青岛农业大学成人教育《生物制药》期末考试复习题及参考答案

青岛农业大学成人教育《生物制药》期末考试复习题及参考答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1.利用DNA重组技术生产的蛋白质药物属于（）。A.天然生化药物B.基因工程药物C.化学合成药物D.抗生素答案：B解析：DNA重组技术生产的药物属于基因工程药物，如重组人胰岛素、重组干扰素等。2.制备单克隆抗体时，与骨髓瘤细胞融合的是（）。A.B淋巴细胞B.红细胞C.巨噬细胞D.成纤维细胞答案：A解析：B淋巴细胞能产生抗体，与骨髓瘤细胞融合后形成既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。3.限制性核酸内切酶的主要作用是（）。A.识别DNA特定核苷酸序列并切割磷酸二酯键B.在DNA任意位置切割C.仅切割单链DNAD.连接DNA片段答案：A解析：限制酶具有严格识别序列和切割位点特异性，用于基因工程中定向切割DNA。4.凝胶过滤层析分离蛋白质时，最先被洗脱下来的是（）。A.分子量最小的物质B.分子量最大的物质C.带正电荷最多的物质D.与凝胶吸附最强的物质答案：B解析：大分子无法进入凝胶颗粒内部孔径，路径短，先流出；小分子进入孔径，路径长，后流出。5.利用蛋白质在等电点时溶解度最低的性质进行分离的方法是（）。A.凝胶过滤B.离子交换层析C.等电点沉淀法D.亲和层析答案：C解析：蛋白质在等电点时净电荷为零，分子间排斥减弱，溶解度最低，可借此沉淀分离。6.制备灭活疫苗时常用的灭活剂是（）。A.紫外线B.甲醛C.高温100℃持续加热D.反复冻融答案：B解析：甲醛能使病毒蛋白质变性而失去感染性，同时保持抗原性，是传统灭活疫苗的常用灭活剂。7.下列不属于生物药物特点的是（）。A.分子量大，结构复杂B.免疫原性低C.稳定性差D.作用特异性强答案：B解析：多数生物药物对机体具有不同程度的免疫原性，甚至可能引起过敏反应，因此免疫原性低不是其特点。8.将目的基因导入微生物细胞最常用的方法是（）。A.显微注射法B.氯化钙转化法C.农杆菌转化法D.花粉管通道法答案：B解析：氯化钙处理大肠杆菌可增加细胞膜通透性，制成感受态细胞后易于摄取外源DNA，是导入微生物细胞最常用的方法。9.下列选项中，属于生物药物质量控制检测项目的是（）。A.有效成分含量B.微生物限度C.致热原D.以上都是答案：D解析：生物药物的质量控制涵盖含量、纯度、活性、杂质、安全性等综合指标，以上三项均包含在内。10.抗体药物偶联物（ADC）的组成不包括（）。A.单克隆抗体B.细胞毒性药物C.偶联连接子D.免疫佐剂答案：D解析：ADC由抗体、细胞毒性药物和连接子三部分组成，免疫佐剂不属于其核心组成。二、判断题（每题1分，共10分）1.生物药物来源于生物体，因此对人体不存在免疫原性。答案：错误解析：生物药物多为蛋白质、多糖等大分子，具有潜在的免疫原性，可能诱导机体产生免疫反应。2.基因工程药物生产过程中，宿主细胞的选择不需要考虑表达产物的翻译后修饰。答案：错误解析：许多生物药物需要正确的糖基化、折叠等翻译后修饰，宿主细胞的选择直接影响产物活性与质量。3.离子交换层析是根据不同蛋白质所带电荷多少和电性差异进行分离的方法。答案：正确4.冷冻干燥技术不适用于生物药物的干燥。答案：错误解析：冷冻干燥可在低温低压下去除水分，能保持生物药物活性，是生物药物制剂制备的常用技术。5.疫苗是一种抗原，接种后能使机体产生特异性免疫应答。答案：正确6.单克隆抗体可由杂交瘤细胞培养上清中分离获得。答案：正确7.生物药物可以完全替代化学合成药物。答案：错误解析：生物药物与化学合成药物各有适应症和优势，二者互补，不能完全替代。8.所有生物药物均为蛋白质。答案：错误解析：生物药物还包括核酸药物、多糖类药物、脂类及复合物等，并非全部为蛋白质。9.生物药物的生物活性测定是质量控制中特有的项目。答案：正确10.细胞培养中支原体污染可通过肉眼直接观察到培养基浑浊来快速判断。答案：错误解析：支原体污染后培养基通常无明显浑浊，需借助PCR、荧光染色等方法检测。三、名词解释（每题4分，共20分）1.生物制药答案：生物制药是以生物体、生物组织或细胞及其代谢产物为原料，综合运用生物化学、微生物学、基因工程、细胞工程和发酵工程等技术原理，制造用于预防、诊断和治疗疾病的生物制品的过程。2.基因工程药物答案：基因工程药物是指利用DNA重组技术，将目的基因导入宿主细胞并高效表达，经分离纯化获得的一类具有生物学活性的重组蛋白、多肽或其他生物活性物质。3.单克隆抗体答案：单克隆抗体是由单一B淋巴细胞克隆产生的只识别某一特定抗原表位的同源抗体，具有高度均一性和特异性。4.重组疫苗答案：重组疫苗是利用基因工程技术，将病原体保护性抗原基因克隆至表达载体中，在宿主细胞中高效表达抗原蛋白，经纯化后制成的疫苗。5.亲和层析答案：亲和层析是利用生物分子与其配体之间高度特异性的亲和力（如抗原-抗体、酶-底物）进行分离纯化的层析技术。四、简答题（每题10分，共30分）1.简述生物药物与传统化学药物相比的主要特点。答案：（1）原材料来源于生物体或生物产物；（2）分子量大，化学结构复杂，且具有特定空间构象；（3）生物活性依赖于空间结构，对环境因素（温度、pH、酶）敏感，稳定性差；（4）存在种属特异性和免疫原性，可能引起过敏反应；（5）作用特异性强，靶向性好；（6）生产过程和产品质量控制复杂，需全面控制各种生物杂质和潜在风险。2.简述基因工程药物生产的基本流程。答案：（1）目的基因的获取，通过PCR扩增、cDNA文库筛选或人工合成获得；（2）构建重组表达载体，包含启动子、目的基因、选择标记等元件；（3）将重组载体导入宿主细胞，如大肠杆菌、酵母或CHO细胞；（4）筛选阳性克隆并进行目的基因表达鉴定；（5）大规模发酵或细胞培养，获得含目标产物的培养液；（6）分离纯化，包括细胞破碎、粗提及精细层析等步骤；（7）质量检验，包括纯度、活性、安全性等检测；（8）制剂制备与分装。3.简述蛋白质分离纯化中常用的层析方法及其原理。答案：（1）凝胶过滤层析（分子筛层析）：利用凝胶颗粒的分子筛作用，按分子量大小分离，大分子先流出，小分子后流出；（2）离子交换层析：利用蛋白质所带电荷与离子交换剂之间的静电作用，不同蛋白质因电荷差异而分离；（3）亲和层析：利用生物分子与配体间的特异性亲和力，使目标蛋白特异性结合，其他杂蛋白流穿，再洗脱获得目标蛋白；（4）疏水层析：利用蛋白质表面疏水基团与疏水配基间的疏水相互作用，按疏水性强弱分离。五、论述题（每题20分，共20分）1.试述生物药物质量控制的特殊性及其常规检测项目。答案：生物药物质量控制的特殊性主要体现在以下几方面：（1）结构和活性复杂。生物药物多为大分子蛋白质、核酸或多糖，其生物活性依赖于完整的初级结构和高级空间构象，理化分析方法难以全面表征；（2）对生产过程高度敏感。原辅料、细胞种子、培养条件、纯化工艺等都可能导致产品质量改变，批间一致性较化学药物更难保证；（3）杂质种类复杂。除化学杂质外，还常含有宿主细胞蛋白、宿主DNA、内毒素、致热原、病毒及异常蛋白等生物杂质，需专门检测；（4）免疫原性问题突出。生物药物本身可能诱导机体产生抗体，需关注免疫原性相关风险；（5）质量控制需全过程管理。从原料、中间品到成品均需动态监测和严格控制。常规检测项目包括：（1）含量与纯度测定：如Lowry法、Bradford法、SDS、高效液相色谱法等；（2）生物学活性或效价测定：通过细胞培养法、动物实验或酶学反应等测定生物学效应；（3）分子量及结构鉴定：采用质谱、圆二色谱、核磁共振等方法确认分子量、氨基酸序列和空间构象；（4）蛋白质修饰与杂质分析：检测糖基化、氧化、脱酰胺等