常见标本的采集与存放

常见标本的采集与存放标本采集与存放是检验检测、科学研究、教学实训领域结果可靠性的核心基础环节，操作不规范导致的标本质量问题，会造成后续检测、鉴定结果偏差，甚至完全错误。不同类型标本的采集流程、保存条件、有效期存在明确的量化标准，需严格遵循对应操作规范，同时需满足所有标本通用的管理要求。一、通用操作与管理规范（一）采集通用原则1.代表性原则标本需能够反映被采集对象的真实状态，避免因采样偏差导致结果失真。临床标本需根据检测目的选择合适的采样时机、采样部位，如细菌培养需在抗菌药物使用前采集；环境标本需按规范布点，覆盖目标区域的不同位置、不同深度；生物标本需选择形态典型、无损伤的个体，包含分类学鉴定所需的全部结构。2.唯一性标识原则每一份标本需配备唯一识别标识，标识信息需完整且不易磨损。临床标本标识需包含患者唯一标识（住院号/门诊号）、姓名、标本类型、采集时间、采集者、检测项目；环境标本标识需包含采样点编号、采样时间、采样参数（深度/高度/流量）、采集人、检测项目；生物标本标识需包含采集号、物种名（初步鉴定）、采集地、采集时间、采集人。标识需贴在容器侧壁，避免贴在盖子上，防止盖子脱落导致标本混淆。3.生物安全与防污染原则采集过程需严格遵守生物安全规定，避免标本污染环境、造成职业暴露。采集人员需根据标本生物安全等级佩戴相应防护装备（手套、口罩、护目镜、防护服等），使用无菌/无污染源的采样容器，避免交叉污染。临床标本按感染性废物管理，采集后密封存放，避免渗漏；高致病性微生物标本需采用三层包装，由专人运输。4.时效性原则标本采集后需尽快送检或处理，避免标本中目标成分降解、细胞溶解、微生物增殖等变化。不同标本的送检时限有明确要求，需严格执行，无法及时送检的需按对应条件暂存。（二）存放通用要求1.环境条件分类根据标本类型选择合适的存放温度：常温存放适用于稳定性好的标本，环境温度控制在10~30℃；冷藏存放适用于短期保存、易降解的标本，温度控制在2~8℃；冷冻存放适用于中长期保存的标本，普通冷冻为-15~-25℃，超低温冷冻为-70~-86℃，液氮保存为-196℃，适用于长期保存活性标本。存放环境的相对湿度需根据标本类型控制，干燥类标本（腊叶标本、风干土壤、种子）湿度控制在40%~60%，浸制类标本湿度控制在50%~70%。2.容器要求存放容器需与标本类型匹配，避免容器与标本发生反应或污染标本。核酸标本需使用无核酸酶的离心管；微生物标本需使用无菌容器；重金属检测标本需使用聚乙烯容器，避免玻璃容器中的金属离子溶出；腐蚀性标本需使用耐酸碱的玻璃或塑料容器。所有容器需密封良好，防止标本渗漏、挥发、被污染。3.台账与追溯管理标本存放需建立完整的台账，记录标本编号、入库时间、存放位置、数量、基本信息、出库时间、领用人、用途等。存放位置需分区明确，不同类型、不同项目的标本分开存放，避免混淆。需建立全流程追溯体系，覆盖采集、运输、入库、保存、使用、销毁全环节，出现质量问题时可快速定位原因。4.定期巡检存放环境的温湿度需定期监控，人工记录的冷藏/冷冻设备每天至少记录2次（上、下午各1次），自动监控系统每10~30分钟记录1次，设置温度报警阈值（偏差超过±2℃触发报警）。需定期抽检标本状态，检查是否有渗漏、污染、变质、标识脱落等情况，发现问题及时处理。二、临床检验常见标本的采集与存放（一）血液标本血液标本是临床检验中应用最广泛的标本类型，分为全血、血浆、血清三类，根据检测项目选择对应采血管。1.采集方法（1）静脉血采集：成人首选肘正中静脉，婴幼儿可选颈外静脉或股静脉。采血前患者需空腹8~12h，避免剧烈运动、饮酒、高脂饮食，止血带绑扎时间不超过1min，避免在输液同侧肢体采血。采血量根据检测项目确定：血常规检测2mL，生化/免疫检测3~5mL，凝血功能检测2.7mL（对应0.3mL枸橼酸钠抗凝剂），血沉检测1.6mL（对应0.4mL枸橼酸钠抗凝剂），血培养采集8~10mL/瓶（成人）、2~5mL/瓶（儿童）。采血后立即颠倒混匀5~8次，避免剧烈震荡导致溶血。（2）毛细血管血采集：适用于婴幼儿、大面积烧伤、极度肥胖等静脉采血困难人群，采血部位为足跟（婴幼儿）或指尖（成人），采血量0.5~1mL，用于血常规、血糖、血型等快速检测。（3）动脉血采集：用于血气分析，首选桡动脉（需做Allen试验确认侧支循环良好），其次为股动脉、肱动脉，采血量1~2mL，用肝素抗凝（终浓度50~100U/mL全血），采集后立即排出针管内气泡，密封针头，避免空气接触影响结果。2.常用采血管类型及适用范围①乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝管（紫头盖）：抗凝剂浓度1.5~2.2mg/mL全血，适用于血常规、血型鉴定、流式细胞术检测，不可用于凝血功能、钙离子检测。②枸橼酸钠抗凝管（蓝头盖）：抗凝剂为3.2%枸橼酸钠，与血液比例为1:9，适用于凝血四项、血栓弹力图检测。当患者血细胞比容（HCT）＞55%或＜20%时，需调整抗凝剂量，计算公式为：抗凝剂量（mL）=0.00185×血液量（mL）×(100-HCT)，否则会导致结果偏差。③枸橼酸钠血沉管（黑头盖）：抗凝剂与血液比例为1:4，采血量需严格达到刻度线，误差不超过±5%，仅用于红细胞沉降率检测。④肝素抗凝管（绿头盖）：含肝素钠/肝素锂，适用于急诊生化、血气分析检测，肝素锂管不可用于血锂检测，肝素钠管不可用于血钠检测。⑤促凝管/分离胶促凝管（红头/黄头盖）：促凝剂为硅胶或凝血酶，分离胶可在离心后隔离血清与血细胞，适用于血清生化、免疫检测，采集后静置30min待血液凝固，以3000~4000r/min离心10~15min分离血清。3.存放要求①血常规标本：常温（18~25℃）可保存8h，2~8℃冷藏可保存24h，禁止冷冻，否则会导致红细胞破裂溶血。②凝血功能标本：常温下需在2h内分离血浆，2~8℃可保存4h，-20℃冷冻可保存2周，-80℃可保存6个月，禁止反复冻融。③血清生化/免疫标本：分离血清后常温可保存24h，2~8℃冷藏可保存7d，-20℃冷冻可保存3个月，-80℃可保存1年。④血气分析标本：采集后立即送检，常温放置不超过15min，冰浴（0~4℃）放置不超过30min，避免细胞代谢消耗氧气、产生二氧化碳导致结果偏差。⑤血培养标本：采集后立即送检，常温保存，不可冷藏或冷冻，否则会导致苛养菌死亡。（二）尿液标本尿液标本分为晨尿、随机尿、24h尿、中段尿等类型，适用于尿常规、尿沉渣、尿蛋白定量、尿培养等检测。1.采集方法①晨尿：清晨起床后第一次排尿，弃去前段尿液，留取中段尿10~20mL于清洁干燥容器中，尿液浓缩度高，适合尿常规、尿妊娠试验、尿沉渣镜检。②随机尿：随时留取的尿液，适用于门诊、急诊快速筛查，留取量10~20mL。③24h尿：用于尿蛋白、尿糖、尿电解质、尿肌酐等定量检测。采集方法为：第一天晨8时排空膀胱弃去尿液，开始留取此后24h内所有尿液，全部收集于带盖的清洁容器中，第二天晨8时排空膀胱将最后一次尿液加入容器，记录总尿量，充分混匀后取10~20mL送检。④中段尿培养：用于泌尿系感染病原学检测。女性用碘伏消毒外阴，男性消毒尿道口，无菌操作下弃去前段尿液，留取中段尿5~10mL于无菌试管中。2.存放要求①常规尿液标本：采集后2h内送检，2~8℃冷藏可保存6h，最长不超过8h，否则会出现细菌繁殖、细胞溶解、化学成分降解等变化。②尿培养标本：采集后1h内接种，2~8℃冷藏不超过12h。③24h尿标本：根据检测项目添加对应防腐剂，避免目标成分降解。甲苯（5mL/L尿液）用于尿蛋白、尿糖定量，形成液封隔绝空气；浓盐酸（10mL/L尿液）用于尿17-羟皮质类固醇、儿茶酚胺检测，保持pH＜2；冰乙酸（10mL/L尿液）用于尿醛固酮检测，保持pH＜4.5；麝香草酚（＜1g/L尿液）用于尿沉渣镜检、尿结核杆菌检测，过量会导致尿蛋白假阳性。（三）粪便标本粪便标本适用于常规检测、隐血试验、寄生虫检测、病原培养等。1.采集方法①常规标本：取新鲜粪便的异常部位（黏液、脓血、颜色异常处），量约黄豆大小（5~10g），置于清洁干燥容器中，避免混入尿液、水。②隐血标本：采集前3d禁食动物血、肝脏、含铁丰富的食物及铁剂、维生素C，避免假阳性结果，取粪便表面多处及内部标本，量约5g。③寄生虫标本：检查阿米巴滋养体的标本需保温（25~30℃），30min内送检；检查蛲虫卵需用透明胶纸在清晨排便前粘贴肛周皮肤，立即送检。④粪便培养标本：取脓血黏液部分2~3g，置于无菌容器中，立即送检。2.存放要求常规粪便标本采集后1h内送检，2~8℃冷藏不超过4h，禁止冷冻，否则会破坏细胞、寄生虫卵；阿米巴滋养体检测标本需全程保温，不可冷藏。（四）痰液标本痰液标本适用于常规检测、痰培养、脱落细胞学检测等。1.采集方法①常规痰标本：清晨空腹，用清水漱口3次，用力咳出深部第一口痰，量约5~10mL，置于清洁容器中，避免混入唾液、鼻咽分泌物。②痰培养标本：先用复方硼砂溶液漱口，再用清水漱口，无菌操作下咳出深部痰液3~5mL，置于无菌痰杯中。③痰脱落细胞标本：留取上午9~10时的深部痰液，连续留取3d，每天1份，量约5~10mL，提高检出率。2.存放要求常规痰标本采集后1~2h内送检，2~8℃冷藏不超过24h；痰培养标本采集后1h内接种，2~8℃冷藏不超过12h；痰脱落细胞标本采集后30min内用95%乙醇或10%甲醛固定，常温可长期保存。（五）体液标本包括脑脊液、胸水、腹水、心包积液、关节腔积液等，由临床医生无菌穿刺采集。1.采集方法穿刺采集后分装入3~4支无菌试管，每支2~5mL，第一管用于生化、免疫检测，第二管用于细胞学检测，第三管用于微生物培养，第四管（如有）用于常规检测。2.存放要求常规、生化标本2~8℃冷藏不超过24h；细胞学标本采集后1h内送检，或加入等量50%乙醇固定，常温可保存24h；微生物培养标本常温下1h内送检，2~8℃冷藏不超过12h；脑脊液标本需立即送检，常温放置不超过1h，禁止冷藏，避免脑膜炎奈瑟菌等苛养菌死亡、细胞溶解影响结果。（六）拭子标本包括口咽拭子、鼻咽拭子、生殖道拭子等，用于病原微生物检测。1.采集方法①口咽拭子：被采集者头后仰，张口发“啊”音，用无菌拭子擦拭双侧扁桃体、咽后壁，避免接触舌头、口腔黏膜，取出后置于含3~5mL病毒保存液的采样管中，折断拭子尾部，拧紧管盖。②鼻咽拭子：拭子沿下鼻道底部向后深入，到达鼻咽腔后壁时轻轻旋转1周，取出置于病毒保存液中。③生殖道拭子：女性用窥阴器暴露宫颈，将拭子插入宫颈口1~2cm，旋转1~2周后停留10~15s，取出置于保存液中。2.存放要求病毒类拭子标本常温（10~25℃）可保存24h，2~8℃可保存72h，-20℃可保存1个月，-80℃可长期保存，避免反复冻融；细菌类拭子标本常温下2h内送检，2~8℃冷藏不超过24h。（七）病理标本包括活检标本、手术标本、冰冻切片标本，用于病理诊断。1.采集方法①活检标本：穿刺、内镜、切除活检的小标本，采集时避免挤压、牵拉，保持组织完整性。②手术标本：手术切除的器官、组织，离体后需核对标本信息，大标本需及时切开固定（空腔脏器剪开、实质脏器每隔1~2cm切开），保证固定液充分接触组织。③冰冻切片标本：用于术中快速病理诊断，离体后无需固定，立即送检。2.存放要求活检/手术标本离体后30min内放入10%中性福尔马林固定液，固定液体积为标本体积的5~10倍（大标本为10~20倍）；小标本（＜1cm）固定时间6~12h，大标本固定时间24~48h，最长不超过72h，常温保存，禁止冷冻，避免破坏细胞形态；冰冻切片标本离体后15min内送至病理科，-20℃快速冰冻切片，剩余标本术后及时放入固定液。三、生物学教学科研常见标本的采集与存放（一）植物标本1.腊叶标本腊叶标本是植物分类学研究、教学的主要标本类型。采集时选择带根、茎、叶、花、果的完整植株（草本取整株，木本取带花、果的枝条，长度25~30cm，宽度不超过台纸尺寸），同步记录采集时间、地点、海拔、生境、植株高度、花果颜色等信息，赋予唯一采集号。采集后立即整理，将叶片、花展平，避免重叠，保证部分叶片背面朝上、花有正面和侧面视角，夹入吸水纸中用标本夹夹紧，前3天每天更换1~2次吸水纸，之后每2~3天更换1次，7~15天完全干燥（潮湿地区可用35~40℃烘箱烘干）。干燥后的标本装订在39cm×29cm的标准台纸上，贴上标签，存放于标本柜中，环境温度15~25℃，相对湿度40%~60%，放置樟脑丸（0.5~1g/m³）防虫，每年更换2次；湿度超过65%时需除湿，发霉标本用75%乙醇擦拭晾干；避免阳光直射导致褪色，每年抽检1次，发现损坏及时修复。2.液浸标本用于保存肉质花、果、地下茎等易脱水标本，或需保持原色的标本。采集时选择完整、无破损、成熟度适中的标本，大小适配标本瓶。常用保存液包括：5%~10%福尔马林液（成本低，适合普通标本，但易褪色）；FAA固定液（50%乙醇90mL+冰醋酸5mL+福尔马林5mL，固定效果好，可长期保存）。原色保存需先固定：绿色标本用醋酸铜-福尔马林液（醋酸铜加入50%醋酸至饱和为母液，1份母液加4份水，标本放入加热至80~90℃，待颜色由绿变黄再变绿后取出漂洗，放入5%福尔马林保存）；红色标本用硼酸-福尔马林液（硼酸30g+福尔马林40mL+水4000mL，固定1~3d待红色恢复后，转移至1%福尔马林+0.2%硼酸液保存）。标本瓶用石蜡或凡士林封口，阴凉避光处存放，温度10~25℃，相对湿度50%~70%，每年检查保存液量和透明度，浑浊、减少时及时更换。3.种子标本采集成熟、饱满、无病虫害的种子，清除杂质，记录采集信息。短期保存（1~2年）需将种子含水量控制在12%以内，装入牛皮纸袋或布袋，置于通风干燥处，温度15~25℃，湿度＜60%；中期保存（5~10年）需将含水量降至5%~8%，密封于铝箔袋或玻璃容器中，加硅胶干燥剂（用量为种子体积的1/3~1/2），2~8℃冷藏；长期保存（10年以上）需将含水量降至3%~7%，密封后置于-20℃冷冻，每5~10年检测一次发芽率，发芽率低于70%时繁殖更新。（二）动物标本1.剥制标本适用于鸟类、哺乳类等脊椎动物的外形保存。选择体型完整、羽毛/皮毛完好的个体，按规范安乐死后剥皮，去除肌肉、内脏、骨骼上的软组织，涂抹防腐剂（环保型配方：硼酸300g+明矾粉700g+樟脑100g，操作时戴手套、口罩），用棉花、泡沫等填充物塑型，安装义眼，整理自然形态后固定。标本存放于密闭标本柜中，温度15~25℃，相对湿度40%~60%，每季度补充樟脑等防虫剂，每年用毛刷清洁表面1次；发现虫蛀用磷化铝熏蒸（3~5g/m³，熏蒸72h，通风24h后接触），避免阳光直射导致羽毛、皮毛褪色。2.浸制标本适用于无脊椎动物、两栖爬行类幼体、胚胎、器官等标本。选择形态完整、无损伤的标本，清水洗净后用固定液固定。常用固定液包括：10%中性福尔马林液（pH7.0~7.4，适合大多数动物标本）；70%乙醇（适合小型无脊椎动物、昆虫，保存时间长，但易使标本变硬）；Bouin氏液（饱和苦味酸75mL+福尔马林25mL+冰醋酸5mL，固定效果好，固定后用70%乙醇洗脱苦味酸）。标本瓶密封后避光存放，温度10~25℃，定期检查保存液状态，浑浊、挥发时及时补充更换。3.骨骼标本选择成年、骨骼完整的个体，去除皮肤、肌肉、内脏后进行脱脂处理：用1%~2%氢氧化钠溶液浸泡，小型动物1~3d，大型动物7~15d，温度20~30℃，避免过度腐蚀骨骼，清水冲洗后用汽油或乙醚脱脂2~7d，去除骨骼内脂肪。之后用3%~10%过氧化氢溶液漂白1~7d，至骨骼洁白后冲洗晾干，按结构串制或装盒。标本存放于干燥、避光的标本柜中，温度15~25℃，湿度＜60%，避免碰撞，小型骨骼标本置于带棉垫的纸盒中，每年检查是否发黄、脱胶，及时修复。（三）微生物菌种标本1.采集与制备从临床、环境样本中分离纯化得到纯培养物，镜检确认无杂菌后制备菌悬液。2.保存方法①短期保存（1~6个月）：采用斜面培养法，细菌接种于营养琼脂斜面，真菌接种于PDA琼脂斜面，培养至对数生长期后，4℃冷藏保存，细菌可保存1~3个月，真菌可保存3~6个月，定期传代，避免菌株变异。②中期保存（1~5年）：采用甘油冷冻保存法，将菌液与80%甘油按体积比1:1混合，甘油终浓度为20%~30%，置于-20℃冷冻保存，细菌可保存1~2年，真菌可保存2~5年。③长期保存（5年以上）：采用-80℃超低温冷冻法，甘油终浓度为10%~15%，或采用液氮保存（-196℃），添加5%~10%二甲亚砜作为保护剂，可保存10年以上，菌株复苏率大于90%，禁止反复冻融。3.存放要求不同菌株分开存放，标识清晰，包含菌株编号、名称、分离来源、保存日期；存放冰箱配备温度监控系统，每天记录温度，偏差超过±2℃时排查原因；生物安全等级菌株按规定存放于对应级别的生物安全防护设施中。四、环境监测常见标本的采集与存放（一）水样包括地表水、地下水、废水、饮用水等。1.采集方法地表水用采样器在水面下0.5m处采集，远离岸边，按规范布点，常规理化指标采样量2~5L，微生物指标采样量0.5~1L（无菌瓶采集）；地下水采样前需洗井，抽出井管体积3~5倍的水后再采集；废水采样分瞬时样和混合样，混合样为24h内每隔1~2h采集1次，混匀后取定量样品。2.存放要求采样瓶提前按项目要求清洗，理化指标用玻璃或聚乙烯瓶，微生物指标用无菌玻璃瓶。采集后立即送检，无法及时送检的按要求添加保存剂：重金属检测样加浓硝酸调pH＜2（用量5mL/L），常温可保存14d；有机物检测样加硫酸调pH＜2，2~8℃冷藏可保存7d；微生物检测样2~8℃冷藏，不超过12h；溶解氧检测样现场固定（加硫