《标准菌株管理规范》落地精讲

制度精讲·条款拆解·操作合规标准菌株管理规范落地精讲规范解读·全流程合规要点精析汇报时间：2026COURSEOVERVIEW课程导览本次课程按四个模块推进，从认知到操作、由风险到改进，建立完整的学习路径。01规范认知与法规框架建立法规认知基础02全流程条款精讲按生命周期拆解条款03日常操作合规要点聚焦一线重难点04风险防控与持续改进建立风险改进机制《标准菌株管理规范》落地精讲02/30规范认知与法规框架法规是合规的起点01定义与来源标准菌株的定义与来源标准菌株：直接从官方菌种保藏机构获得，至少定义到属或种水平。“正统出身”决定遗传特性明确、可溯源，是后续一切质量控制活动的基础。三大常用保藏机构CMCC中国医学微生物菌种保藏管理中心ATCC美国典型培养物保藏中心CICC中国工业微生物菌种保藏管理中心可溯源、遗传特性明确的正统出身，是后续一切质量控制活动的基础。接收时先确认来源与身份证明是否齐全，而非菌株长势。《标准菌株管理规范》落地精讲04/30菌株层级三级菌株层级体系标准菌株溯源基准传代1次标准储备菌株储备留存再传代工作菌株日常实验储备菌株标准储备菌株转接后获得的同种菌株工作菌株4代以内转接获得，直接用于日常实验用途边界不可逾越标准储备菌株不得直接用于日常检测接种工作菌株不能反过来替代标准菌株《标准菌株管理规范》落地精讲05/30法规依据核心法规依据总览标准菌株管理受多部法规共同约束，三项依据各有侧重：01GB/T27405—2026食品微生物检测领域核心依据附录C

专门规定标准菌株使用流程。02WS/T900—20262026年12月1日施行病原微生物保藏质量控制通用标准，覆盖接收、鉴定、保存、复苏、销毁全环节。03CNAS-CL01-A001:2022认可评审直接依据微生物检测实验室认可评审的直接依据，对管理能力提出更高要求。《标准菌株管理规范》落地精讲06/30应用场景标准菌株的四大用途01培养基验收用标准菌株测试每批培养基，验收结论才可信。02方法确认验证数据以标准菌株为基准，菌株异常则数据失真。03阴阳对照阳性、阴性对照依赖标准菌株，否则形同虚设。04人员考核培训考核以标准菌株操作作为能力标尺。标准菌株是检测结果的“标尺”。《标准菌株管理规范》落地精讲07/30全生命周期管理·第一道关口来源可追溯与COA归档采购红线第一步·源头只从获认可的保种机构获取，严禁来源不明菌株——变异或污染风险直接冲击检测准确性。01COA归档第二步·归档索取并保存菌株证明文件，记录编号、名称、代次、保存条件，作为后续管理动作的起点。02接收核验第三步·核验核对COA与实物标签一致性，录入接收日期、接收人至台账，确保每支菌株可回溯至源头。03《标准菌株管理规范》落地精讲08/30全流程条款精讲条款是操作的依据02接收环节·条款精讲采购与验收要点01申请记录采购申请须写明菌株名称、来源、代数、数量，保证下单有据可查。02到货验收核对名称、规格、数量、包装完整性、有效期、说明书与证书。冻干菌种查安瓿是否破损，冷冻菌种确认无解冻痕迹。03拒收红线不得使用包装泄漏或已过有效期的菌株一律不得使用。04验收后处理双人核对·备案合格菌株管上贴标签，注明菌种名称、代号、代次、接收日期、接收人与贮存条件。致病性菌种须双人核对并备案。《标准菌株管理规范》落地精讲10/30条款精讲首次活化的规范操作起点保藏机构冻干菌种或冷冻管为

第0代，首次活化即制备

第1代

储备菌株。操作前新购菌种与灭菌斜面室温平衡约

30分钟，避免温差冷凝水污染。操作中生物安全柜内、佩戴无菌手套；安瓿外表面用

75%酒精

擦拭后开启，无菌加入适量液体培养基溶解，转接非选择性培养基，置适宜温度培养。操作后挑取单菌落纯化，确认无杂菌，再制备储备菌株冷冻保存。《标准菌株管理规范》落地精讲11/30条款精讲传代次数是硬底线0第0代保藏机构获得株首次活化1第1代活化冷冻保存株转种一次计一代2–4第2–4代工作菌株使用窗口超过即为违规5第5代严禁超过1代次起点保藏机构获得株即为

第0代；首次活化冷冻保存株计为第1代。2使用窗口工作菌株取

第2–4代，严禁超过5代。3计数规则凡转种一次，即计一代。超限后果：特性不可控→结果无法规可信度长期过度传代可致变异、毒力下降、生化特性改变，肉眼不可见，却直接影响培养基适用性判断与检验结论。《标准菌株管理规范》落地精讲12/30代次管理代次记录的规范写法F1代次必须落到编号禁止模糊表述每次传代用

F1、F2、F3

分别代表第1、2、3代，禁止只写“传过一次”这类模糊表述。02编号要能追溯母株来源可查每支保存管设唯一编号，编号信息应反映来源与传代关系——由某支储备菌株传代而来的工作菌株，其编号须能追溯到母株。清晰的代次记录是防止超代使用的第一道防线，也是审核时证明菌株处于可控代次范围内的关键证据。《标准菌株管理规范》落地精讲13/30条款精讲传代后的确认试验确认目的证明传代后菌株特性未发生改变双重确认01纯度检查革兰氏染色、菌落形态与边缘特征，确认无杂菌污染02生化检查关键生化反应与标准特征一致03放行条件纯度与生化均合格，该代菌株方可投入使用04异常处置菌落形态异常、染色可疑或有杂菌生长→停止使用，重新制备或申请新标准菌株，不得侥幸继续使用《标准菌株管理规范》落地精讲14/30保存方法保存方法之一：磁珠冻存管01适用场景-80℃长期保存，使用方便。超低温下微生物代谢基本停止，显著降低遗传变异风险。02操作要点新鲜菌液与保护剂混合后分装，每管体积不宜过大确保磁珠充分吸附菌体标签用耐低温材质，保存盒外标注菌种信息03纯度底线源头管控储备菌株是后续所有工作菌株的源头，制备时务必保证纯度合格——任何污染隐患在冻存状态下都会被长期锁定。《标准菌株管理规范》落地精讲15/30条款精讲保存方法之二：甘油管与半固体穿刺甘油管长期保存保护剂20%–30%

甘油作保护剂适用条件适用

-80℃

或

-20℃

长期保存液体培养40%

甘油与菌液

1:1

混合，终浓度达

20%半固体穿刺仅限短期适用范围仅限短期保存保存期限1–2

个月保存温度2–8℃禁止反复冻融、解冻后再冻每次从同一支冷冻储备管取用，剩余不得再次冷冻选对方式，才能保住菌株活性《标准菌株管理规范》落地精讲16/30条款精讲斜面保存的适用边界01操作简便，但只是短期方案斜面传代无需特殊设备，一般保存

3至6个月。02移接周期因菌种而异放线菌·4–6℃3

个月移接一次酵母菌4–6

个月移接一次霉菌6

个月移接一次03两类典型风险培养基干枯菌体自溶与基因突变04铜绿假单胞菌是审核点名项不宜低温斜面保存，4℃

下可能自溶。斜面只适合短期常用菌株，不能长期保藏。《标准菌株管理规范》落地精讲17/30条款精讲使用边界不能混淆用途分工日常检测用工作菌株；方法验证与培养基验收用标准储备菌株，必要时用标准菌株。工作菌株不能替代标准菌株；标准菌株的商业衍生物仅能作为工作菌株。冻存禁令冷冻菌株解冻转种后，不得再次冷冻，也不得作为储备菌株使用。如需再次保存，必须从原始标准储备菌株重新制备。解冻即用、用完即弃《标准菌株管理规范》落地精讲18/30销毁管理销毁的触发条件触发销毁老化、污染、变异，经确认试验证明不符合使用要求强制销毁超传代限度、鉴定检查不合格继续留用→实验结果错误、交叉污染，拖垮整室检测质量高压灭菌销毁，专人执行并记录，防止误用与扩散《标准菌株管理规范》落地精讲19/30销毁管理销毁记录六要素六要素缺一不可——少一项，销毁动作即不可追溯。1菌株名称2编号3销毁原因4销毁方式5销毁日期6操作人与复核人《标准菌株管理规范》落地精讲20/30不合格菌种先申报后销毁重点超传代限度或鉴定不合格的菌种，须由技术负责人申报、批准后销毁，技术负责人与质量负责人共同执行、共同签字。一线执行要求逐项填写记录，确保每一支被销毁的菌株都有据可查。日常操作合规要点操作是合规的落点03制度要求双人双锁与专人保管双人双锁负责制核心要求标准菌株保藏与领用实行双人双锁管理，采购菌株须单独锁存于专用冰箱。人员与交接日常领用领用须登记记录，用后及时归还锁存；不得将菌株随意放置在实验台面或个人抽屉中。双人双锁，锁住的是单人独断的风险《标准菌株管理规范》落地精讲22/30两人均须受过专业培训，具备足够菌株保存经验保管人员变动时，严格办理交接手续，清点菌株数量与状态条款精讲培养基验收中的菌株使用依据CNAS条款，每批培养基均须经标准菌株功能验证合格后，方可投入使用。验收对象覆盖全部批次每批培养基，含即用型与商品化脱水合成培养基。验证要求逐批测试逐批以标准菌株测试促生长能力；含指示剂或选择剂的培养基，须另用能证明其指示或选择作用的菌株试验。记录要点先验证后使用按批次记录接种结果、培养条件与判断结论，确保投入使用前均完成功能验证。《标准菌株管理规范》落地精讲23/30条款精讲生物安全柜内操作规范01操作前置室温平衡约30分钟菌株复苏、传代与接种均在生物安全柜内完成；新购菌种与灭菌斜面先室温平衡约

30分钟，避免温差冷凝水污染。02人员防护穿专用洁净服，戴无菌手套，必要时佩戴口罩。03接种要点不得重复使用接种环灼烧至红热、冷却后再取菌，避免划破培养基表面；一次性接种环用后弃入废液缸，不得重复使用。保持柜内气流稳定、台面整洁，是防止菌株间交叉污染的第一道物理屏障。《标准菌株管理规范》落地精讲24/30设备管理冰箱温度监控与记录2–8℃冰箱2–8℃标准菌株保存温度区间标准菌株单独锁存，避免与其他样品混放每周至少一次·检查并记录温度超低温冰箱-70℃以下稳定运行温度要求温度需稳定在-70℃以下，保障菌株长期保存状态每日记录·温度异常处置温度波动异常时，立即将菌株转移至备用设备，并评估已保存菌株的活性是否受影响。温度记录不是走过场——每一次异常波动的记录与处置痕迹，都是审核时证明保存条件受控的关键证据。《标准菌株管理规范》落地精讲25/30条款精讲菌株编号与台账管理01唯一编号每支保存管用签字笔标注唯一编号，编号须能反映来源与传代关系。02台账六要素来源、传代、保存方法、使用记录、使用原因、高压灭菌记录。03全生命周期留痕领用、复苏、传代、销毁，每次动作都须在台账中留下痕迹。一线常见问题专注手上操作，忽略同步记录底线要求来源可追溯、状态可确认、使用可复核《标准菌株管理规范》落地精讲26/30记录归档档案留存期限要求6

年留存不少于6年接收、传代、使用、销毁记录全部归档，审核可随时调取核查。接收传代使用销毁书写与更正使用不易褪色书写工具，字迹清晰、无涂改确需更正：划改+修改人签字确认禁止涂改留存目的仅为应对检查质量争议时回溯事实、厘清责任的根本依据证据价值《标准菌株管理规范》落地精讲27/30风险防控与持续改进防控是质