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文档简介
1、.1,Bio-Rad数字微滴PCR(ddPCR ),2,1,ddPCR是什么2,ddPCR的发展3,ddPCR的操作流程4,ddPCR的应用,3,1,ddPCR是什么,ddPCR是新型的绝对量PCR,其特征是灵敏度高微滴数字PCR的原理是将原来的整个管的PCR反应液分散在数万个,甚至数百万个极微小的液滴中。 这些微滴通过同时进行PCR反应,可以计算原来的反应液中有多少目标基因的拷贝。 4,2,ddPCR的发展,1999年以数字PCR的名字发表,2011年末数字PCR被商业化,一部分公司也在这个时期诞生了。 2012年Nature就数字PCR给科学研究临床带来的变化和服务进行了综述。5、普通的P
2、CR、荧光定量PCR、ddPCR、1、定量方式是绝对的定量方式2.PCR的扩增效率和他对PCR抑制剂的要求都比第二代PCR低3 .不需要任何标准品4 .实验结果中,精度、灵敏度和再现性的本质提高。 ddPCR操作流程、7、8、9、4、ddPCR应用、1、基因表达量测定; 2、肿瘤检查(肿瘤突变序列、肿瘤拷贝数突变的检查; 3、第二代定序和第二代定序的QC;10,1、基因表达检测、基因表达检测,目前应用最广泛的是荧光定量PCR。 但是,有很多缺点:首先制作一个标准曲线,然后取得各样品,包括对照组、样品组所有基因的CT值。 在低复印的情况下,我们在进行多板分析时,要进行板间的质量控制,纠正不同板和板的技术误差。 ddPCR可以避免这些缺点。11、2、肿瘤检查(肿瘤突变序列,肿瘤拷贝数突变检查;12、3、二代定序和二代定序QC; 1)Illumina平台,13,14,2,2)iontorrent平台,15,16,17,18,19,20,谢谢,21,22,23,24,25,26,27,20 29、30、31、32、3
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