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文档简介
1、.全自动血细胞分析SOP一、检查的目的和原理1、目的:使用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,分析人体血液中三个有形成分(红血球、白血球、血小板)的参数和三个直方图。 是人体血液的基本生理病理指标之一。白血球数世界棒球锦标赛淋巴细胞数Lymph#中间细胞数PS中性粒细胞数Gran#淋巴球的比例Lymph%中间细胞的比例PS %中性粒细胞率Gran%红血球数RBC足球俱乐部血红蛋白PS平均红血球体积PS公司平均红血球血红蛋白含量PS平均红血球血红蛋白浓度美联社红血球分布宽度变动系数RDW-CV战斗机红血球分布宽度标准偏差RDW-SD战斗机红血球压积HCT血
2、小板数PS平均血小板体积PS公司血小板分布幅度PS血小板压积PCT白血球分布直方图WBC Histogram红血球分布直方图RBC Histogram血小板分布直方图PLT Histogram对患者和健康人来说,观察有无各种原因引起的贫血、出血和出血是现在的机会身体有无细菌和病毒感染,可筛选白血病、血小板减少性紫癜等各种血液疾病。2、原理:电阻法测定的血液样品用稀释液指定比例稀释,测定WBC、RBC、PLT、HGB等参数。 WBC、RBC计数池的稀释标本,在负压下,通过各自的计数细孔,流入管道,通过两个光电传感器,这两个光电传感器之间的液量是用机器分析计数的标本量。用阻抗法测定了WBC、RBC
3、、PLT的体积分布和数量。 电极插入液体中的计数细孔的两侧,在计数细孔两侧的周围建立电场环境,根据血球的非传导性性质,细胞通过计数细孔时会发生阻抗的变化,阻抗的变化大小与细胞的体积成比例。WBC根据体积的大小有各种各样的形态,WBC的体积的大小根据稀释液、溶血剂、溶血时间而变化。 在一定程序控制下,显示WBC的三分类淋巴细胞、中间细胞(嗜酸碱单核细胞)和嗜中性细胞。在稀释后的血液样品中加入溶血剂后,红血球溶解而放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合体,使用波长525nm的单色光,在WBC计数池中测定该化合物的透射光强度,比较该透射光强度和空白状态的透射光强度,得到血红蛋白浓度(所谓空白状态
4、二、标本1、标本种类:外周血200-300毫升,静脉血2毫升。2、采样容器和添加剂:容器:外周血为一次性朔材料试管,静脉血为真空采血血管。 添加剂:每个实验使用不同的抗凝固剂,不能互相替代。 血液在EDTA-k2中抗凝固。3、采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。 采集时间:患者随时都可以采集。4、标本运输:标本采集后,应立即提交检查。5、标本的接收:标本编号必须与检查表编号一致,明确、准确、完整。6、准备和保存:在室温下静置10-15分钟,充分混合后,在桌子上检查。 血液的通常标本在室温下保存24小时。三、设备和试剂1、设备: BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪。 深圳迈利生物医疗电
5、子股份有限公司生产的。 产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400522号。2、专用试剂:稀释液: M-30PD等渗透溶液,具有特定的导电值,为细胞计数提供稳定的环境。 作为人体血球计数、体积测定及白血球分类计数时稀释液使用。 本品必须是透明液体,不得有沉淀物、浮游物、絮凝物。 主要成分,NaCl,Na2SO4,缓冲剂,抗菌剂。 本产品在2-30的保存期间为2年。 开封瓶后,使用温度为15-30,有效期为60天。产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400276号。冲洗液: M-30PR、蛋白酶和次氯酸钠(NaCIO )等不含强蛋白质除去剂的电解质溶液,用于机器的样品孔、阀门和管
6、道系统的清洗和清洗。 本产品必须是透明的液体,不得有沉淀物、浮游物、絮凝物。 主要成分、NaCl、KCl、Na2SO4、缓冲剂、抗菌剂和表面活性剂。 本产品在2-30的保存期间为2年。 开封瓶后,使用温度为15-30,有效期为60天。产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400303号。无氰溶血剂: M-30PCFL可溶解红细胞,与血红蛋白形成复合物。 用于白细胞计数、白细胞分组、血红蛋白测定。 本产品必须是透明的液体,不得有沉淀物、浮游物、絮凝物。 主要成分、NaCl、KCl、Na2SO4、缓冲剂、抗菌剂和表面活性剂。 本品在2-30的保存期为2年。 开封瓶后,使用温度为15-30,有
7、效期为60天。产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400274号。 E-Z洗涤液(酶洗涤液) :含有M-30PE、蛋白水解酶的电解质溶液,能有效地去除蛋白污染,用于机器的样品器、阀门和管道系统的洗涤和洗涤。 本产品必须是透明液体,不得有沉淀物、浮游物、絮凝物。 主要成分,NaCl,缓冲剂,抗菌剂,表面活性剂,蛋白水解酶。 本品在2-30的保存期为2年。 开封瓶后,使用温度为15-30,有效期为60天。产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400303号。探针清洗液: M-30PP,本产品为含有次氯酸钠的电解质溶液,用于机器的样品器、清洗和清洗。 主要成分、NaOH、次氯酸钠(Na
8、CIO )、表面活性剂。 本产品在2-30的保存期间为2年。 开封瓶后,使用温度为15-30,有效期为60天。产品注册号码:粤食药监器(准)字2005第2400303号。4、操作步骤1、接通电源前的准备:检查试剂(稀释液、冲洗液、溶血剂)是否充分,浑浊变质。试剂管路的连接是否正常,管路上是否有扭结。清空废液瓶。电源是否正常连接。2、开始引导:打开设备主体背面的电源开关。电源灯点亮,设备内部初始化,进行自检。自动清洗内部管道,自动测量背景。 80秒后进入计数画面。3、后台检查:出现计数画面后,机器自动测量的背景数值显示在画面上,要求背景结果WBC0.3 RBC0.03 HGB1 PLT10本来就
9、没有达到机器的要求时,机器会显示“后台异常”,请执行清洗和维护的步骤。4、室内质量管理操作:5、全血测定:在计数画面上,按下模式键,将模式设定为“全血”。以K2EDTA抗凝剂作为抗凝标本。混合抗凝固剂后,送至样品针下,将样品针插入抗凝固剂中。按下开始键,开始对样品进行计数。 58秒后测试结果显示在画面上。按下“打印”键,结果就会被打印出来。6、外周血测定:在计数画面中,按下模式键,将模式设定为“预稀释”。按“稀释液”,按“开始”按钮,用试管从样品针中提取0.7ml稀释液。将毛细血管采集的20l外周血标本迅速注入装有0.7ml稀释液的试管中,制作稀释血样(注意扎深针,用没有起毛的纸巾擦掉第一滴血
10、)。调制的稀释血液样品必须稳定(注意不要剧烈振动,可能会产生微小气泡,计数值偏移)。将预稀释血液样品放置3分钟后,再次摇动放在样品针下,按开始键计数。 58秒后在画面上显示测试结果。按下印刷按钮,结果就会被印刷。7、关机:每天的测试结束后,一定要用E-Z清洗液执行“关机”程序,等待画面显示“关闭电源”,然后关闭主机电源。WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、Lymph#、Lymph%、Gran#、Gran%六、结果分析和报告一、讨论标准:如果HGB低于80g/L,则必须重新考虑。wbc3*109/l以下或20*109/L以上者不进行研究。 直方图有明显异常者,必须按
11、染色油镜进行分类。需要确认PLT是低于5109/L还是高于35109/L2、仪器模式下分析出血细胞分析检查报告。七、参考值和临床意义:1 .血红蛋白测定(HGB):120-160g/L下降:贫血、白血病、大量出血、钩虫病等。 上升:慢性缺氧(肺气肿和先天性心脏病等)、严重脱水、大面积烧伤、慢性一氧化碳中毒和真性红血球症等情况。2 .红细胞计数(RBC):4.0-5.51012/L临床意义与血红蛋白相同,巨幼红血球贫血时减少更显着。3 .红细胞压积(HCT):0.42-0.49上升:脱水和大面积烧伤等引起的血液浓缩和真性红血球症的情况。 下降:贫血和血液稀释时。4 .红血球平均容积(MCV):
12、82-92fl用于贫血分类:增大为巨大红血球性贫血,减少为小细胞性贫血(例如,缺铁性贫血)和遗传性球型红血球症的正常红血球性贫血的情况是正常的。5 .红血球的平均血红蛋白含量(MCH):27-31pg用于贫血分类:增加大细胞性贫血,减少单纯小细胞性贫血和小细胞低色素贫血。6 .红血球平均血红蛋白浓度(MCHG):320-360g/L大细胞性贫血正常,单纯小细胞性贫血正常,小细胞低色素性贫血减少。贫血形态分类PR公司MCH美联社病因大细胞性贫血巨大红血球性贫血、恶性贫血正细胞性贫血急性出血、急性溶血、再障、白血病单纯小细胞性贫血灬灬慢性感染、炎症、肝病、恶性肿瘤、风湿性疾病小细胞低色素性血灬灬灬
13、缺铁性、地中海性、铁粒幼细胞性贫血7 .红细胞分布宽度(RDW): 11.5-14.5%反映血液中红血球的体积变异的参数,用测定红血球的体积大小的变异系数来表示。 RDW与MCV的结合使贫血为小细胞均匀性贫血(MCVRDW正常,地中海贫血等),小细胞不均匀性贫血(MCVRDW,缺铁性贫血等),正细胞均匀性贫血(MCV,RDW正常,常见急性出血和再生障碍性贫血),正细胞不均匀性贫血(MCV正常RDW, 可分为早期缺铁性贫血和急性溶血性贫血等),大细胞均匀性贫血(MCV RDW正常)大细胞不均匀性贫血(MCV和RDW都,如巨幼细胞性贫血和恶性贫血)。8 .白细胞计数(WBC): 4.0-10.01
14、09/L增加:细菌性感染、尿毒症、重度烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和压力状态(急性出血和大手术)增加(妊娠后期、经期、饭后、激烈运动后理性增加)。 减少:病毒感染、伤害和副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极为严重的感染、放射线照射、肿瘤化疗后和非白血病等。9 .白细胞分类(DC ) :正常参考值如下表所示检查项目英语缩写参考值中性粒细胞率NEUT %0.5-0.7淋巴球的比例LYMPH %0.2-0.4单核细胞的比例MONO %0.03-0.08嗜酸性粒细胞率EO %0.005-0.05嗜碱性球率基本%0.000-0.005中性粒细胞的绝对值二、NEUT #3.0-5.0109/L淋巴球的绝
15、对值LYMPH #1.0-3.0109/L单核细胞的绝对值MONO #0.067-0.325109/L嗜酸性粒细胞的绝对值欧盟号0.02-0.05109/L嗜碱性球的绝对值BASO #0.005-0.05109/L中性粒细胞:急性化脓性细菌感染、骨髓白血病、急性出血、溶血、手术后和尿毒症等常见的减少见于伤寒和副伤寒、疟疾、粒细胞缺乏症、放射和肿瘤化疗。 嗜酸性粒细胞的增加能看到过敏性疾病、寄生虫病等,其减少能看到伤寒和副伤寒等。 嗜碱性粒细胞增加可见于慢性骨髓白血病、何杰金氏病和铅中毒等。 淋巴球的增加见于病毒感染,其减少见于免疫缺陷症。 单核细胞的增加见于某些细菌感染和单核细胞白血病等。10
16、 .血小板数(PLT):100-350109/L减少:造血功能障碍(如急性白血病和再生障碍性贫血等)、血小板破坏过多(如原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进和全身性红斑狼疮等)和消耗增加(如DIC、血栓性血小板减少性紫癜等)的情况。 增加:急性大出血、急性溶血、真性红血球增加症、原发性血小板增加症、慢性骨髓性白血病等情况11 .血小板平均容积(MPV):9-17fl(1)血小板数低MPV增高:骨髓本身正常,但外周血血小板破坏增多,血小板降低刺激后反应性增殖,巨核细胞的DNA倍体数和细胞大小增加,MPV也增高。 骨髓被抑制血小板减少的患者在恢复初期MPV也上升,这主要是因为外周血血小板数的减少应激
17、导致巨核细胞倍体数增加。 (2)血小板数高,MPV正常:骨髓增生性疾病,如血小板增加,红血球增加,MPV正常。 (3)血小板数量和MPV下降:艾滋病病毒直接影响巨大核细胞,血小板减少。 约2/3患者的血小板数下降,92%患者的MPV值下降,与骨髓抑制时的血小板状态相似。 患有发育不良贫血的患者的累积板数通常下降,其MPV值也下降,但PDW上升。 如果骨髓纤维化和脉冲瘤细胞浸润威胁正常造血的话,血小板数量就会减少,MPV值也马上下降。 在再生障碍性贫血、骨髓瘤和白血病化疗后,败血症引起的血小板减少等骨髓抑制性疾病中,还有可能有很大的血小板,但血小板的平均体积在减少。 (4)MPV值和血小板数上升:在反应性血小板增加症
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