中药制剂分析 新技术新方法

1、第十章中药制剂分析中的新方法和新技术，1现代色谱技术，顶空色谱(液上气相色谱、顶空分析器)对样品基质上的气体成分进行GC分析， 测定这些成分在原样品中的含量顶空色谱的分类静态顶空GC，1现代色谱技术顶层气相色谱的主要特征样品预处理简单，可分析的含量低，组成复杂的样品容易挥发或分解或不能直接分析样品的液体和固体样品，1适用于现代色谱技术，顶层气相色谱的应用例，静态顶层气相色谱(内标法)测定血液中乙醇含量对照品溶液的制备10g/将l的乙醇储备液稀释10倍，将该液体精密地吸上来，将1ml装入顶空的样品瓶10ml中，同时精密地加入1ml内标准液(0.25%的正丙醇水溶液)，迅速密封，马上就得到了。 样

2、品采集精密混合1ml的血液样品，转移到顶空样品瓶10ml中，同时精密加入1ml的内标准溶液(0.25%的正丙醇水溶液)，迅速密封得到。 色谱条件(略)顶层空间分析条件的平衡温度为50，平衡时间为10分钟(快速搅拌下)，阀、输送管及定量管的温度为80，加压为13.8kPa，加压时间、填充时间和压力平衡时间均为0.15分钟，定量管为1.0ml。 1现代色谱技术、超高效液相色谱(UPLC，ultraperforperformancerformicchromatography )的主要特征固定相双(三乙氧基甲硅烷基)乙烷在硅胶中形成交联仅有1.7m耐压的粒度分布范围窄的列检测器响应高速样品单元10mm

3、的光路(与普通HPLC相同)，体积比500nL (普通HPLC的二十分之一)的优点高的分析速度，更好的分离效果和更高的灵敏度、速度、灵敏度和分离度，分别为HPLC 1现代色谱技术、超临界流体色谱(sfc supercriticalfluidchromatography )以超临界流体(低粘度、高密度和高扩散系数)为流动相。 GC和HPLC检测器适合分析GC的高沸点、非易失性样品分离速度优于HPLC，分离效果好。 实例用超临界流体色谱法测定怀牛膝制剂中齐墩果酸的含量，一种现代色谱技术，色谱法并用技术多维色谱，如二维薄层色谱等气相色谱-质谱联用技术液相色谱-质谱联用技术，2高效毛细管电泳(HPCE

4、 highperformancecapillaryelectrophoresis )，电泳：在电解质溶液中，电场中的带电离子根据电场力，与以不同速度带电的电荷反根据离子具有的电荷和性质，移动速度不同，可以分离。 1937年瑞典利用自由溶液电泳从人血清中提取的蛋白质混合液中提取白蛋白和、， 球蛋白1981年分离了Jorgenson和Luckas的毛细管柱中的各种电离子的移动速度是 =电渗流 ef阳离子运动方向和电渗流一致-=电渗流- -ef阴离子运动方向和电渗流相反0=电渗流中性粒子运动方向和电渗流一致离子、阴离子、中性粒子的分离一次完成，根据分离原理电场，毛细管柱出现了电泳现象和电渗流现象。

5、2高效毛细管电泳，机器装置电压：030KV。 分离柱未涂固定液，紫外或激光诱导荧光检测器可检测10-1910-21mol/L、2高效毛细管电泳，主要特征为高分辨率：理论级数达数百万片，更达数千万片。 高灵敏度：能检测出10-21mol/L的低浓度物质。高分析速度： 3分钟内能分离30种阴离子，1.7分钟能分离19种阳离子，4分钟能分离10种蛋白质。 样品用量少：数nL(10-9L )样品仪器简单，操作成本低：分析一个样品需要数毫升的流动液、2高效毛细管电泳，常见的毛细管电泳模式毛细管区电泳(CZE )毛细管胶束(以胶束为暂定相的电色谱)毛细管凝胶电泳(CGE ) (以凝胶为支撑体发挥分子筛的作

6、用)毛细管等电聚焦电泳(CIEF ) (用于分离蛋白质、多肽等两性物质)毛细管等速电泳(CIEF ) 离子分析.药物分析.手性化合物分析.核酸分析和DNA测序HPCE在中药制剂分析中的应用.生物碱的测定.动物类药剂的鉴别.指纹图像高效毛细管电泳法测定心舒口服液中腺苷、芦丁和阿魏酸的含量的对照品溶液(略) 以样品溶液的制备取心舒口服液10 mL，加热浓缩至约1 mL，加入60 %甲醇定容10 mL，在冰箱中放置一夜，用0. 45 mm过滤器过滤准备。 电泳条件是以熔融石英毛细管(50 mm 66 . 5 cm，有效分离长度58 cm )为分离路径，以105 mmol/L硼砂液为运转缓冲液，压力样

7、品50 mpa、6 s，毛细管柱温度20 ，运转电压0 30 min : 24 kV， 30 60 min : 28 kV检测波长为210 nm，毛细管柱在使用前用0.1 mol/L的氢氧化钠溶液、注射用水和运转缓冲液各清洗5、5、8 min，电泳后用运转缓冲液清洗8 min。 在该条件下同时测定了腺苷、芦丁和阿魏酸的含量。 (隋印等.中国医院药学杂志. 2005，25 (3) 3:232-234 )、3原子吸收光谱(AAS，atom absorption spectrometry )，工作原理1 )各元素的原子结构和外层电子构型不同，基态第一激发态3360迁移吸收能特征光谱线(共振线)。 3

8、 )利用测定对象元素的原子蒸汽中的基态原子和共振线吸收的关系进行定量分析。3原子吸收光谱、工作原理、3原子吸收光谱、原子吸收光谱仪尖锐线光源空心阴极灯、3原子吸收光谱、原子吸收光谱仪原子化系统将样品中的离子转换成原子蒸汽。 原子化方法火焰法无火焰法-电热高温石墨管、激光冷原子化法单色器(分散元件(棱镜、光栅)、凹凸反射镜、狭缝等)检测系统(光电池、光电倍增管、光电晶体管)、3原子吸收光谱，优点和缺点：原子化程度高，样品使用量高缺点：精度差，测量速度慢，操作不简单，装置复杂。 4建立中药指纹图谱、整体评价中药内在质量的中药指纹图谱原则尽可能多的霸盖整体特征明显，专业性强，重现性好，操作容易应用；

9、4建立中药指纹图谱、中药(化学)指纹图谱鉴别标准图谱中药材的选择是品种鉴定的优质正品另外，收集了多产地、有充分代表性、符合药用规格的样品，调查了图像特征的再现性。 如果能收集容易混淆或出现的赝品，用特定的特征区分、区分，则更理想。 实验样品的制备可以根据药材中含有的成分来选定，尽量考虑与不同成分的互换性，通常使用23种不同极性的溶剂制作供试品，应用于一组图像综合鉴定。 注意采样的代表性和均匀性。4中药指纹图谱、中药指纹图谱鉴别标准图谱的建立检查方法现代光谱(红外光谱、紫外光谱)色谱(气相色谱法、薄层色谱、高效液相色谱、毛细管电泳)其他(x射线衍射)， 4中药指纹图像中药指纹图像鉴别指纹图像的分

10、析研究指纹图像中特征信号的归属各指纹图像的相关研究相对指数、重叠率、八强峰等量化数据计算机辅助中药指纹图像相似度计算软件，4中药指纹图像、乙醇提取液中紫外吸收成分的HPLC分析(=254 nm ) 二甲基亚砜提取液中吸收成分的HPLC分析(=451 nm )、牛黄和天然牛黄指纹图谱的比较研究(丁冈等.中国天然药物，2004，2 (5) 309-312 )，5用其他技术、生物检定法评价中药质量实例1 :用生化指标评价中药质量和药效的例2 :大蒜提取物中大蒜辣素和大蒜新元素具有抗菌作用，利用生物检测方法检测的结果与气相色谱检测结果一致。 5其他技术，DNA分子遗传标记技术DNA分子遗传信息的直接载体，种类鉴别