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文档简介

1、二月花药培养。1.被子植物的定义:任何种子被果皮覆盖,胚珠被子房壁覆盖的植物称为被子植物。1.被子植物和裸子植物。2.裸子植物的定义:任何胚珠裸露,外表面没有子房壁覆盖的植物称为裸子植物。例如:玉米、大豆、梨和杏。例如:松树,杉木,柏树。嘿。嘿。3,花卉结构,花梗,花托,萼片,花瓣,雌蕊和雄蕊。4,花的功能,被子植物有性生殖发生在花中,雌蕊和雄蕊是有性生殖的主要部分,2,被子植物花粉的形成,1,雄蕊结构,雄蕊:2,花药结构,3、花药发育,外周细胞(初生壁细胞),外层:在药室内壁有较大体积:一层或多层细胞:绒毡层,分裂,造孢细胞,造孢细胞,花粉母细胞(小孢子母细胞),有丝分裂,花粉是由小孢子母细

2、胞减数分裂形成的,因此,花粉是单倍体生殖细胞。被子植物的花粉发育。花粉粒的形成,1。经历时期:在四分体阶段,单核阶段,双核阶段,两个精子和一个营养核的基因型相同,(3)花粉粒类型。成熟花粉粒是雄配子体,有两种情况:双核花粉粒:的成熟花粉粒只含有花粉管核和生殖核。(精子在花粉管中形成),三核花粉粒一些植物的花粉在成熟前,生殖细胞经历有丝分裂形成两个精子。这种花粉成熟时含有一个营养核和两个精子。被子植物胚囊的形成,1。雌蕊组成,柱头,花柱,子房,2。被子植物的子房结构,胚珠的结构,花粉管,精子,卵细胞,极核,子房壁,珠被,珠孔,子房,胚珠的外层是珠被,内层是胚囊。胚囊由胚珠中的胚囊母细胞(大孢子母

3、细胞)发育而来。胚囊母细胞经历减数分裂并产生四个细胞,称为大孢子。与胚囊母细胞相比,每个大孢子的染色体数目减少了一半。这四个细胞排成一行,其中珠孔附近的3个细胞退化,最里面的发育成胚囊细胞。胚囊细胞核连续经历三次有丝分裂,但每次核分裂后,细胞质分裂不继,形成8核胚囊。起初,这8个细胞核位于胚囊的两端,每端4个。然后,两端各有一个细胞核移动到胚囊的中心,即极核,所以胚囊中8个细胞核的遗传物质是相同的。3.卵细胞的形成,珠孔端附近的3个细胞核发育成3个细胞,其中最大的一个是卵细胞,其余为2个辅助细胞,另一端的3个细胞核也发育成3个细胞,成为对足细胞。花粉落在雌蕊柱头上后,在柱头粘液的刺激下,花粉开

4、始萌发并形成花粉管,花粉管沿着花柱向胚珠方向生长。到达胚珠后,它从珠孔绕过卵细胞进入胚囊,到达卵细胞和胚囊中的极核之间。这时,花粉管的前端破裂,两个精子被释放。一个精子与两个极核结合形成受精卵,另一个精子与卵细胞结合形成受精卵。这是被子植物中独特的双受精现象。4.受精过程,嘿。5。发展成果,4。产生花粉植物的两种方法,5.影响花药培养的因素,1。不同植物的材料选择、花药接种时期和诱导成功率有很大差异。对于同一株植物,亲本的生理状况也直接影响诱导成功率。选择的成功是花药培养成功的关键。1.材料的选择,2.选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的一个重要因素,因为花粉在任何时期都不可能培养产生愈伤

5、组织或胚状体,并且在花粉发育过程中只有一定时期对体外刺激敏感。一般来说,在单核期,花药培养的成功率在细胞核从细胞中心向一侧移动时最高。也就是说,最适合花药培养的小孢子发育阶段是单核并排阶段。选择单核期前的花药接种,质地柔软,易破碎。单核期后花药接种时,花瓣变得有些松散,给材料消毒带来困难,单核期花药难以选择。(3)花药培养时期的选择,(4)其它时期选择的缺点,(7)花药培养时间。为了在单核期选择花药,通常选择不完全开放的芽。开花或稍开的花不应作为实验材料。(6)选择完全未开放的花蕾的原因。对于完全未开放的花蕾,可以选择单核期的花药,细菌少,易于消毒。(5)可以选择单核期的花药。月季花药培养时间

6、一般选择在5月初至5月中旬,即月季的初花期。开花初期花蕾的营养状态和生理状态会更好,这可能会提高花粉诱导的成功率。例如,月季花药材栽培中的花粉粒优选为()A、四分体B、单核中期C、单核侧生D、双核或三核花粉粒。培养基:花药培养基中使用的培养基可能因植物而异。小麦培养基为N6,马铃薯和玫瑰培养基为MS,油菜培养基为B5。3.其他因素如亲本植物的生长条件、材料的低温预处理和接种密度等都对诱导的成功有一定的影响。6.实验操作:(1)材料选择;2)有些植物的花粉核不易着色,应采用烘烤菁铬矾的方法,将花粉核染成蓝黑色。(1)最常用的方法是醋酸品红法,(1)染色方法,(1)醋酸品红法的染色机理。乙酸品红是

7、一种碱性染料,而花粉细胞有染色体,其主要成分是DNA和蛋白质,它们很容易被碱性染料染成红色。将100毫升体积分数为45%的乙酸煮沸,缓慢加入1g品红,加热回流8h,冷却至50,过滤。(2)乙酸品红的分配,(2)乙酸品红法,(3)将花药置于载玻片上,加入1%乙酸品红液滴,用镊子柄捣碎花药,盖上盖玻片,显微镜下观察。(3)染色操作,(3)焙烧菁铬钒法,将无水乙醇和冰醋酸按体积比31混合,(1)卡诺定色剂的制备方法,(1)将花药固定在卡诺定色剂中20min,然后取出放在载玻片上,加入焙烧菁铬钒溶液染色,盖上玻璃,显微镜下观察。将5克铬明矾K2SO4Cr2(SO4)24H2O加入90毫升蒸馏水中,溶解

8、,加入0.1克烘青,混合均匀,加热至沸腾,煮沸5分钟,冷却至室温,过滤,加入蒸馏水至恒量至100毫升。(2)烘烤菁铬钒溶液的制备方法,(3)染色操作,(2)材料消毒,(1)酒精处理,(1)将花蕾用70%酒精浸泡30秒后立即取出。(2)无菌水清洗,(3)无菌吸水纸吸收花蕾表面的水分,(2)消毒处理,(1)放入0.1%氯化汞溶液(或1%次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)中2-4分钟,(2)无菌水冲洗3-5次进行花药培养,其中大部分实际上是未成熟的。由于花蕾的外表面受到花萼、花瓣或颖片的保护,所以通常是无菌的,所以只需对整个花蕾或幼穗进行消毒。在无菌条件下除去萼片和花瓣,用镊子取出花药,完全除去花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,立即将花药接种在培养基上,通常每瓶7-10个花药。(1)剥花药,(1)不损伤花药,避免诱导非花粉愈伤组织,(2)接种,注意:(3)接种培养,(1)培养条件:温度控制在25左右,不需要光照。只有在幼苗形成后才需要光。(3)培养,(2)培养:培养20-30天后,花药开裂,愈伤组织生长或胚状体释放,愈伤组织及时转移到分化培养基中,进一步分化再生植株。(3)注意:如果胚状体从花药开裂中释放出来,一个花

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