微生物标本采集转运专家共识（2026版）

微生物标本采集转运专家共识（2026版）1.前言与总则微生物学检验是感染性疾病诊断的“金标准”，也是临床合理使用抗菌药物的基础。随着分子生物学技术、质谱技术以及宏基因组测序（mNGS）等新技术的广泛应用，临床对标本质量的要求日益提高。然而，在当前的医疗实践中，标本采集和转运环节仍是导致实验室前误差的主要来源，直接影响检验结果的准确性和临床诊疗的有效性。为了进一步规范我国各级医疗机构微生物标本的采集与转运工作，提高病原学检出率，遏制细菌耐药性，本共识在既往版本的基础上，结合国内外最新指南循证医学证据及我国临床实际，制定了详细的操作规范。本共识适用于所有涉及微生物检验的临床科室、护理部、检验科及后勤转运部门。其核心目标在于通过标准化操作，确保从标本采集到抵达实验室期间的标本完整性，最大限度减少常驻菌群污染，并保持病原微生物的活性，从而为临床提供真实、可靠的诊断依据。2.标本采集的基本原则与通用要求2.1无菌操作与生物安全无论何种类型的标本，无菌操作是第一要素。采集过程必须严格遵守无菌技术规程，防止外源性环境污染及医源性交叉感染。对于开放性伤口、分泌物等易受皮肤常驻菌群污染的标本，应严格执行消毒流程。同时，采集人员需根据标本类型采取相应的个人防护措施（PPE），遵守生物安全管理规定，防止病原微生物传播给医护人员或周围环境。2.2时机选择微生物标本的采集应在抗菌药物使用前进行，这是提高检出率的关键。对于已经使用抗菌药物的患者，在条件允许的情况下，应根据药物代谢动力学特点，选择在下一次给药前采集血培养或其他体液标本。对于发热患者，寒战或体温高峰来临前通常是采集血培养的最佳时机。2.3标本标识与信息完整性所有标本容器必须具有唯一性标识（如条形码），标签应清晰、防水，并至少包含患者姓名、住院号/门诊号、标本类型、采集日期及时间、采集科室及采集者信息。申请单需提供详细的临床资料，包括患者主要症状、感染疑似部位、抗菌药物使用史、免疫状态及旅行史等，这些信息对于实验室选择合适的培养体系、解释检验结果至关重要。2.4拒收标准与预处理建立明确的标本拒收制度是质量控制的重要环节。以下情况应考虑拒收：标签错误或缺失、容器破损、标本量不足、保存不当（如需厌氧培养的标本暴露于空气中）、运送时间严重超时、采集部位错误等。对于被拒收的标本，检验科应及时通知临床重新采集，并记录原因。3.血液培养标本的采集与转运血流感染是导致危重症患者死亡的主要原因之一，血培养标本的质量直接关系到患者的生命安全。3.1采集指征当患者出现发热（体温＞38℃）或低温（体温＜36℃）、寒战、白细胞计数升高或降低、血小板减少、皮肤黏膜出血、昏迷、多器官功能衰竭等全身性感染体征时，应考虑采集血培养。对于导管相关的血流感染，需同时采集外周静脉血和导管尖端或导管内静脉血进行对比培养。3.2皮肤消毒与接种技术皮肤消毒是减少血培养污染的核心步骤。推荐使用葡萄糖酸氯己定乙醇溶液（年龄＞2个月）作为首选消毒剂，消毒范围直径应大于5cm，待干至少30秒，并严格禁止触摸穿刺点。采血部位首选肘静脉，尽量避免在静脉留置针处采血，除非为了诊断导管相关感染。严格执行“三步法”或“两步法”消毒，确保消毒效果。3.3采血量与套数采血量是血培养检出率最重要的变量。成人每瓶推荐的采血量为8-10ml，每套（需氧瓶+厌氧瓶）采血量应为16-20ml。研究表明，血液中细菌浓度越低，所需采血量越大。对于婴幼儿和儿童，由于血液中细菌浓度通常较高，采血量可相应减少（通常为总血量的1%-4%），但不应低于1ml。推荐在短时间内（通常不超过2小时）从不同部位采集2-3套血培养，以便区分污染与真实菌血症，并提高检出率。3.4运输与孵育血培养瓶采集后应立即送检，切勿冷藏。实验室收到标本后应立即放入全自动血培养仪中进行孵育。若因故无法及时送检，血培养瓶应在室温下暂存，严禁放入冰箱或温箱，以免导致病原体死亡或快速繁殖过度消耗营养。4.呼吸道标本的采集与转运呼吸道感染种类繁多，包括上呼吸道和下呼吸道感染，不同部位标本的采集方法差异巨大。4.1痰液标本痰液是诊断下呼吸道感染最常用的标本，但也是最容易受到口咽部菌群污染的标本。应指导患者留取合格的深部痰液，而非唾液或鼻咽分泌物。自然咳痰法要求患者在晨起后，用清水漱口3次（去除口腔菌群），用力咳出深部痰液，并立即送检。对于无法自主咳痰的患者，可采用吸痰管经鼻腔或口腔深入气管吸痰。4.2支气管镜标本包括支气管肺泡灌洗液（BALF）、防污染毛刷（PSB）和保护性标本刷（PBAL）。BALF常用于肺部感染尤其是免疫缺陷患者的病原学诊断，采集过程中需严格遵守无菌操作，灌洗量通常为60-120ml，回收率应达到10%以上。PSB标本对于定量培养诊断特异性较高。4.3咽拭子与鼻咽拭子咽拭子主要用于诊断化脓性链球菌咽炎、白喉等，不适用于普通上呼吸道病毒感染的常规筛查（除非有特定抗原或核酸检查需求）。采集时应避免接触舌、颊黏膜等部位。鼻咽拭子常用于百日咳、脑膜炎奈瑟菌携带者的筛查，应深入鼻咽部旋转擦拭。4.4质量控制与转运实验室必须对痰液标本进行显微镜下细胞学筛选（涂片革兰染色），以判断标本是否合格。通常标准是：鳞状上皮细胞＜10个/低倍视野，白细胞＞25个/低倍视野。不合格标本应要求重新留取。呼吸道标本应在采集后2小时内送检，若延迟送检，需4℃保存（结核分枝杆菌除外），但保存时间不应超过24小时。5.尿液标本的采集与转运尿路感染是临床常见的感染类型，准确的尿液采集对诊断至关重要。5.1采集方法应根据患者情况选择适当的采集方法：清洁中段尿：首选方法。女性需分开大阴唇，男性翻开包皮，用肥皂水或碘伏清洗尿道口及其周围，排出前段尿液后，留取中段尿液于无菌容器中。导尿管尿液：不推荐常规采集，仅适用于无法自主排尿或需精确监测尿量的患者。采集时应消毒导尿管采集端口，而非从集尿袋中留取，因为集尿袋中的尿液细菌已过度繁殖。耻骨上膀胱穿刺：是评估尿路感染的金标准，适用于无条件留取中段尿的患者、儿童或结果极度重要且需排除污染的场合。5.2留取容器与防腐剂必须使用无菌、密闭、有螺旋盖的一次性容器。若无法在30分钟内送检，尿液应冷藏保存，但冷藏不应超过24小时，因为这可能抑制某些病原体（如淋病奈瑟菌）的生长。对于需进行化学分析或结核杆菌检查的尿液，可添加硼酸等防腐剂，但需注意防腐剂可能对某些病原体有抑制作用，需遵照实验室要求。6.无菌体液标本的采集与转运无菌体液包括脑脊液（CSF）、胸水、腹水、心包液、关节液、滑膜液等。这类标本的检出通常意味着严重的感染，必须高度重视。6.1脑脊液怀疑脑膜炎时，应立即采集脑脊液。通常采集3管，每管2-3ml。第一管：用于化学或免疫学检查（如蛋白、糖）。第二管：用于微生物学检查（需氧培养、厌氧培养、墨汁染色等）。第三管：用于细胞计数及分类。严禁将脑脊液放入冰箱冷藏，因为脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌等苛养菌极易在低温下死亡。若不能立即接种，应置于35℃-37℃温箱或室温下保存。6.2胸水、腹水及其他无菌体液为提高检出率，建议尽量采集大量体液（建议＞10ml，甚至更多）。对于腹膜炎患者，可通过腹腔穿刺留取腹水。注入血培养瓶中可以提高培养阳性率，尤其对于接种量较少的情况。采集后应立即送检，若不能及时送检，应室温保存，不加防腐剂。7.粪便标本的采集与转运7.1采集时机与容器应在发病早期、使用抗菌药物之前采集。应使用清洁、干燥、无菌且密封性良好的容器，最好带有无菌棉拭子或运送培养基。对于沙门菌、志贺菌等肠道致病菌的筛查，需采集含有脓血、黏液的部分。7.2特殊病原体考虑艰难梭菌：仅需少量粪便即可，且应避免混入尿液或消毒剂，因其毒素在室温下不稳定，检测宜快。霍乱弧菌：需置于碱性蛋白胨水保存培养基中。寄生虫：需根据寄生虫生活史选择不同的采集时间（如阿米巴滋养体需立即保温送检）。7.3转运要求粪便标本通常含有大量杂菌，应尽快送检。常规细菌培养可使用运送培养基（如Cary-Blair运送培养基）在室温下运送，切勿冷冻，冷冻会杀灭大多数致病菌。8.伤口与软组织感染标本的采集与转运8.1采集类型伤口标本应区分开放性伤口和闭合性脓肿。对于开放性伤口，应先清创去除表面分泌物，采集基底部或边缘的组织或渗出液，严禁采集表面干痂或腐烂组织。对于闭合性脓肿，应穿刺抽取脓液，若脓液过少，可用无菌生理盐水冲洗后再抽取冲洗液。8.2组织标本与活检组织活检是诊断骨关节感染、深部软组织感染的最佳标本。手术过程中获取的组织块应放入无菌容器中，切勿用固定液（如福尔马林）处理，固定液会杀死细菌，导致培养阴性。若需送病理，应分装两份。8.3厌氧菌培养考虑深部组织、咬伤感染、压疮、腹壁伤口等极易合并厌氧菌感染。采集时应避免接触空气，尽量使用注射器抽取后排尽空气，立即注入厌氧转运系统或厌氧血培养瓶。9.微生物标本转运的标准化管理9.1转运容器与包装所有标本必须按照UN3373生物安全标准进行三层包装。第一层为盛放标本的主容器（防漏）；第二层为防漏的辅助包装容器，并填充足够的吸附材料；第三层为坚固的外包装。破损的容器严禁运送。9.2转运时限与温度控制转运时限是保证标本质量的关键参数。实验室应制定不同标本的转运时限标准。标本类型建议转运时限温度要求特殊说明血培养瓶立即（≤2h）室温（15-25℃）严禁冷藏或冷冻脑脊液立即（≤15min）室温或35-37℃苛养菌易低温死亡痰液（合格）≤2h室温若延迟，4℃保存≤24h（TB除外）尿液≤1h室温若延迟，4℃保存≤24h厌氧培养标本≤30min室温需专用厌氧转运系统生殖道拭子≤1h室温保持湿润粪便≤2h室温需置于运送培养基中组织/活检≤1h室温或4℃保持湿润，勿干燥9.3转运人员与交接转运人员应接受专门的生物安全培训，了解标本泄漏、溢出时的应急处理措施。运输过程中应避免剧烈震荡，防止标本容器破裂。临床科室与检验科之间应建立严格的交接制度，核对标本信息、数量及质量，双方签字确认，确保标本可追溯。对于不合格标本，检验科有权拒收，并填写《标本拒收登记表》，及时反馈给临床科室整改。10.特殊病原体及分子诊断标本的采集要求10.1分子生物学诊断（PCR/mNGS）随着分子诊断技术的发展，标本采集的质量直接影响核酸提取的效率。抗凝剂选择：进行PCR检测的血液标本通常使用EDTA抗凝管，不可使用肝素，因为肝素是Taq酶的强抑制剂。防污染：mNGS检测对环境污染极度敏感，采集过程需严格无菌，容器需无核酸酶。脑脊液、BALF等标本采集后应尽量避免与空气长时间接触，防止环境背景微生物DNA干扰结果判读。保存温度：大部分用于核酸检测的标本在-20℃或-80℃下保存效果更佳，短时间转运可置于冰袋上，但需防止冻结（特别是对某些脆弱病原体）。10.2真菌培养对于侵袭性真菌感染，除常规培养外，血清学检测（如G试验、GM试验）需使用无菌、无热源、无内毒素的试管采集血标本。对于隐球菌脑膜炎，脑脊液离心取沉淀物进行墨汁染色效果最佳。10.3结核分枝杆菌结核分枝杆菌培养所需标本通常量要大，且需连续采集多次（如留取24小时痰液）。专用容器需密闭，防止气溶胶传播。标本酸碱处理是实验室环节，但临床采集时应确保无混入漱口水等。11.质量监测与持续改进医疗机构应建立微生物标本前处理质量监测体系。检验科应定期统计和分析标本的阳性率、污染率、拒收率等指标，并向临床发布质量报告。护理部和感控科应定期对标本采集人员进行培训和考核，将标本采集合格率纳入科室质量控制考核指标。污染率是衡量标本采集质量的核心指标。通常认为血培养污染率应控制在3%以下。若某科室或某时间段污染率显著升高，需