诊断技术

SN/T1086牛生殖道弯曲杆菌病检疫技术规范

SN/T1087Q热检疫技术规范

SN/T1088布氏杆菌检疫技术规范

SN/T1129牛病毒性腹泻/黏膜病检疫技术规范

SN/T1315牛地方流行性白血病检疫技术规范

SN/T1693牛流行性热微量血清中和试验操作规程

1

T/SDAA0045多杀性巴氏杆菌的检测PCR法

T/CVMA88牛轮状病毒微滴式数字RT-PCR检测方法

T/CVMA145牛呼吸道合胞体病毒实时荧光RT-PCR检测方法

《中华人民共和国动物防疫法》（2021版）

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准

3.1实验用牛experimentalcattle

经人工饲育，对其携带的微生物实行控制，来源清楚，用于科学研究、教学、生产和检定以及其

他科学实验的牛。

3.2普通级牛conventional(CV)cattle

不携带重要的人兽共患病病原和牛烈性传染病病原的实验牛，简称普通级牛。

3.3无特定病原体级牛specificpathogenfree(SPF)cattle

无特定病原体级牛，除符合前款各项规定外，还应无特别规定的特异性病原和抗体，并符合特别规

定的有关要求。

4等级分类

根据对微生物控制的程度，实验牛分为普通级、无特定病原体级两个等级。

5检测要求

5.1外观检查

对待检实验用牛的精神状态、动静姿态、被毛、天然孔分泌物等进行外观检查，无异常。

5.2微生物检测项目

各等级实验牛病原菌监测项目见表1。

各等级实验牛病毒监测项目见表2。

表1实验牛病原菌检测项目

动物等级病原菌检测要求

无必须检测

布鲁氏菌Brucella

特可免疫

普

定

通牛分枝杆菌Mycobacteriumbovis必须检测

病

动

原炭疽芽胞杆菌Bacillusanthracis

物必要时

体钩端螺旋体Leptospira

检测

动伯氏疏螺旋体Borreliaburgdorferi

2

DB22/***—20**

物贝氏柯克斯体（Coxiellaburnetii）

胎儿弯曲杆菌Campylobacterfetus

衣原体Chlamydia

副结核分枝杆菌MycobacteriumaviumSubsp.paratuberculosis

牛荚膜A、B型多杀性巴氏杆菌Bovinepasteurellamultocidacapsular

typeAandtypeB

牛支原体Mycoplasmabovis

表2实验牛病毒检测项目

动物等级病毒检测要求

普