细菌菌落总数检测常见误差原因分析

1、细菌总数监测常见错误分析细菌群体的总数是水源地和地面废水取样必须做的一个指标。殖民地总数检查和其他检查一样，也有检查误差。板块计数法是细菌总数的共同方法之一，所以这个值是否正确直接关系到水质的好坏。微生物板数的通常方法是每个样品使用3个稀释度，每个稀释度经常重复3个。但是，平板集落准确的计算方法、三种稀释度对任何稀释度的计算以及微生物检测容限等，并没有在与统计值准确性密切相关的饲料标准中说明。我们和大家讨论了在Bacillus实际检查过程中发生的殖民地数量问题。1材料和方法1.1测试材料1.1.1样品：随机提取微生物饲料添加剂synbion样品3份。1.1.2徽章：营养琼脂。1.1.3仪器设备

2、：磁力搅拌器、无菌培养皿、培养箱、振荡器。1.2测试方法1.2.1样品振动时间对细菌数检测的影响选择10 g，无菌锥形瓶，90毫升免息热水，磁搅拌l0，20，30，40，60 rain的一个样品。用1 mL皮液窗将1 mL的样品悬浮液放入包含9 mL去离子水的试管，用振荡器充分均匀样品等10 1 1o 1的稀释度不同的样品溶液制作。用图版涂层法检测细菌含量：用吸管从样品稀释液中各拉200 L，每样品重复3个稀释液。在35-37cc孵化器中倒立，培养24 h。1.2.2检测方法对细菌数检测的影响每个样品取l0 g，放入灭菌锥形瓶内，放入90 mL无温水，磁力搅拌各为40 rain。10 l0稀释

3、度不同的样品溶液稀释。用板棉法检测细菌含量：用吸管从每个平行样品的相应稀释液中各拉1毫升，每样品重复3次稀释剂，然后将板片倒置35 37(2培养箱)，直到培养基表面干燥，培养24 h。扁平涂层测试细菌含量：使用吸管从每个平行样品的相应稀释液中分别拉出200 L涂层板，每个样品重复3种稀释剂。在35 37孵化器中倒置板，培养24 h。2结果2.1样品的振动时间对细菌数测试结果的影响利用细菌平板计数法，不同振动时间对益生菌中芽孢杆菌的检测结果见表1。从表l可以看出，在不同振动时间获得的细菌种群数量有很大差异。总的来说，随着一段时间内振动时间的延长，有效细菌含量的增加，表明细菌在载体上进行分析需要一

4、定的时间。振动时间为40 rain的产品细菌含量基本稳定。使用适当的振动时间，才能更准确地显示产品的有效细菌含量。表1冲击时间对有效细菌含量结果的影响/_。cfu/g冲击时间对有效菌落含量结果的影响冲击时间10分钟20分钟30分钟40分钟60分钟含有细菌量2610.215143分析和讨论3.1试样状态对结果的影响取样时消毒样品取样端口和取样工具，防止样品交叉污染。3.2样品均匀化对结果的影响固体样品应充分均匀，如匀浆机或玻璃珠等，也可以将吐温80和液体石蜡等1的稀释液添加到稀释液中，以确保样品的完全均匀性。在测定孢子生菌数时，根据振动时间得到的细菌种群数量差异很大。这是因为细菌在载体上进行分析

5、，在溶液中均匀分布需要一定的时间，要测试的样品必须在振荡器中充分振动，因此孢子在正在测试的溶液中充分均匀分布，有助于避免由于病原体未完全释放而产生的低细菌含量。3.3考试期间驾驶方法的影响添加采样l mL时，请使用1 mL的吸管，每次创建每次稀释时都要更换一个吸管。否则，稀释度之间的集落数误差超过10%，表示存在工作误差。使用吸管向扁平的盘子添加样品，盘子的开口应小，吸管直立，样品结束后接触碟子的底部，以确保样品体积小。使用板法时，一般要及时浇20分钟以下f 10分钟以内的琼脂。最好不要在琼脂上洗手(约45)。否则会杀死细菌，即使太热，冷水也太多，会影响细菌的生长。放入琼脂，要及时摇动，先向一

6、个方向旋转，然后向另一个方向旋转。这将减少殖民地的凝聚力和连续性现象。另外，为了防止琼脂溅到 il壁和肌肉盖上，用力计算结果是正确的。一旦琼脂凝固。琼脂凝固后，应及时培养孵化器，反过来培养。用涂层板方法测试，放置适当的时间后，立即将盘子翻转，然后为了培养而培养，为了防止发生菌落扩散，很难计数。为了正确的结果，与琼脂的空白对照组一起比较种群数量的整个过程。3.4殖民地计算错误菌落数在培养完成后应立即执行，防止菌落继续生长，影响测量结果。在培养基中添加TrC f氯化四唑，细菌菌落呈红色，可以区分相同颗粒和絮凝(白色)，提高菌落数的准确性。有些学者认为，在100毫升培养基中添加2-3毫升TTC可以使机体着色，不抑制细菌的生长。计算殖民地数量时，要两个人分别使用殖民地计数器，计算总群数，将群数报告为两个人的平均值。通常，包含20-200个殖民地的每个板块稀释度的细菌含量与实际结果最接近，大于200个/盘子或小于2O/盘子的系数结果可能与实际有很大差异。因此，应尽可能选择20-200个/盘子的稀释度，计算孢子数，确保菌落数的效果。报告结果必须遵守国家标准中计算殖民地数量的方法。4摘要殖民地数检测错误可能发生在多个方面。实验研究表明，除了测试环境和徽章外，误差主要来自样品及检验工作过程，还包括检验准备过程。一般