体细胞免疫治疗联合肿瘤常规治疗的基本原则(一)

1、Sun Yat-sen大学肿瘤控制中心夏建川。2，1，肿瘤体细胞免疫治疗，通过输入肿瘤患者具有抗肿瘤活性的免疫细胞(包括特异性或非特异性)，直接杀死肿瘤细胞或刺激身体的抗肿瘤免疫反应，达到肿瘤治疗的目的，这个过程称为体细胞免疫治疗。很多研究结果表明癌症患者外周血中存在癌细胞是导致肿瘤复发和转移并导致患者死亡的重要原因之一。对有效地从血液循环中去除癌细胞，抑制肿瘤的复发和转移，提高肿瘤晚期患者的生活质量有重要作用。3，体细胞免疫治疗过程，4，(a)自体树突状细胞疫苗(DC细胞)；(b)自体细胞因子诱导杀伤细胞(CIK细胞)；(c)自体树突细胞(DC)刺激CIK细胞(DC-CIK细胞)(4)自体自

2、然杀伤细胞(NK细胞)。(5)转基因自体DC细胞激活T淋巴细胞(DC-T细胞)(6)激活自体链CIK巴细胞(Capri细胞)，目前临床上使用多种体细胞免疫疗法。5)树突细胞疫苗，DC在人体内、immature dendritic cell(periphehery)、mature dendritic cell (lymphoid)、antigen capture and processing、6，树突状细胞刺激t淋巴细胞转化为效果细胞。7，多种直流肿瘤疫苗制备过程，如何获得高纯度肿瘤抗原？8，树突细胞在抗癌免疫中发挥着重要作用，2010.4.29美国食品和药物管理局批准proven ge(治疗晚

3、期前列腺癌患者的免疫活性细胞)作为癌症新的治疗方法自身免疫活性细胞治疗。Provenge的诱导作用是通过抗原呈递细胞(APCs)加载前列腺癌PAP (acid磷酸酶)抗原，然后激活肿瘤特异性CD8 T细胞，诱导抗前列腺癌免疫反应。这是FDA首次批准用于肿瘤治疗的自身免疫细胞。9，发病率高，状态慢，肿瘤相关抗原表达有限，化疗疗效有限，“非必需”组织，前列腺癌细胞免疫治疗的成功原因，PSA，PAP等，内分泌治疗无效的患者，此时肿瘤负荷小，身体具有一定的抗肿瘤能力NAT rev，进行性前列腺癌治疗剂10，Provenge疫苗。11，受试者：全部生存期512人：对照组21.7个月，治疗组25.8个月。

4、3年存活率：治疗组32%，对照组只有23%。副作用：主要是发烧、发冷、疲劳和疼痛。治疗结果，12，2011年诺贝尔生理医学奖，Bruce a . beutler Jules a . hoffmann Ralph m . steinman，2011年诺贝尔生理学或医学奖发表，美国、法国三位科学家因免疫学的发现而获此奖。奖金的一半是Bruce A. Beutler和Jules A. Hoffmann获奖的原因是在toll-like receptor和先天免疫激活中发现的。另一半奖金以“在树突细胞和后天性免疫中发现其作用”为由回到Ralph M. Steinman。美国科学家非犹特勒，卢森堡系科学家

5、霍夫曼，“Toll样受体(TLRs)及其配体”，2011年诺贝尔生理学奖，13，DC疫苗制备，提取骨髓30ml BMDC，14，在体瘤治疗中树突细胞疫苗的策略(1)，从外周血或骨髓中分离单个核细胞，体外诱导DC细胞，装载肿瘤抗原的DC细胞，通过静脉给患者再次传递或皮下注射(至少8次)，通过肿瘤抗原负载DC细胞刺激自身t细胞，产生强烈的抗肿瘤免疫反应。，通过常规治疗尽可能减少肿瘤负荷。15、树突细胞疫苗在实体肿瘤治疗中的策略(2)，装载肿瘤抗原的成熟DC刺激自体t细胞，产生细胞毒性t淋巴细胞，通过静脉将该细胞毒性t淋巴细胞传送回患者(至少4次)，直接杀死肿瘤细胞，日常治疗尽可能减少肿瘤负荷，从外

6、周血或骨髓中分离单个核细胞，体外，16，术后肾细胞癌细胞，未纯化的人肾细胞癌细胞，精制的肾细胞癌细胞，17、附着生长新细胞癌细胞，18，(6)链环CIK细胞的制备，激活的淋巴细胞，淋巴细胞，自体链环CIK细胞(CAPRI细胞)，PBMNC (80-100ml外周血或上血细胞分离机)，总培养，细胞激活，19，DC刺激t淋巴细胞的表型载入CEA抗原。20，部分抗原与肿瘤发生密切相关，Viral antisensor : primary hepatic carcinoma : heipatitis b virus，hepatitis c virus cervical cancer 33366prim

7、ary hepatic carcinoma 3360-FP。breakst cancer : her-2/neu、ba46、Etc。prostate cancer : PSA、psma、pap、21，在恶性肿瘤治疗中诱导自体DC-T淋巴细胞的策略，DC-T淋巴细胞体外诱导，DC-T淋巴细胞输血的患者(2周1次，至少4次)，特别杀死肿瘤细胞，抑制肿瘤的复发和转移，日常治疗尽可能减少肿瘤负荷，22，前列腺癌胸部CT:以上。内分泌治疗：诺雷德佐拉德克斯(goser Elin)/卡斯丁(bicalutamide)。PSA急剧下降，9个月后下降到0.2以下，继续保持9个月，然后选择间歇性治疗(两种药物均

8、停用)，PSA急剧上升，6个月后上升到16，继续内分泌治疗，PSA迅速下降到0.16，此后增强期为1416周。从2010年9月开始，左臀部明显出现的全身骨骼疼痛，胸部和腹部CT:椎体和髂骨转移灶，全身骨骼扫描：中轴骨的广泛转移。左髋臼和多根肋骨转移。2011 . 2-1: PSA : 1376 ng/ml，2011.3-28开始生物治疗，DC-t两次，2011.4.25 PSA: 737 ng/ml，2011.5.25现在患者没有明显的副作用，感觉到了精神提高。人生完全可以自己照顾，可以自由下床，左屁股不舒服，疼痛不明显，不需要止痛药。食物不错，精神也不错。23，DC-t细胞免疫治疗，前列腺癌

9、细胞高脂抗原PSA和PSMA负荷自体DC刺激自体t淋巴细胞治疗前列腺癌患者后外周血中PSA水平明显降低，PSA 3360 1376 ng/ml，PSA 561 ng/ml，24，(3)用CIK细胞治疗肿瘤，CIK细胞是利用人的外周血单核细胞体外抗cd 3m cab，il-2，IFN-，il-1等多种细胞因子，进行一段时间培养而得到的异种细胞群。在这些细胞中，CD3 CD56细胞被证明是CIK细胞群的主要效果细胞，这些细胞具有t淋巴细胞的强抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀菌特性，具有临床上强的光谱抗肿瘤活性。，25，自体CIK细胞的制造，PBMNC 0.5-3107(泵送患者50-60ml

10、外周血)，24个175cm培养瓶，IFN il-2cd3 mab il 1，12-14 days 1，26，淋巴细胞亚群检测，CD3CD56双阳性细胞数为42.35%，在CIK细胞中。27，CIK细胞杀死肿瘤细胞机制。28，(4)研究表明，自体DC细胞激活的CIK细胞通过体外诱导活性自体DC细胞，与自体CIK细胞一起培养该DC细胞，产生某种抗肿瘤免疫效果细胞(DC-CIK细胞)，从而大规模促进INF-的分泌，增加细胞毒性，提高对肿瘤细胞的杀伤效果。29，自体DC-CIK细胞的制备，CIK细胞，成熟DC细胞，DC细胞刺激的CIK细胞(1-1.51010)，pbm NC 0.5-3107(泵送患者

11、50-60ml外周血)，30，DC刺激的自体CIK细胞的表型，31、自体CIK、DC-CIK的临床肿瘤治疗策略，尽可能降低肿瘤负荷，在体外制造CIK或DC-CIK细胞(1x1010以上)，并将CIK或DC-CIK细胞转移给患者(2周一次，至少4次)，32，(5)自然杀伤细胞，自然杀伤细胞(自然杀伤细胞，NK)来源于造血细胞，成熟发展依赖骨髓和胸腺微环境，作为身体重要的免疫细胞，与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关。NK细胞没有事先暴露在抗原下，而是杀死目标细胞(如感染病毒的宿主细胞或肿瘤细胞)，因为NK细胞的杀伤活动没有MHC限制，所以被称为自然杀伤活动，在身体的免疫监视及早期抗感染免疫过程中起

12、着重要作用。33，自身自然杀伤细胞(NK cells)，PBMNC (30-40ml外周血)，6-8 175cm培养瓶，NK培养试剂IL-2，NK细胞数2-3109，34，NK细胞表型为CD56阳性基础细胞群。35，自体NK细胞治疗策略，体外诱导NK细胞，将NK细胞转移给患者(2周一次，至少4次)，提高身体的免疫功能，杀死残留的肿瘤细胞，抑制肿瘤的复发和转移，日常治疗尽可能降低肿瘤负荷。36、其他肿瘤的生物学特性(肿瘤类型、分期和肿瘤的免疫原性)，患者的遗传背景(家庭倾向与否)？)，目前状态(体质，免疫状态)，先行治疗，年龄等，以常规治疗为基础，开发了适合患者的个性化体细胞免疫治疗方案。第二，

13、开发适合患者的个性化体细胞免疫治疗方法。37，(1)对体质弱、免疫功能极低的高龄患者，提取少量血液，多次返回的治疗方法，抽血，30-40毫升外周血，1日，再次失去第三个CIK，再次失去第二个CIK4天、8天、12天、14天、16天、下一次治疗过程开始、第一次CIK会诊、38，(2)化疗联合细胞治疗的协同作用，化疗前1天血液提取50毫升，CIK或D-CIK免疫细胞培养，1周，2周，7天，化疗开始，第二次化疗开始，CIK或D-CIK等细胞转移，39，(3)体细胞免疫疗法与放疗相结合的协同作用，放疗前外周血50毫升，上午放疗前，放疗，放疗后，2周后，当天放疗后免疫细胞返回，2，40，(4)抗肿瘤效果细胞替代方案，第二周D-CIK，第三周NK，第四周D-CIK，提取血液30毫升，41、(5)抗肿瘤细胞因子、抗肿瘤抗体、生物分子靶向药物增强疗效计划、threshold for tumor regision、immune stimulation/inflammation、spontaneneIFN-，42，(6)身体细胞免疫疗法是肿瘤日常治疗的基本原则，恶性肿瘤，外科治疗，放射疗法和化疗敏感性(常规化学放射疗法)放射疗法和化学放射疗法间隙是细胞免疫疗法(卵巢癌、