CN119497708A Tead抑制剂和使用方法 （思博睿生物探索公司）

2025.01.20PCT/US2023/0703532023.07.17WO2024/020350EN2024.01.25,其中变量是如以及使用所述化合物治疗由TEA结构域转录因子23451_C6烷基67在所述C1_4亚烷基的碳上的偕二氢能够与它们所附接至的碳原子结合在一起以形成3_7元24.根据权利要求1_22中任一项所述的化合物，其中R2是具有一个或两个杂原子的5元1_C6烷基。81_C6烷基。1_C6烷基。1_C6烷基。35.根据权利要求1_24和31中任一项所述的化合物，其中所述化合物是式(Id)的化合937.根据权利要求1_10和21_36中任一项所述的化合物，其中R1含有至少一个环碳原子43.根据权利要求1_42中任一项所述的化合物，其中所述化44.一种药物组合物，包含：(a)根据权利要求1_43中任一45.一种治疗有相应需要的受试者的由选自TEAD1和TEAD4的TEAD同种型的超活化介导46.根据权利要求45所述的方法，其中所述疾病或状况是以选自TEAD1和TEAD4的TEAD63.根据权利要求45_62中任一项所述的方法，其中43中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐或根据权利要求44所述的药物组合物与一64.根据权利要求1_43中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐，或根据权利要求65.根据权利要求64所述的用于使用的化合物或药学上可接受的盐或药物组合物，其66.根据权利要求65所述的用于使用的化合物或药学上可接受的盐或药物组合物，其67.根据权利要求1_43中任一项所述的化合物或药学上可接受的盐或根据权利要求44所述的药物组合物在制备用于治疗有相应需要的受试者的由选自TEAD1和TEAD4的TEAD同68.根据权利要求67所述的用途，其中所述疾病或状况是以选自TEAD1和TEAD4的TEAD[0001]本申请要求于2022年7月21日提交的美国临时申请第63/369,036号的优先权和权associate)(TEA)结构域转录因子(TEA失调)介导的疾病或状况的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本文描述的化合TEAD2_TEAD4的N_末端DNA结合结构域(DNA_BD)和C_末端YAP/TAZ结合结构域(YAP/TAZ_BD)[0020]图2A是示出了TEAD在癌症生物学中的上游信号传导输出和下游转录输出的图，合物5每日两次治疗的携带MSTO_211H肿瘤的个体小鼠中治疗前和治疗后7天肿瘤体积的细胞和组织培养、分子生物学以及蛋白质和寡核苷酸或多核苷酸化学和杂交使用的命名，内容另外涵盖作为大体上不含其他异构体的单独的异构体以及可选择地作为各种异构体和3H12在一些实环状阵列中共享的6个或10个电子)的基团，具有在芳香族环体系中提供的环碳原子和1_4[0035]在一些实施方案中，杂芳基基团是具有在芳香族环体系中提供的环碳原子和1_4个环杂原子的5_6元芳香族环体系，其中每个杂原子的。在一些实施方案中，杂环基双环环体系在一个或两个环中包含一个或更多个杂原子。中附接点在环烷基或杂环基环上；或其中如上文定义的杂环基环与一个或更多个苯基或杂 [0039]在一些实施方案中，杂环基基团是具有环碳原子和1_4个环杂原子的3_10元非芳子)上存在的至少一个氢被允许的取代基替换，所述允许的取代基例如在取代时产生稳定成盐的实例是与无机酸或与有机酸形成的或通过使用本领域中使用的其他方法诸如离子[0074]在一些实施方案中，R2是3_7元单环杂环基或_(C1_C4亚烷基)_(3_7元单环杂环如，任选地被C1_6烷基、C1_6卤代烷基取代，或者在C1_4亚烷基的碳上的偕二氢(geminalhydrogen)可以与它们所附接至的碳原子结[0075]在一些实施方案中，R2是3_7元单环杂环基或_(C1_C4亚烷基)_(3_7元单环杂环[0076]在一些实施方案中，R2是3_7元单环杂环基或_(C1_C4亚烷基)_(3_7元单环杂环2[0077]在一些实施方案中，R2是3_7元单环杂环基或_(C1_C4亚烷基)_(3_7元单环杂环_N(Rb)2g2其中所述5元杂环基任选地被1个、2个或3个各自独立地选自C1_C6烷基和氧代的取代基取e选自氢和C1_C6烷基。1_C6烷基。1_C6烷基。[0108]无菌可注射溶液通过将根据本公开内容的化合物根据需要与如上文枚举的各种和其他哺乳动物的单一剂量的物理上离散的单元，每[0115]用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水性溶剂或有机溶剂或其混合以适当方式从递送制剂的装置口服或经鼻施在某些实施方案中，本文公开了治疗有相应需要的个体的由TEAD同种型(例如，TEAD1和/或TEAD4)的异常活性(例如，TEAD转录复合物的超活化)调节的疾病或紊乱的方[0119]TEAD1和/或TEAD4的选择性结合有利于优化抗肿瘤效力，同时使不期望的作用最用。报告的热位移数据在下文表2中提供(Tang和Post,“TheTEADautopalmitoylationinhibitorVT3989improvesefficacyandincreasesdurabilityofefficacyofosimertinibinpreclinicalEGFRmutanttumormodels,”ProceedingsoftheAmericanAssociationforCancerResearchAnnualMeeting2022;2022年4月8_13.Philadelphia(PA):AACR;Poster#5364)。表2中提供的数据示出，VT3989对TEAD2和化可能与结合亲和力的约10倍差异相关(Bhayani等人;“Determinationofdissociationconstantsofproteinligandsbythermalshiftassay,”BiochemicalandBiophysicalResearchCommunications,2[0123]在一些实施方案中，本文公开的化合物选择性地结合一种或更多种TEAD同种以TEAD的过表达或基因组融合或扩增为特征。TEAD1和TEAD4经历复发性肿瘤融合；例如，和子宫癌以及睾丸生殖细胞肿瘤中。TEAD4的这些基因组扩增与其mRNA表达的强烈增加相[0125]在某些实施方案中，TEAD同种型是TEAD1。在某些实施方案中，TEAD同种型是[0126]本文还提供了本文公开的化合物或药学上可接受的盐或其用于在治疗有相应需要的受试者的由选自TEAD1和TEAD4的TEAD同种型的超活化介导的的药物组合物在制备用于治疗有相应需要的受试者的由选自TEAD1和TEAD4的TEAD同种型可商购的起始材料、试剂和干燥的溶剂如供应的被使用。使用230_400目尺寸的Merck硅胶进行快速柱色谱法或玻璃柱色谱法。还在combi_flashRFTeledyneIsco机器方法名称：_HP04_BR1，机器细节：_具有2998PDA检测器的Wateralliance参考合适的内部非氘代的溶剂峰或四甲基硅烷。化学位移以录。在所有情况下，NMR数据与所提出的结构一致。特征化学位移(Characteristic本文描述了本申请的化合物的若干种化学合成方法。这些方法和/或其他众所周知的方法可以以各种方式修改和/或调整以促进在本申请和权利要求的范围内的另外的化合物的合成。这样的可选择的方法和修改应被理解为在本申请和权利要求的精神和范围2CO31.5当量)在DMF(5mL)中的溶液在室温搅拌持续15min并冷却至0℃。在0℃向该溶液中添速柱色谱法使用二氧化硅(230_400目)作为固定相(在己烷中的0_9%EtOAc)纯化，得到2_混合物在室温在H2(g)气氛(200psi)下搅拌持续16h。经由TLC(使用100%EtOAc作为流动6.8,其证实在室温搅拌4h之后反应完成。将所得的反应混合物用水(10mL)稀释并用EtOAc2流动相)监测反应，其证实在室温搅拌48h之后反应完成。将所得的反应混合物用水(202将所得的混合物在100℃在CO(g)下在40巴压力搅拌持续16h。在TLC(使用100%EtOAc作为(s,3H)。苯基)吡咯烷2酮(化合物2)的合成在室温，向3(3溴4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯基)3甲基吡咯烷2酮四甲基1,3,2二氧杂硼杂环戊烷2基)4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯基)吡咯烷2作为流动相)上监测反应。将所得的反应混合物用冰冷的水(100mL将3(1甲基1H咪唑4基)4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯甲酸甲酯(A12)2O减压下浓缩，以提供1.6g粗品。将获得的粗制材料通过combiflash使用二氧化硅(2允许所®使用二氧化硅(230_400目)作为固定相(在己烷中的50%乙酸乙酯)纯化，得到(4_(氯甲为流动相)监测反应，其证实在50℃搅拌8h之后反应完成。将所得的反应混合物用水(10在减压下浓缩，以提供0.09g粗品。将获得的粗制材料通过combiflash使用二氧化硅为流动相)上监测反应，其证实反应在3h之后完成。将所得的反应混合物用冰冷的水(5完成。将所得的反应混合物用饱和NaHCO3(5mL)碱化并用EtOAc(3x25mL)提取，经苯基)吡咯烷2酮(化合物5和化合物6)的手性分离氨基)苯基)吡咯烷_2_酮(化合物7和化合物氧基N甲基3(1甲基1H咪唑4基)4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯甲酰胺(A22)在0℃,向(4(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)2(1甲基1H咪唑4基)苯基)(4HNMR中观察到杂质峰反应混合物加热直至100℃并搅拌持续16h。在TLC(使用在己烷中的70%EtOAc作为流动唑4基)4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯基)咪唑烷2,4二酮(化合物9)(0.127g，烷2酮(化合物10)的合成证实在室温搅拌30min之后反应完成。将所得的反获得的粗制材料通过快速柱色谱法使用二氧化硅(230一400HPLC:9.26min,100%,210苯基)吡咯烷2酮(化合物11)的合成3h之后反应完成。将所得的反应混合物在室温冷却，然后将反应混合物用乙酸乙酯(100水(50mL)中并用乙酸乙酯(30mLx2)提取，将有机层经Na2SO4干燥并在减压下浓缩以获烷2酮(化合物12)的合成3h之后完成。将所得的反应混合物用饱和NaHCO3(5mL)猝灭并用EtOAc(3x20mL)提通过快速柱色谱法使用二氧化硅(230一400目)纯化，将所需的产物用在己烷中的40%EA洗2O粗品。将获得的粗制材料通过手动快速色谱法使用二氧化硅(200一法使用230_400目二氧化硅纯化。将产物(化合物13)在10%MeOH:DCM中洗脱(0.040g，苯基)咪唑烷_2,4_二酮(化合物14和化合物将混合物在室温搅拌持续4h。将溶液冷却至0℃,并且然后将NaBH4(165.5g，4380.7在室温，向N_(4_甲氧基苄基)_N_(2_(4_硝基苯基)乙酰基)甘氨酸甲酯(A31)1.1当量)。将所得的混合物搅拌持续15min，然后在0℃逐滴添加MeI(40.3g，286.48在室温，向1(4甲氧基苄基)3甲基3(4硝基苯基)吡咯烷2,4二酮(A33)在室温，向3(4氨基苯基)1(4甲氧基苄基)3甲基吡咯烷2,应完成。将反应混合物用冰冷的水(100mL)稀释并用苯基)吡咯烷2,4二酮(化合物17和化合物18温搅拌30min之后反应完成。将反应混合物用CHCl3稀释，并且然后添加在水(5mL)中的苯基)吡咯烷2酮(化合物20和化合物21)的手性分离苯基)吡咯烷2酮(化合物22)的合成2粗制材料通过手动柱色谱法使用二氧化硅(100一200目)作为固己烷中的50%55%EtOAc中作为流动相洗脱)，以提供3(3溴4((3(三氟甲基)苯基)氨在室温，向3(3溴4((3(三氟甲基)苯基)氨基)苯基)3甲基吡咯烷2酮实在140℃搅拌30min之后反应完成。将所得的反应混合物用H2O(20mL)稀释并用EtOAc实施例181(3(1甲基1H咪唑4基)4((4(三氟甲基)苯基)氨基)苯基)x100mL)提取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩，以提供粗制产物使用两种不同的方案测定TEAD依赖性NF2空间皮瘤细胞系NCI_H226的细胞增殖。a)CellTiter_Glo®2.0(Promega#G9243)。在TEAD1遗传依赖性细胞系NCI_个(NCI_H226和HEK_293T)细胞或2000个(NCI_H23)细胞/孔接种在96孔板(ThermoScientific#167008)中的用于NCI_H226和NCI_H23的生长培养基(RPMI_1640,Gibco#测定确定相对细胞生存数。允许测试板和CellTiter_Glo2.0试剂平衡至室温。将对细胞密度表示为抑制剂浓度的函数。使用GraphPadPrism和生物效应的IC50值绘制的数据使用EC50非线性拟合函数使用无约束的S形4参数逻辑最小二乘[0271]b)CellTiterOne(Promega,#G3582)。还使用PromegaSubstrateCell造商的说明向每个孔添加20μL的PromegaSubstrateCellTiter96AqueousOne[0273]表4.通过CTG测定测量的H226应答细胞系和H1AC2AC3AND4AND5AND6AND7BND8AND9ANDANDANDANDANDANDANDANDANDANDBNDANDANDANDANDAND表5.通过CellTiterOne测定测量的H226和H28细胞系的细胞毒性效能1AND2AND3AND4AND5AC6BND7AND8BND9ANDANDANDCNDCNDCNDAND最终DMSO浓度和250μl/孔的总体积。将处理的细胞在37℃,5%CO2孵育持续144小时(6[0275]表6.通过CTG测定测量的MBA5AAA将Mero82细胞胰蛋白酶化，计数并以400个细胞/孔铺板在96孔平底组织培养处的最终DMSO浓度和250μl/孔的总体积。将处理的细胞在37℃,5%CO2孵育持续144小时(6[0277]表7.通过CTG测定测量的MCA5AAA另外10分钟。从每个孔中取出150μl的细胞裂解物并分配到白色不透明96孔板的单个孔比相对于化合物浓度和在GraphPadPrism软件中用非线性回归拟合的曲线绘制。EC50值和[0279]表8.通过CTG测定测CA5B将LOU_NH91细胞胰蛋白酶化，计数并以1000个细胞/孔铺板在96孔平底组织培养的最终DMSO浓度和250μl/孔的总体积。将处理的细胞在37℃,5%CO2孵育持续216小时(9力百分比相对于化合物浓度和在GraphPadPrism软件中用非线性回归拟合的曲线绘制。AA5A的最终DMSO浓度和250μl/孔的总体积。将处理的细胞在37℃,5%CO2孵育持续144小时(6[0283]表10.通过CTG测定测量的MSTOAA5AAA最终DMSO浓度和250μl/孔的总体积。将处理的细胞在37℃,5%CO2孵育持续144小时(6力百分比相对于化合物浓度和在GraphPadPrism软件中用非线性回归拟合的曲线绘制。ACA5AAA热位移测定(TSA)是一种评价蛋白质随温度变化的稳定性的生物物理方法。该测[0286]本实施例中描述的研究调查了当用TEAD抑制剂处理时，TEAD同种型1_4的熔化温根据上文概述的程序制备测定缓冲液并分配到测试孔中。在测定缓冲液中添加Spyroorange至5倍浓度，然后在测定缓冲液中添加测试化合物储备溶液至10μM或30μM本研究评价了测试化合物在BALB/c裸小鼠中治疗肺癌的MSTO_211H异种移植物的动物提供者：BeijingVitalRiverBiotechnologyExperimentalAnimalCo.第1部分组Na化合物剂量(mg/kg)给药途径给药频率c给药时间表c14媒介物BID24512.5BID4412.5BID6412.5BID第3部分将MSTO_211H肿瘤细胞在37℃在空气中5%CO2的气氛中维持在补充有10%胎牛血将每只小鼠在右侧腹部皮下接种MSTO_211H肿瘤细胞(5×106+50%基质胶/0.2b分别是肿瘤的长直径和短直Ti是在给[0311]进行单尾T检验以比较两个组之间的肿瘤体积。使用Gra表14.在第2部分研究过程中的肿瘤尺寸。