CN119497609A 降低脂肪酶活性的方法 （瑞泽恩制药公司）

2024.12.26PCT/US2023/0665002023.05.02WO2023/215750EN2023.11.09本发明提供了包含与人白细胞介素_4受体了抗IL_4Rα抗体之外，所述制剂还可以含有一和表面活性剂，所述表面活性剂包含聚山梨醇所述方法可以包含使药物物质在酸性条件下经物制剂在脂肪酶存在的情况下不具有明显的亚和其它物理应力之后表现出相当大程度的抗体2使包含所关注蛋白质和脂肪酶的样品经受阴离子交换色谱法，(c)使包含所关注蛋白质和脂肪酶的样品经受应力条件，以形成具有灭活的脂肪酶的4.根据权利要求2或3所述的方法，其中所述调配步骤包括向所述样品中添加脂肪酸6.根据权利要求5所述的方法，其中所述聚山梨醇酯80中油酸酯的浓度为至少98％或7.根据权利要求2至6中任一项所述的方法，其中所述应力条件包括搅拌应力和/或热9.根据权利要求7所述的方法，其中所述搅拌应力包括10.根据权利要求7所述的方法，其中所述热应力包括将所述样品储存在约3320.根据权利要求16至19中任一项所述的方法，其中上通过使包含所关注蛋白质和脂肪酶的样品经受阴离子交换(AEX)色谱法来降低组合物22.根据权利要求21所述的方法，其进一步包括23.根据权利要求16至22中任一项所述的方法，其进一步包括添加泊洛沙姆188或25.根据权利要求23或24所述的方法，其中所述泊洛沙姆188的浓度为0.005％至5％、26.根据权利要求23或24所述的方法，其中所述PEG3350的浓度为0.005％至5％、429.根据权利要求1或16至28中任一项所述的方5[0002]本申请以引用方式并入于2022年5月2日提交的临时专利申请第US63/337,532脂肪酶活性和/或降低的游离脂肪酸颗粒形成的药[0007]聚山梨醇酯的酶水解已经被认为是生物治疗制剂中聚山梨醇酯降解的主要途解和/或降低的脂肪酸颗粒形成的经调配的药物物质和/或药物6泊洛沙姆(poloxamer)188或PEG3350调配，以产生与未用泊洛沙姆188或PEG3350调配的样或降低酯酶或脂肪酶活性，这可能引起酯酶或脂肪酶和/或药物蛋白质的高分子量(high可以包括(a)使包含所关注蛋白质和酯酶或脂肪酶的样品经受应力条件，以形成具有灭活7[0020]本公开提供了用于产生具有降低的酯酶或脂肪酶活性的药物组合物的额外的方的洗脱液中汇集的所述抗体在约3至约4的pH下经受病毒灭活，然后将所述pH调整至约5至(c)的洗脱液中汇集的所述抗体以流穿模式经受疏水相互作用色谱法；(e)使骤(a)的洗脱液中汇集的所述抗体在约3至约4的pH下经受病毒灭活，并且然后将所述pH调使从步骤(c)的流穿级分中汇集的所述抗体经受病毒截留过滤；(e)使来自步骤(d)的包含[0025]一方面，所述方法进一步包括使在AEX色谱法之后形成的样品经受热应力或搅拌8[0033]图2A示出了根据一个方面的如通过膜显微镜检查测量的包含SR_PS80的mAb1制剂[0034]图2B示出了根据一个方面的如通过膜显微镜检查测量的包含HP_PS20的mAb1制剂[0035]图2C示出了根据一个方面的如通过MFI测量的包含SR_PS80的mAb1制剂中颗粒的[0036]图2D示出了根据一个方面的如通过MFI测量的包含HP_PS20的mAb1制剂中颗粒的[0037]图3A示出了根据一个方面的如通过CAD_UHPLC测量的包含SR_PS80的mAb1制剂中[0038]图3B示出了根据一个方面的如通过CAD_UHPLC测量的包含HP_PS20的mAb1制剂中[0039]图4示出了根据一个方面的mAb1制剂中颗粒的形成与聚山梨醇酯的回收率之间的[0040]图5示出了根据一个方面的mAb5制剂中颗粒的形成与聚山梨醇酯回收率之间的相[0041]图6A示出了根据一个方面的如通过膜显微镜检查测量的包含SR_PS80并经受HIC[0042]图6B示出了根据一个方面的如通过膜显微镜检查测量的包含HP_PS20并经受HIC9[0043]图6C示出了根据一个方面的如通过MFI测量的包含SR_PS80并经受HIC纯化的mAb1[0044]图6D示出了根据一个方面的如通过MFI测量的包含HP_PS20并经受HIC纯化的mAb1[0045]图7A示出了根据一个方面的如通过CAD_UHPLC测量的包含SR_PS80并经受HIC纯化[0046]图7B示出了根据一个方面的如通过CAD_UHPLC测量的包含HP_PS20并经受HIC纯化[0047]图8示出了根据一个方面的磷脂酶活性(以百万分之份数计)与聚山梨醇酯20的降[0048]图9示出了根据一个方面的针对AEX风险因素和反应的多变量研究生成的模型的[0051]图12示出了根据一个方面的在不同浓度和温育时间下来自mAb5制剂的聚山梨醇[0052]图13示出了根据一个方面的描绘了mAb5、mAb6和mAb7的表面疏水性的同源性建[0053]图14示出了根据一个方面，在包含各种类型的聚山梨醇酯80的蛋白质药物产品[0054]图15示出了根据一个方面，在包含各种类型的聚山梨醇酯80的蛋白质药物产品[0056]图17示出了根据一个方面的包含各种类型的聚山梨醇酯80的蛋白质药物产品中[0059]图19示出了根据一个方面的包含PS20、PS80或泊洛沙姆188(P188)的mAb5制剂在[0060]图20示出了根据一个方面在含有脂肪酶和PEG3350或泊洛沙姆188(浓度为[0061]图21A示出了PEG3350浓度对150mg/mL抗IL_4R抗体制剂在室温下在30至120分钟[0062]图21B示出了泊洛沙姆188浓度对150mg/mL抗IL_4R抗体制剂在室温下在30至120分钟的时段内载搅拌应力下的稳定性(以通过SE_UPLC测量的HMW物质的百分比表示)的影[0063]图22示出了聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、PEG3350和泊洛沙姆188(在不同浓度下)对150mg/mL抗IL_4R抗体的制剂在至多56天的时间内针对热应力(45℃)的稳定性(以通过SE_UPLC测量的HMW物质的百分比表[0065]聚山梨醇酯20(PS20)和聚山梨醇酯80(PS80)是生物制药蛋白质制剂中最常用的用于改善蛋白质稳定性并保护蛋白质产品免于聚集和变性的非离子型表面活性剂(Martos链酯化POE脱水山梨醇/异山梨醇物种的形成(Kishore等人2011a；Larson等人；Kishore等降低了PS浓度，而且积累的FFA的低溶解度McShan等人《PDA制药科学与技术杂志(PDAJPharmSciTechnol.)》70(4):332_3458℃)下储存数月或数年之后。定磷脂酶B样2(PLBL2)在某些过程中会与一些类别的蛋白质共纯化。其它酯酶或脂肪酶也发明人已经令人惊讶地发现，疏水相互作用色谱法(hydrophobicinteraction脂肪酶活性并且防止在药物产品中颗粒的形成。此外，已经发现了阴离子交换(anion力)可以成功地灭活和/或去除经共纯化的酯酶或脂肪酶，这可能导致酯酶或脂肪酶降解，下文进一步详细地阐述了本发明的这些方面和其 肽可以例如使用自动化多肽合成仪合成。各种固相肽合成方法是本领域的技术人员已知[0073]蛋白质可以使用基于重组细胞的生产系统(如昆虫杆状病毒系统、酵母系统(例治疗性糖蛋白的生产平台—非人唾液酸化的发生、影响和挑战(Productionplatformsforbiotherapeuticglycoproteins.Occurrence,impact,andchallengesofnon_链恒定区包括三个结构域CH1、CH2和CH3。每条轻链包括轻链可变区(lightchain(CL1)。VH区和VL区可以进一步细分为被称为互补决定区(complementarydeterminingFR)的区。每个VH和VL由按照以下顺序从氨基末端到羧基末端排列的三个CDR和四个FR构有源自人种系免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本公开的人抗体可以包括非人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内的抗体。[0078]白细胞介素_4(IL_4)和白细胞介素_13(IL_13)是驱动过敏性反应和辅助性T细胞2(Th2)极化炎症过程的关键细胞因子。IL_4和IL_13信号传导是通过异源二聚体受体复合标。在一些方面，所关注蛋白质是抗IL_4R抗体或其抗原结合片段。在例如美国专利第5,蛋白基因的动物(例如，小鼠)中分离的抗体(参见例如，Taylor等人(1992)《核酸研究的氨基酸序列虽然源自人种系VH序列和VL序列并与其相关，但是可能在体内的人抗体种系蛋白水解消化或涉及操纵和表达编码抗体可变结构域和任选地恒定结构域的DNA的重组基的片段化以酶促方式或以化学方式产生，和/或抗体片段可以由编码部分抗体序列的基因一表位和第二表位)选择性结合，则第一重链对第一表位的亲和力通常将比第一重链对第带有Fc区(IgG样)；以及另一类缺乏Fc区，后者通常小于包括Fc的IgG和IgG样双特异性分orth_FabIgG、双可变结构域Ig(DVD_Ig)、二合一或双功能Fab(DAF)、IgG_单链Fv(IgG_DNL)方法产生的抗体(GaoweiFan,ZujianWang和MingjuHao,双特异性抗体及其应用(Bispecificantibodiesandtheirapplications),8《血液学与肿瘤学杂志(JOURNALOFHEMATOLOGY&ONCOLOGY)》130；DafneMüller和RolandE.Kontermann,双特异性抗体(BispecificAntibodies),《治疗性抗体手册(HANDBOOKOFTHE抗体如三特异性抗体和KIH三特异性抗体也可以通过本文所公开的系统和克隆或噬菌体克隆。可以使用本领域中已知的各种技术来制备可用于本公开的单克隆抗据本公开的某些方面，抗hIL_4R抗体或其抗原结合片段分别包含轻链互补决定区LCDR1_抗hIL_4R抗体或其抗原结合片段分别包括链互补决定区(CDR)HCDR1_HCDR2_HCDR3_LCDR1_[0090]在某些方面，抗hIL_4R抗体或其抗原结合片段分别包含重链互补决定区HCDR1_体或其抗原结合片段分别包含轻链互补决定区LCDR1_LCDR2_LCDR3，所述轻链互补决定区[0091]在某些方面，抗hIL_4R抗体或其抗原结合片段包含具有SEQIDNO:1的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)。在某些方面，抗hIL_4R抗体或其抗原结合片段包含具有SEQID些方面，抗IL_4R抗体分别包含具有SEQIDNO:1/2的氨基酸序列的HCVR/LCVR以及人IgG4[0092]可以用于本公开的方法的上下文的其它抗IL_4R抗体包括例如被称为且在本领域中被称为AMG317(Corren等人,2010,《美国呼吸与危症监护医学杂志(AmJRespirCrit[0094]本公开内容的药物制剂中所含抗体或其抗原结合片段的量可能会因制剂所期望体；约15mg/mL至约200mg/mL的抗体；约25mg/mL至约200mg/mL的抗体；约50mg/mL至约物制剂含有175mg/mL±5mg/mL的抗IL_[0095]本公开涵盖具有与本文所公开的示例性分子的氨基酸序列不同的氨基酸序列但件下以相同的摩尔剂量单次或多次施用时，其吸收速率和吸收程度没有显示出显著差异，或其它生物流体中的浓度随时间的变化情况；(b)与人体内生物利用度数据相关并且可合工中的任何步骤、包括最终经调配的产品的药物物质(drugsubstance，DS)或药物产品来源和下游来源。细胞底物来源的杂质包括但不限于源自宿主生物体的蛋白质以及核酸或较低的风险。其中一个此类因素是生物治疗性产品中的HCP杂质的浓度或丰度(数量)。重大风险的水平可以取决于HCP的具体特性，所述水平可以被视为在产品中是不可接受的中可以允许的含量阈值会设的较低。其它特别关注的HCP可以是例如可能或已知能降解生定液相或固相时，液体携带的生物/化学混合物可由于组分的差异分布而被分离成不同组[0113]亲和色谱法可以涉及使生物样品经受装有合适的蛋白A树脂的色谱柱。当在本文过肽合成或通过重组技术)以及保留了与具有CH2/CH3区域的蛋白质结合的能力的变体。在[0114]蛋白A树脂有若干种商业来源。合适的树脂包括但不限于来自Cytiva公司的pcc、MabSelectXtra、rProteinASepharose，来自EMDMillipore公司的ProSepHC、ProSepUltra、ProSepUltraPlus，来自ThermoFisher公司的MabCapture以及来自JSRLifeSciences公司的Amsp甘氨酸_HCl、乙酸或柠檬酸)对色谱柱进行洗脱。可以使用本领域的技术人员熟知的技术[0116]阳离子交换色谱法(Cationexchangechromatography，CEX)使用阳离子交换色使用磺丙基官能团的SPSepharose。弱阳离子交换剂包括例如使用羧甲基官能团的CM_纤PrepCM(可从美国加利福尼亚州赫拉克勒斯市的BioRad实验室(BioRadLaboratories,弗吉公司(Ciphergen,Fremont,Calif.,USA)购得)；DowexMAC_3(可从美国密歇根州米德兰的陶氏化学公司(Dowchemic1500、CM3000(可从美国印第安纳州泰瑞豪特的BioChrom实验室(BioChromLabs,Terre生物科学欧洲股份有限公司(GEHealthcare—AmershamBiosciencesEuropeGmbH,[0118]阳离子交换色谱法材料包括结合了离子交换和疏水相互作用技术的混合模式色[0119]在一些方面，使包含所关注蛋白质的样品经受至少一个阴离子交换(AEX)分离步本领域的技术人员已知的其它色谱法模式)联合使用。树脂的组分可以使用适当的洗脱缓冲液进行[0123]在结合洗脱模式下首先用具有适当离子强度和pH的缓冲液对色谱柱或膜装置进同pH和/或电导率的缓冲液对色谱柱或膜装置进行洗涤之后，可通过增加洗脱缓冲液的离从而改变溶质的电荷是实现溶质洗脱的另一种方式。电导率或pH的变化可以是渐进式的[0127]阴离子交换树脂的非限制性实例包括二乙基氨基乙基(diethylaminoethyl，其是高流速琼脂糖微珠；CaptoAdhere；QSepharoseFastFlow；ToyopearlQAE_550、ToyopearlDEAE_650和ToyopearlGigaCapQ_650，其是聚合物基微珠；Fractogel8EMD是具有伯胺配体的耐盐色谱膜；SartobindQnano，其是强阴离子交换色谱膜；CUNOBioCap，其是由无机过滤助剂、精制纤维素和离子交换树脂制成的zeta_plus深层过滤介质；XOHC，其是由无机过滤助剂、纤维素和混合纤维素酯制成的深层过滤介质；以及级分可以进一步细分为例如非常高的分子量(vHMW)级分和二聚体级分(表示所关注蛋白质的二聚体的洗脱时间)。比所关注蛋白质的功能形式更晚洗脱的分析物可以大致归类为低球形微珠形式的交联琼脂糖和/或葡聚糖。交联程度决定了存在于溶胀凝胶微珠内的孔隙SEC可以用于从样品中去除HMW物质，例如以去除在搅拌或热应力后聚集成HMW物质的蛋白人,“使用带有PER.C6⑧衍生重组抗体的疏水相互作用膜吸附剂的精制步骤的开发(Developmentofapolishingstepusingahydrophobicinteractionmembrane105(2):296_305(2010)；Roettger和Ladisch,“疏水相互作用色谱法(HydrophobicShukla和Sanchayita,“用于在疏水相互作用色谱法流穿级分中纯化蛋白质的方法(Processforpurifyingproteinsinahydrophobicinteractionchromatographyflow_throughfraction)”,美国专利第7,427,659B2号,2008年9月23日；以及Müller和Franzreb,“商业疏水相互作用吸附剂在低盐条件下对温控蛋白质液相色谱法的适用性(Suitabilityofcommercialhydrophobicinteractionsorbentsfortemperature_[0133]将疏水相互作用介质用于称为疏水相互作用色谱法(HIC)的过程中，并且用于将所关注蛋白质从生产和工艺相关的污染物中分离。当所关注蛋白质在宿主细胞中制造和/鼠卵巢(Chinesehamsterovary，CHO)细胞(一种常见的制造生物治疗剂的宿主细胞)的的混合物置于缓冲液中的HIC介质中，所述缓冲液旨在促进POI中的疏水基团与HIC介质的[0135]在一些情况下，旨在结合具有亲脂性属性的特定蛋白质的亲和色谱法可以代替在于酵母中的新型脂肪酶家族(IdentificationofphospholipaseBfromDictyosteliumdiscoideumrevealsanewlipasefamilypresentinmammals,flies[0139]通过质谱仪鉴定的肽可以用作完整蛋白质及其翻译后修饰或其它修饰的替代代述，参考综述:ElisabettaBoeriErba和CarloPetosa,天然质谱法在表征大分子复合物的结构和动力学中的新兴作用(Theemergingroleofnativemassspectrometryin可用于搜索相关蛋白质序列的公共数据库包括由例如Uniprot或Swiss_prot托管的数据SpectrumMill()、PLGS()、PEAKS(/proteinpilot)、Phenyx(www.phenyx_)、Tandem(/TANDEM/)、ProteinProspector(/prospector/mshome.htm)、Byonic(/products/byonic)或[0145]本公开的药物制剂还可以包含用于维持稳定的pH并帮助稳定所关注蛋白质的缓的组氨酸缓冲液和浓度为10mM至15mM的乙酸盐缓冲液。在一些情况下，制剂含有浓度为20mM±2mM的组氨酸缓冲液和浓度为12.5mM±1.25mM的乙缩醛并且基本上不与氨基酸或多肽反应以引发美拉德反应(Maillardreaction)。非还原糖)充当所关注蛋白质的热稳定剂。如，本公开的药物制剂可以包含约0.5约1.0约1.5约2.0约2.5约3.0约3.5约4.0约4.5约5.0约5.5约6.0约6.5约7.0约7.5约8.0约8.5约9.0约9.5约10.0约15或约20％的糖(例如，蔗糖)。在一些[0149]包含在本公开的药物制剂内的氨基酸的量可能会因制剂所期望的具体特性以及体的表面张力和/或降低油与水之间的界面张力的物质。表面活性剂可以是离子型或非离子型的。可以包含在本公开的制剂中的特定[0151]包含在本公开的药物制剂内的表面活性剂的量可能会因制剂所期望的具体特性面活性剂。例如，本公开的制剂可以包含约0.01约0.02约0.03约0.04约0.05约0.06约0.07约0.08约0.09约0.1约0.11约0.12约0.13约0.14约0.15约0.16约0.17约0.18约0.19约0.20约0.21约0.22约0.23约0.24约0.25约0.26约0.27约0.28约在一些方面，制剂含有约0.01％至约0.49％的泊洛沙姆188。在一些方面，制剂含有约界面)的影响的常见赋形剂(EmilyHa,WeiWang和Y.JohnWang,聚山梨醇酯80中的过氧化物形成和蛋白质稳定性(Peroxideformationinpolysorbate80andproteinstability),91《药学科学杂志(JOURNALOFPHARMACEUTICALSCIENCES)》2252–2264解途径(Polysorbates20and80UsedintheFormulationofProtein(2008)；Hanns_ChristianMahler等人,表面活性剂和单克隆抗体对灭菌级过滤器的吸附行为(AdsorptionBehaviorofaSurfactantandaMonoclonalAntibodyto水山梨醇头基和饱和单月桂酸酯侧链(聚山梨醇酯20；Dixit等人,残留的宿主细胞蛋白促进硫酸酯酶药物产品中的聚山梨醇酯20的降解从而导致游离脂肪酸颗粒(ResidualHostCellProteinPromotesPolysorbate20DegradationinaSulfataseDrugProductLeadingtoFreeFattyAcid研究(DegradationofPolysorbates20and80:StudiesonThermalAutoxidationand水山梨醇头基。由聚山梨醇酯产生的游离脂肪酸可以包括任何具有6至20个碳的脂肪族脂和纳米颗粒(约<100nm)(LindaNarhi,JeremySchm见颗粒可以通过光阻法来监测。脂肪酸颗粒的增加可能导致产品不再具有可接受的质量，一个来源的聚山梨醇酯80的分析揭示油酸含量约70其余是其它脂肪酸酯和杂质。对聚山梨醇酯80的又另一个来源的分析揭示约86_87％油酸。对聚山梨醇酯80的另外的最近开约100％之间、介于约95％与约100％之间、介于约98％与约100％之间、介于约99％与约或其它聚集体的形成。聚集体可能会变成纳米颗粒或10至100微米范围或2至100微米范围颗粒但不含可见颗粒的溶液或其它液体将不会显得浑浊。亚可见颗粒通常包括直径为100见和可见颗粒的分析方法的评述(Acriticalreviewofanalyticalmethodsfor到(Singh和Toler,“治疗性蛋白中亚可见颗粒的监测(Monitoringofsubvisible[0170]亚可见颗粒可以通过各种方法中的任何一种或多种方法来检测。USP标准规定了库尔特计数法(Coultercounting)和亚微米颗粒追踪法。对于光遮蔽法(light第1部分，注意事项和策略(Subvisible(2_100μm)ParticleAnalysisDuringBiotherapeuticDrugProductDevelopment:Part1,ConsiderationsandStrategy)”,微流成像(MFI))(安大略省渥太华的Brightwell科技公司(BrightwellTechnologies,流成像：应用于蛋白质制剂中亚可见颗粒分析的流动显微镜检查(Micro_flowimaging:Flowmicroscopyappliedtosub_visibleparticulateanalysisinprotein见或亚可见颗粒。如本文所使用的，术语“拉曼光谱学”是指基于拉曼散射方法(RamanQingWen,蛋白类药物的拉曼光谱学(Ramanspectroscopyofprotein[0173]FDA及其它政府监管机构已经对肠胃外药物制剂中亚可见颗粒的允许含量进行了限制。主要的关注点是与接受药物的患者的潜在免疫原性及后续负作用相关的不确定性(Singh等人,“关于监测亚可见颗粒作为蛋白质治疗剂的质量属性的行业视角(Anindustryperspectiveonthemonitoringofsubvisibleparticlesasaquality过3,000个SVP，大于或等于25微米的SVP每个容器不超过300个。(美国药典和国家处方集蛋白注射剂中的亚可见颗粒物质(SubvisibleParticulateMatterinTherapeuticProteinInjections)。)对于眼科用药，SVP限值是每毫升含10微米或更大的不得超过50个，每毫升含25微米或更大的不得超过5个并且每毫升含50微米或更大的不得超过2个(同管机构越来越多地考虑让制造商为2微米或更大的SVP建立规范(参见Singh等人,“关于监[0175]磷脂酶是将磷脂水解成脂肪酸和其它产物的脂肪酶。磷脂酶可大致分为四个大类：磷脂酶A(包括磷脂酶A1和磷脂酶A2)、磷脂酶B以及磷酸二酯酶(磷酸二酯酶C和磷酸二酯酶D)。除了典型的磷脂酶之外，驻留在溶酶体内腔的iochemicalcharacterizationandliposomallocalizationlocalizationofthemannose_6_剂)和2_丁氧基苯基硼酸(一种激素敏感性脂肪酶的抑制剂)。在所关注蛋白质的纯化期间或在最终制剂中加入酯酶抑制剂有望防止或减缓非离[0179]根据本公开的一个方面，所述药物制剂包含：(i)与hIL_4R特异性结合的人抗体异性结合，并且包含包含有SEQIDNO:1的氨基酸序列的重链可变区(HCVR)和包含有SEQ可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至糖；(v)浓度为20mM至80mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为包括聚乙二醇或泊洛沙姆的表面活性剂的浓度可以为约0.01％w/v至0.5％w/v、或约可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为约5.6至6.2。可变区(HCVR)和包括SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至糖；(v)浓度为20mM至80mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为包括聚乙二醇或泊洛沙姆的表面活性剂的浓度可以为约0.01％w/v至0.5％w/v、或约可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和包括SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和包括SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至糖；(v)浓度为20mM至80mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为包括聚乙二醇或泊洛沙姆的表面活性剂的浓度可以为约0.01％w/v至0.5％w/v、或约可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至链可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为为0.01％w/v至0.19％w/v的PEG3350，其中所述制剂的pH为5.9±0.2。另一方面，包括可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至糖；(v)浓度为20mM至80mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为包括聚乙二醇或泊洛沙姆的表面活性剂的浓度可以为约0.01％w/v至0.5％w/v、或约可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为10mM至可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为约5.6至6.2。可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为25mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为50mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为约5.6至6.2。可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为50mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为12.5mM糖；(v)浓度为75mM±2.5mM的精氨酸；和(vi)表面活性剂，所述表面活性剂包括浓度为约5.6至6.2。链可变区(HCVR)和含有SEQIDNO:2的氨基酸序列的轻链可变区(LCVR)；(ii)浓度为泊洛沙姆188的表面活性剂的浓度可以为约0.01％w/v至0.5％w/v、或约0.01％w/v至[0201]在上文或本文所讨论的药物制剂的各个方面中的任何方面，人IL_4R抗体可以包[0202]在上文或本文所讨论的药物制剂的各个方面中的任何方面，人IL_4R抗体可以包和/或功能和/或生物活性。即使其中所含有的蛋白质在储存一定时长之后不保持其100%度下储存一定时长之后或在应力条件(例如，搅拌)下形成聚集体的蛋白质的百分比来测方法确定，例如尺寸排阻色谱法(如尺寸排阻高效液相色谱法(sizeexclusionhighperformanceliquidchromatography，SE_HPLC)或尺寸排阻超高效液相色谱法(size4R抗体的药物制剂，如果在5℃下储存九个月之后，检测到呈聚集形式的抗体少于约2％、一种药物制剂在45℃下储存56天之后，检测到呈聚集形式的蛋白质少于约12则该制剂质少于约10％或少于约9则该制剂也可以被视为是稳定的。如果一种药物制式的蛋白质少于约6则该制剂也可以被视为是稳定的。如果一种药物脂酶的存在和活性的方法在本领域中是已知的药物制剂在5℃下储存24个月之后，通过显微镜检查在2.25mL的体积内鉴定出的脂肪酸颗过显微镜检查在2.25mL的体积内鉴定出的脂肪酸颗粒不超过250个，则也可以被视为是稳可以被视为是稳定的。如果一种药物制剂在5℃下储存36个月之后，通过显微镜检查在制剂在5℃下储存36个月之后，通过显微镜检查在2.25mL的体积内鉴定出的脂肪酸颗粒不如果一种药物制剂在5℃下储存36个月之后，通过显微镜检查在2.25mL的体积内鉴定出的45℃。通过离子交换色谱法(例如，阳离子交换高效液相色谱法(cationexchangehighperformanceliquidchromatography，CEX_HPLC)或阳离子交换超高效液相色谱法过例如在存在抗体的情况下测量IL_4R系统的下游活性以及将该活性与在不存在抗体的情特定稳定性意指在研究开始之后的12个月或约12个注射器来容纳和/或施用本公开的药物制剂。在一些方面，药物制剂容纳在预灌封注射器"FluroTecg"从西部制药服务公司(WestPharmaceuticalServices,Inc.)(宾夕法尼亚州针头和FM30针头护罩或BD260针头护罩的1mL长玻璃注射器。在一些情况下，注射器是夫的Disetronic医疗系统公司(DisetronicMedicalSystems,Bergdorf,Switzerland))、诺和诺德公司)、BDTM笔(新泽西州富兰克林湖的贝迪医疗公司(BectonDickinson,皮下递送本公开的药物组合物的一次性笔式和/或自动注射器递送装置的实例包括但不限(Dey公司(Dey,L.P.))和HUMIRATM笔(伊利诺伊州雅培科技园的雅培实验室(AbbottLabs,西部制药公司(WestPharmaceutical)的ERIS装置或碧迪医疗公司的UltraSafe装置。另包含在上述范围内的数值)的组合作为上限和/或下限的数值范围也涵盖在内。在特定方[0226]本公开的治疗方法包括向受试者施用包含如本文所公开的抗hIL_4R抗体的任何动物，或者是那些原本可以从抑制或减弱IL_4R和/或IL_4R介导的活性中受益的人或非人改善与IL_4R活性相关的任何疾病或病症[0249]提出以下实施例是为了向本领域的普通技术人员完整地公开和描述如何制备和[0252]使用HIAC光遮蔽和Brightwell微流成像(MFI)技术测量直径大于1微米的颗粒。HIAC将光遮蔽与激光散射相组合，能够对流动流体中粒径范围在500nm_350μm的颗粒进行将所述颗粒分类划分到到预先设的定尺寸大[0253]对于HIAC测定，将来自一条生产线(GMP批次)的含有150mg/mL单克隆抗体的样品使用HIAC检查相同150mg/mL抗体制000个累积计数)和MC05探头(其每mL至多可读取10,000个颗粒。对含有150mg/mL单克隆抗体的实验室样品进行MFI(如HIAC分析中那样)检测。对于ColorimetricMicro一DeterminationofNon一EsterifiedFattyAcidsinPlasma)”,的比色法测定(ColorimetricDeterminationofFreeFattyAcidsinBiological微量测定法(ColorimetricUltramicroMethodfortheDeterminationofFreeFatty良比色超微量方法(ModifiedColorimetricUltramicroMethodforEstimating对聚山梨醇酯在45℃下在不同时间点温育之后酯的初始百分比和酯的剩余百分比进行测量和比较。根据方法6生产的mAb1(不具有HIC并且具有PS降解活性)和根据方法3生产的mAb1(具有HIC步骤并且不具有PS降解活性)(器(AmiconUltra50K，马萨诸塞州比勒利卡的密理博公司(Millipore,Billerica,Mass.))中，然后以14,000×g离心15分钟或直到剩余体积略低于该装置上的10的试管中稀释100倍，然后使用Nanodrop1000(特拉华州威明顿的赛默飞世尔科技公司州米尔福德的沃特世公司(WatersCorporation,Milford,Mass.))对各时间点样品进行分用具有梯度补偿的带电气溶胶检测技术对植物油中的甘油三酯进行定量分析(Quantitationoftriacylglycerolsfromplantoilsusingchargedaerosoldetectionwithgradientcompensation)”,《色谱杂志A》1176(1_2):135_42(2007)；Plante等人,“利用HPLC中的带电气溶胶检测来测量脂质(Theuseofchargedaerosol[0276]按照美国专利第10,342,876号(其内容通过引用并入文本)中所述，对两个GMP批次的150mg/mL抗体制剂在5℃下储存至少六个月之后，通过HIAC光遮蔽来评估其亚可见颗配成以下三种情况来测试非离子型洗涤剂(聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80)的性质和质量对蛋白质制剂中的亚可见颗粒形成的影响：(i)使用来自供应商A的聚山梨醇酯20(PS20_示出了来自以下配方的经调配的药物物质的HIACSVP(尺寸≥10μm)数据：20mM组氨酸(pH司的S2_F4514432/50GRYB2_4醇酯20(PS20_B)(其是品质较高的聚山聚山梨醇酯20(PS20_A；品质较低的聚山梨醇酯20)的那些制剂更少的SVP形成。PS20_A和PS20_B的比较分析显示，PS20_B的总酯量比PS20_A的总酯量多5_10并且PS20_A含有比含150mg/mL抗体(mAb1)且含0.02％非离子型洗涤剂(聚山梨醇酯)的制剂中聚山梨醇酯20在将样品在5℃下储存六个月或在45℃下储存两个月之后，观察到聚山梨醇酯20的酯类组[0286]在相同条件下，使用质谱法测量游离脂肪酸和脂肪酸酯的相对量，测定了用150mg/mL抗体(mAb1)调配的聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80(如上文针对表5所述)的降解速[0294]使用CAD_UHPLC进一步比较了储存在玻璃小瓶或预灌注注射器中的包含SR_PS80[0296]为了确定负责聚山梨醇酯降解的病因学因素，根据美123456使由CHO细胞生产的抗体经受连续的纯化步骤，并且在每个步骤中评估聚山梨醇酯20的稳酸酯释放的脂肪酸也可能会以不混溶的脂肪酸液滴的形式而有助于亚可见颗粒形成。因实验中使用了质量较低的PS20_A，但HIC步骤的应用显著降低了药物物质中SVP的形成(大[0315]进一步表征包含PS20或PS80并且通过HIC产生的mAb1制剂随时间的推移的颗粒形[0316]进一步评估了通过HIC生产的mAb1制剂的聚山梨醇酯随时间的推移的降解，如图[0318]在CHO细胞培养物中生产的示例性抗体的HIC纯化期间，追踪聚山梨醇酯降解活析所述流穿物的聚山梨醇酯降解活性。在该流穿级分中没有观察到聚山梨醇酯降解活性。测试聚山梨醇酯降解活性是否源于脂肪酶。表13呈现的数据表明相对于对照组(具有相关聚山梨醇酯降解活性的抗体加上不具有脂肪酶抑制剂的聚山梨醇酯20)而言，由于脂肪酶[0322]使含有聚山梨醇酯降解活性的CHO生产的重组抗体HIC剥离级分(不是流穿物)在在未知种类。含有聚山梨醇酯20并掺入有L8(1:100)的经调配的抗体样品在第八天示出了和两个后出现的代表较小种类的次要峰。柱上的第一个峰包含抗体二聚体和其它低聚物。[0324]使HIC级分L8也经受鸟枪法蛋白质组学分析。简单来说，L8级分依次进行以下操[0325]聚山梨醇酯降解活性的量与存在的磷脂酶B样2蛋白(PLBL2)的丰度相关。在各种000[0331]研究了阴离子交换(AEX)色谱法单元操作降低药物制剂中的脂肪酶水平的能力。[0332]如表15所示，经优化的AEX工艺的性能在四个中试规模(500L)验证批次中得到验simulation)。验证批次应答用橙色实线表示。所有应答都在使用本发明的方法产生的抗IL_4R抗体的按比例缩小的多变量模型所生成的预测范围内，这说明了该工艺对按比例放大的稳健性和小规模模型对预测中试规模性能梨醇酯随时间的推移而降解，如图11和图12所示。同源性建模证明，与mAb6和mAb7相比，[0341]在包括不同等级的PS80的样品中评估了在没有HIC步骤的情况下制备的mAb1药物[0344]将DP样品在2_8℃下在玻璃预填充注射器中储存至多24个月。通过膜显微镜检查[0345]图14示出了如通过膜显微镜检查测量的每个容器中直径≥10μm的SVP的数量。图87％的油酸酯含量的PS80的DPA跨24个月时段显示出次低的亚可见颗粒数量(具体地，到颗粒而言)是使用具有更高油酸(或长链脂肪酸)酯于其熔点较高，由此形成的亚可见和可见无定形颗粒在分析期间的环境温度下会持续存[0348]在将样品在5℃下储存18个月之后，评估了每个样品DP(DPA_F)中每种类型的游[0350]酯酶或脂肪酶可以通过酯键的酶水解来水解聚山梨醇酯，如图18A所示。诸如[0351]为了研究使用替代性表面活性剂是否可以减少经调配的DP中的SVP形成，按照美国临时申请第63/337532号中所述的方法(此文献通过引用方式并入本文)，使用替代性表调配浓度为150mg/mL的包含SEQIDNO:1/2的HCVR/LCVR氨基酸序列对的抗IL_4R抗体。将制剂置于注射器中在5℃下储存长达36个月，并定期通过显微镜法测量存在于制剂中的颗[0352]这些结果表明，像泊洛沙姆188这样的替代性表面活性剂对含脂肪酶制剂中的降[0353]为了评估替代性表面活性剂促进治疗性蛋白稳定性的能力，使包含PEG3350或泊洛沙姆188的制剂进一步经受搅拌应力稳定性和热应力稳定性的评估。测试了含有不同浓沙姆188来调配浓度为150mg/mL的包括SEQIDNO:1/2的HCVR/LCVR氨基酸序列对的抗IL_起的可观察到的HMW物质的增