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文档简介

1、。植物组织培养综述(练习)一、名词解释愈伤组织:一组在培养基上无序生长且没有明确结构的薄壁细胞。外植体:取自植物体的组织或器官的一部分,用于组织培养中的体外培养。去分化:通过体外培养从高度分化的植物器官、组织或细胞中产生愈伤组织的过程。半连续培养:在培养罐中培养大量细胞的方法。克隆变异:任何形式的细胞培养产生的植物差异。胚状体:在胚胎发生和体外植物细胞、组织或器官培养过程中,由一个或多个体细胞形成的类似合子胚的结构。护理培养:使用相同或不同材料的愈伤组织作为护理组织培养细胞的方法。无融合生殖:由卵囊中的卵细胞以外的细胞发育而来的单倍体植物。种质:通过生殖细胞的活细胞直接从父母传给后代的遗传物质

2、,它决定了固有的生物学特征。悬浮培养:在液体培养基中,根据一定的细胞密度,在不断的提拉或摇动下,培养游离植物单细胞或小细胞团的一种方法。早熟发芽:培养后迅速发芽成苗,不会像胚胎一样继续生长,超过正常发育阶段。选择压力:在两个相对性状之间,一个性状被选择存活的优势。细胞全能性:任何具有完整细胞核的植物细胞都具有所有遗传信息,并且在一定条件下,它具有分化和发育成完整植物的潜力。条件培养基:将高密度细胞加入培养装置中进行培养。一段时间后,这些细胞分泌一些促进细胞生长的活性物质到培养基中,这使得培养基有条件并导致在合成培养基上不能分裂的细胞分裂。离体授粉:将未授粉的胚珠、子房或柱头从母体中分离出来,进

3、行无菌培养,并以一定方式给予无菌花粉以实现体外受精的技术。同步培养:培养基中的大多数细胞可以同时通过细胞周期的所有阶段。平板种植率:(每个平板上形成的细胞簇数/每个平板上接种的细胞总数)* 100%,继代培养:通过更换新鲜培养基和连续切割分离进行连续多代培养。克隆:由任何形式的细胞培养产生的植物。细胞融合:在自发或人工诱导下,两种不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂交细胞。第二,填空1.根据外植体的不同类型,组织培养可分为五种类型:组织培养、细胞培养、器官培养、原生质体培养和胚胎培养。根据培养基的物理性质,组织培养可分为两种类型:固体培养基和液体培养基。2.对于在高温高压下易降解变质的物质

4、,灭菌时应采用过滤灭菌法。3.在植物组织培养过程中,细胞分裂素与生长素的比值(CTK/生长素)决定了器官的分化类型。高比例有利于芽,低比例有利于根,等比例有利于愈伤组织的形成。4.在细胞悬浮培养过程中,细胞生长周期呈“S”曲线,可分为5个阶段,即滞后期、对数期、线性期、缓慢期和静止期。5.酒精和氯化汞是两种常用的外植体表面消毒剂,其浓度分别为70-75%和0.1-1%。消毒时间分别为0.2-2分钟和2-15分钟。6.单细胞培养有四种方法:平板培养、护理培养、微室培养和条件培养基培养。7.在细胞悬浮培养中,实现培养细胞同步化的方法包括饥饿和抑制。8.实现细胞全能性的条件是组织或器官的分离和必需营

5、养的给予。9.通常用于诱导愈伤组织的植物激素是2,4-D10.用于茎尖脱毒的外植体大小一般为0.1 0.25毫米11.在低温保存中,二甲基亚砜通常是对植物材料危害最小的保护剂。12.支持植物组织培养技术的两种重要模式是培养基模式和激素调节模式。13.无病毒植物的鉴定方法主要有直接测定法、指示植物法、抗血清鉴定法、核酸分析法和电镜显微检测法等。14.TTC,美国食品和药物管理局和伊万蓝染色方法被用来确定细胞活力。15.单倍体植株可以通过体外培养从花粉和未受精的胚珠中获得。16.用于茎尖脱毒的外植体的大小通常小于0.3毫米17.在离体快速繁殖中,有器官型和短枝型遗传类型,遗传性状稳定。18.典型的

6、人工种子由体细胞胚、人工胚乳和人工种皮组成。19.原生质体分离纯化过程中应加入渗透压稳定剂和原生质膜稳定剂,以提高原生质体产量和活力。葡聚糖硫酸钾和氯化钙是膜稳定剂。20.根据不同植物的生长发育特点,快速繁殖可分为短株型、器官发生型、胚胎发生型和原球茎型。21.碳源在组织培养中的主要作用是合成有机物和维持适当的渗透压。22.目前,细胞融合主要有两种方法:自发融合和诱导融合。23.原生质体纯化方法包括沉降法、悬浮法和界面法。24.悬浮培养中细胞生长的测量方法:细胞计数、细胞紧密体积(PCV)、总细胞体积、新鲜和干燥细胞重量以及细胞有丝分裂指数。25.振荡培养的目的是提高液体培养基中培养物的通气性

7、。26.单倍体育种具有缩短育种年限和避免后代性状分离的主要优点。27.通常用于诱导胡萝卜胚性愈伤组织的植物激素是生长素,细胞分裂素促进胚状体的形成。28.在组织培养的历史中,Steward在1958年报道了胡萝卜细胞悬浮培养。梅尔彻斯在1978年报道了马铃薯和番茄的融合培养。烹饪在1960年报道了诱导鸡红细胞和酵母细胞的融合培养。29.在胚乳培养中,由裸子植物胚乳发育而来的植物是单倍体。被子植物胚乳发育而来的植物是三倍体。30.组织培养中的突变可分为体细胞无性系变异和施加选择性压力(化学物质)诱导的变异。三、单一话题1.通常用于诱导愈伤组织的植物激素是(B)。ZT国际律师协会2.当通过物理方法

8、诱导原生质体融合时,以下哪种方法不包括在(c)中。一种电刺激b微操作c多化合物d振荡3.用于茎尖脱毒的外植体大小一般为(A)0.2 0.3毫米B 0.5毫米C 0.5 1毫米D 10mm毫米4.下列哪一种物质具有抑制用于通过酶水解分离原生质体的分离溶液中核糖核酸酶(D)的作用。右旋糖酐硫酸钾氯化钙甘露醇硫酸镁5.在冷冻保存中,对植物材料造成最小损害的保护剂通常是(A)。二甲基亚砜,氯化钙,甘露醇,脯氨酸四、简答题(作文题)1.植物离体快速繁殖的方法有哪些?回答:1。无菌母株的制备。次生芽的增殖。芽苗的生根培养。再生根的锻炼和移植2.去除植物病毒的方法有哪些?为什么茎尖分生组织培养可以去除植物病

9、毒?回答:1。脱毒茎尖培养2。解毒热处理。解毒愈伤组织。用于解毒的微克。脱毒珠心培养。化学疗法3.糖在未成熟胚培养中的生理功能?答:(1)调节培养基的渗透压(2)作为碳源和能源(3)防止未成熟胚的早期发育4.单细胞分离的方法有哪些?每种方法的优缺点是什么?答:机械方法;酶水解;从培养的愈伤组织中分离单细胞机械方法:优点:1。细胞不受酶的伤害;2.肿块器官没有分离;缺点:1。材料要求是组织排列松散的薄壁细胞。低产量酶解:优点:可以获得相对均匀的海绵组织或栅栏组织细胞缺点g5.比较机械法和酶法原生质体分离的优缺点。机械方法:优点:可以避免酶制剂对原生质的一些损伤。缺点:获得的原生质较少,产生的原生

10、质细胞类型有限。通常,该材料限于具有大液泡化程度的细胞或伸长的细胞组织。酶解:优点:可以获得大量原生质体,适用于几乎所有的植物和器官。双子叶植物叶肉细胞比单子叶植物更容易分离。缺点:酶制剂含有核酸酶、蛋白酶、过氧化物酶和酚类物质,会影响原生质体的活力。6.简述细胞培养的应用。一、天然化合物的生产和特化:(1)植物次生代谢产物的生产,(2)特定的生物转化反应,(3)细胞的工业化生产,(2)突变体选择,(1)直接选择,(2)间接选择,和(3)多倍体诱导7.简述悬浮培养中实现细胞同步化的两种主要方法:(1)饥饿法(2)抑制法单倍体育种的优势是什么?(1)良好的遗传研究材料(2)加快育苗进程(3)提高

11、育种效率(4)突变体选择,单倍体植物基因表达不受屏蔽,由基因型决定的表型可以充分显示(5)遗传转化受体,保证外源基因的稳定遗传,大大提高遗传转化率(6)当使用单倍体育种时,培养的品种被纯化以纯化基因型杂交品种。9.原生质体培养的意义。(1)相对容易吸收外来遗传物质。通过研究植物原生质体培养和植株再生技术,采用细胞基因工程培育新品种是可能的。(2)有利于细胞融合形成杂交细胞,可广泛重组植物界的优良遗传性状,创造新品种。(3)原生质体可以作为遗传理论研究的材料。10.细胞培养的工业应用是什么?(1)高产细胞系的选择(2)种子培养(3)大规模培养11、在原生质体分离纯化过程中,哪些因素影响原生质体的

12、活力和数量?(1)光照:一般情况下,在黑暗和静态条件下进行。(2)温度:酶解温度25-30,考虑原生质体稳定性和酶活性(3)时间:几个小时或几十个小时,太长的时间影响原生质活力,一般少于24小时(4)细胞壁降解酶的类型和组合(5)渗透压稳定性的类型(6)原生质膜稳定剂(7)酸碱度效应12.简要描述体外授粉的主要方法?(1)离体柱头授粉(2)离体子房授粉(3)离体胚珠授粉13.请简要说明试管苗移栽不容易成活的原因。(1)根结构不完善,不生根,根与芽之间传导不畅(愈伤组织),再生根吸收功能差;(2)叶片结构不完善,缺少角质层和蜡质层,保水性差,缺少叶表皮,保水性差,光反射差,气孔开度大,关闭能力差

13、,叶片栅栏组织发育不完善,结合能力低。14.种质保存的意义是什么?(1)占用空间少,节省人力、物力和土地;(2)有利于国际种质交流和濒危物种的抢救和快速繁殖。(3)必要时,可采用体外培养方法快速大量繁殖;(4)避免自然灾害造成的种质损失。15.总结花粉培养在育种中的应用?(1)单倍体育种;(2)将二倍体植株加倍为四倍体或倍数较高的多倍体可以提高原植株的某些经济性状;(3)将异花授粉作物(如玉米)的单倍体植株加倍,可以快速获得自交系,省去了繁琐的人工自交过程,节省了大量的时间和人力;(4)消除显性和隐性基因干扰有利于突变体的选择16.植物子房授粉的意义是什么?在离体条件下,将不育花粉直接导入子房

14、,使花粉粒在子房中萌发,完成受精,获得有活力的种子发育,从而克服柱头或花柱授粉的不亲和性障碍。17.茎尖脱毒的理论基础是什么?(1)茎尖由分生组织和细胞间隙组成(2)分生组织需要消耗大量能量来进行主动分裂和增殖。新陈代谢强,能抑制病毒复制;(3)茎尖和根尖内源激素浓度很高,抑制病毒复制。18.总结胚乳培养的意义?(1)获得三倍体幼苗和植物:不利于以种子生产为目的的植物;然而,有时旨在营养生产的无籽水果和植物具有重要的经济价值。如苹果、香蕉、桑树、西瓜、甜菜、茶叶和一些花。(2)胚乳植物的染色体不稳定性为染色体工程研究提供了有效途径。(染色体不稳定性的原因和变化)(3)为研究淀粉、蛋白质和脂肪的

15、生物合成和代谢提供了一个良好的实验系统。19.大规模植物细胞培养和二次生产的前景如何?为什么?利用植物细胞培养生产代谢产物具有非常广阔的前景。目前,许多化合物是通过植物细胞培养产生的,包括糖、酚类、脂类、蛋白质、核酸、初级和次级代谢产物如萜类和生物碱。植物细胞培养的应用主要包括以下三个方面:(1)有用物质(次级代谢物)的生产;(2)植物克隆的快速繁殖和遗传突变体的选择;(3)深入研究植物细胞遗传学、生理学、生物化学和病毒。通过植物细胞培养生产药用成分已经取得了很大进展。目前已研究的植物有400多种,可产生600多种成分,其中相当一部分具有药用价值,如紫草细胞培养产生的紫草素、人参细胞培养产生的

16、人参皂苷和黄连细胞培养产生的小檗碱。20.描述体外受精的类型及其意义。类型:胚珠授粉,子房授粉,柱头授粉。含义:克服远缘杂交受精前的障碍,获得可育种子。21.讨论植物的快速繁殖过程。(1)无菌母株的制备:第一代培养,在性状优良、稳定、生长健壮、无病虫害的植株上选择外植体,经过适当的贮藏和灭菌处理后,接种在培养基上,诱导外植体产生芽和愈伤组织。(2)二次芽增殖:将不育的母株再次切割进行二次培养,芽分化增殖成丛生芽,加快繁殖速度(3)芽的生根培养:诱导无根苗生根的方法:A.试管生根:将无菌小枝转入生根培养基中培养;B.试管外生根:一些植物可以在基部切口处涂上用IBA混合生根粉和滑石粉在试管内形成的枝条,然后在温室或田间种植,从而大大降低了成本。(4)再生根的锻炼和移植A.冲洗幼苗根系周围的培养基,避免有害生物的污染b .筛选合适的移栽基质,并选择保水性和透气性较好的基质选择使用营养盆、苗床和遮阳网来控制光线、温度和湿度移植前后培养条件发生了变化22、论述了清除植物病毒的方法和原理。(1)热处理解毒;原则:1.有些病毒受热后不稳定。高温使这些病毒失去活性,可以部分或完全钝化2.病毒进入植物细胞后,会与植物细胞的DNA一起复制。在病毒活性被热处理灭活后,病毒在植物中的增殖会减慢或停止,从而丧失感染能力。3.在高温下,一方面病毒不能产生

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