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文档简介

氨基酸序列如SEQIDNO.4所示的硫酯酶家族蛋有特定突变位点的硫酯酶家族蛋白突变体能够21.硫酯酶家族蛋白突变体或其编码基因或含有所述编码基因的生物材料在构建用于生产赖氨酸或其衍生物的微生物中的应用,所述硫酯酶家族蛋白突变体与氨基酸序列如2.硫酯酶家族蛋白突变体或其编码基因或含有所述编码基因的生物材料在微生物发酵生产赖氨酸或其衍生物中的应用,所述硫酯酶家族蛋白突变体与氨基酸序列如SEQID3.硫酯酶家族蛋白突变体或其编码基因或含有所述编码基因的生物材料在提高微生物生产赖氨酸或其衍生物的产量中的应用,所述硫酯酶家族蛋白突变体与氨基酸序列如4.根据权利要求1~3任一项所述的应用,其特征在于,氨基酸序列如SEQIDNO.1~3所述微生物基因组中的原始硫酯酶家族蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.3[0005]本发明在对微生物发酵生产赖氨酸的研究过程中意外地发现,氨基酸序列如SEQIDNO.4所示的硫酯酶家族蛋白与赖氨酸的产量存在明显的相关性,并发现含有特定突变4[0010]以上所述的氨基酸序列如SEQIDNO.4所突变体的编码基因的核苷酸序列。[0014]其中,所述表达盒为将所述编码基因与转录和/或翻译调控元件可操作性地连接[0016]所述宿主细胞为任意能够携带所述编码基因或表达所述硫酯酶家族蛋白突变体微生物基因组中的原始硫酯酶家族蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.5发明的硫酯酶家族蛋白突变体对于菌株的赖氨酸生产能力的提升作用不依赖于上述菌株所含有的其它遗传改造,这些遗传改造仅仅是为了使得菌株具有一定的赖氨酸生产能力。酶家族蛋白突变体引入到任意的谷氨酸棒杆菌中均能够有效促进赖氨酸的产6[0040]以下实施例中未注明具体技术或条件者,按照本领域的文献所描述的技术或条[0042]在谷氨酸棒杆菌中引入硫酯酶家族蛋白突变体的方式可采用棒杆菌中经典的遗[0045]步骤3:将步骤1和步骤2获得的产物通过无缝克隆试剂盒进行组装,并转化至[0047]以电穿孔的方法将重组质粒pK18mobsacB_NCgl0686_V23A转化至ATCC13032感受[0049]质粒构建和引入含V23G突变的硫酯酶家族蛋白突变体的方法与实施例1的方法的7[0052]步骤3:将步骤1和步骤2获得的产物通过无缝克隆试剂盒进行组装,并转化至[0054]以电穿孔的方法将重组质粒pK18mobsacB_NCgl0686_V23G转化至ATCC13032感受[0059]步骤3:将步骤1和步骤2获得的产物通过无缝克隆试剂盒进行组装,并转化至[0061]以电穿孔的方法将重组质粒pK18mobsacB_NCgl0686_V23T转化至ATCC13032感受8株命名为11942_NCgl0686_V23株命名为13407_NCgl0686_V23[0075]对实施例1_9获得的9株菌株进行发酵测试,观察其赖氨酸生产能

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