乳腺癌研究第一株 MCF-7雌激素受体阳性、贴壁慢_第1页
乳腺癌研究第一株 MCF-7雌激素受体阳性、贴壁慢_第2页
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文档简介

做乳腺癌、雌激素受体或者内分泌治疗方向的同学,MCF-7几乎是入门必用的一株。它是雌激素受体(ER)阳性的经典乳腺癌细胞,激素依赖型乳腺癌研究的标准模型。MCF-7是人乳腺癌细胞,从一名69岁白人女性转移性腺癌患者的乳腺组织中分离。它表达雌激素受体(ER),表达IGFBP-2/4/5等基因,可用于3D培养、免疫肿瘤学和乳腺癌研究,也是合适的转染宿主。细胞背景与来源来源:人,转移性乳腺癌(69岁白人女性)。贴壁生长,可能形成松散细胞簇,逐渐铺成单层;密度大时会堆叠起来,属正常。应用场景与研究价值乳腺癌研究:激素依赖型乳腺癌、雌激素受体信号与内分泌治疗机制。耐药研究:他莫昔芬等内分泌治疗耐药模型。3D培养与转染宿主。培养特性与注意事项培养基:EMEM(MEM+NEAA)+10%FBS+10μg/mL胰岛素+1%双抗。环境37℃、5%CO2、饱和湿度。生长较慢,1:2传代约4-5天到80%融合,接种别太稀。传代:PBS润洗后胰酶37℃消化,回缩、间隙变大但未脱落时加完全培养基终止,别强行吹下;1000rpm离心3min;推荐1:2,接种后镜下确认分散成单颗。换液2天一次。冻存:92%FBS+8%DMSO(或92%完全培养基+8%DMSO),程序降温盒-80℃过夜转液氮。复苏:37℃水浴2min内,150g离心2min。生物安全:BSL-1,人源细胞建议按BSL-2防护操作。注意:贴壁较慢,复苏/传代后要48-72h才完全贴壁,至少48h再换液;堆叠聚集是正常现象,传代时消化别太短、尽量分散成单颗;漂浮的活细胞可离心回收接回原瓶,贴壁多时可舍弃;黑点多用预热PBS轻润洗。相关产品MCF-7培养基里要加胰岛素、又贴壁慢,体系用对很关键。尚恩生物(SUNNCELL)有MCF-7现货(货号SNL-060),配

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