CN119492844A 基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln和PAGly的方法 （安发（福建）生物科技有限公司）

区国宝路36号(原宁德市东侨经济开基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱本发明公开了基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln和PAGly与沉淀试剂混合均匀，充分萃取后离心取上清性以及所需样品体积少、样品前处理简单等优21.基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln和PAGly的方法，S2、使用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱相A占整个流动相的10～95%;所述质谱检测采用多反应检测SRM模式，离子源为电喷雾离子源，喷雾电压为正离子S3、测得所述待测样品中PAGln和PAGly的峰面2.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中精确称取PAGln和PAGly置于容量瓶中，配制混合标准品储备溶液，3.根据权利要求2所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln和PAGly的方法，其特征在于，所述系列混合对照品溶液中PAGln浓度范围为0.01~4.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中旋1～5min充分沉淀，于4℃下13000rpm离心15min后取上清液，置于液相小瓶中即待测样5.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中6.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中37.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中8.根据权利要求1所述的基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中4杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln和PA[0002]苯乙酰谷氨酰胺(Phenylacetylglutamine,PAGln)和苯乙酰甘氨酸由肠道微生物代谢苯丙氨酸(Phenylalanine,Phe)产生的代谢物，具体来说是由苯乙酸[0004]现有技术中关于苯乙酰谷氨酰胺(PAGln)和苯乙酰甘氨酸(PAGly)这两种代谢物理和储存期间可能会降解或转化进而导致数据不准确；其次对于现有部分分析方法而言，[0005]液相色谱三重四级杆串联质谱仪(LC_MS/MSwithtriplequadrupolemass[0006]当前已有利用液质联用方法测定血浆中PAGln的技术方案，例如公开号为CN112834656A，申请日为2021年1月27日的中国专利公开了一种基于UPLC_MS/MS的血浆心5[0007]公开号为JP4555779B2，申请日为2004年12月24日的日本专利提供了血脂异常的酸或苯乙酰谷氨酰胺的代谢途径中任选选择的代谢中间体，和(b)从马尿酸或苯丙氨酸通然可以实现苯乙酰甘氨酸和/或苯乙酰谷氨酰胺的同时检测，但是在进行测定时还需要额测样品与同位素内标混合。由于不同的内标物质与预处理方法，利用液质联用技术检测[0011]本发明的目的在于提供基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血6[0020]进一步地，所述系列混合对照品工作液中PAGln浓度范围为0.01～1000ng/mL，0.010.10.510.010.115温为40℃。ESSRMms2265.12884.112_84.114,91.053_91.055129.969[0032]PAGly:m/z＝73.55_74.55F:_CESSRMms2191.93074.053_74.055.90.969_7[0040]1、本发明首次提出利用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中境样品和食品样品等，能够在多种应用场景中检测PAGln和PAGly的含量。本发明方法下[0045]图3为本发明所述测定方法中PAGln和PAGly在大鼠血浆中线性方程的标准曲线8[0051]所用分析设备为ThermoscientificTSQQuantis液质联用仪，相同的LC/MS/MS[0053]本实施例提供基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln[0057](4)使用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪对所述待测样品进行检测，检测[0062](5)测得所述待测样品中PAGln和PAGly的峰面积，将其分别带入线性方程中进行[0064]本实施例提供基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln9[0068](4)使用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪对所述待测样品进行检测，检测[0073](5)测得所述待测样品中PAGln和PAGly的峰面积，将其分别带入线性方程中进行[0075]本实施例提供基于超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪同时测定血浆中PAGln[0079](4)使用超高效液相色谱三重四级杆串联质谱仪对所述待测样品进行检测，检测[0084](5)测得所述待测样品中PAGln和PAGly的峰面积，将其分别带入线性方程中进行分析物线性方程相关系数线性范围(ng/mL)LOD(ng/mL)LOQ(ng/mL)PAGlny＝2273.7x+32280.99990.01～10000.00020.0007PAGlyy＝376.49x+305890.99710.03720.1118[0089]结果表明检测PAGln和PAGl